头孢菌素类抗生素口服固体制剂的有关物质质量评价

梅芊，李茜，李杨，刘英

(河南省食品药品检验所，郑州 450018)

β-内酰胺类抗生素按作用机制可分为青霉素类和头孢菌素类。1945年意大利医学博士Giuseppe Brotzu[1]从撒丁岛卡利亚里市一个污水排放口附近的海水中分离出一种真菌，定义为顶头孢霉菌(Cephalosporin acremonium，现为Acremonium chrysogenum )。1954年牛津大学的Guy Newton和Edward Abraham从该株真菌中分离得到头孢菌素N，1955年又从头孢菌素N中分离出头孢菌素C，这是第一个具有广谱抗菌和耐青霉素酶特点的头孢菌素，但抗菌效力较弱。1962年礼来公司的Robert Morin发现裂解头孢菌素C上的侧链D-α-氨基己二酸可得到7-氨基头孢烷酸(7-ACA)，通过在其C7位上进行化学侧链修饰可以得到更新型、更高效的头孢菌素类抗生素。1964年第一个头孢菌素类抗生素药物(先锋霉素)应用于临床，而头孢菌素类抗生素因其广谱、低毒、易于给药和良好的药代动力学特性，成为目前使用最广泛的抗菌药物之一。头孢菌素类的作用机制与青霉素类相同，主要通过干扰细菌细胞壁主要成分肽聚糖的合成而发挥抗菌作用。根据头孢菌素类抗生素的开发年代、抗菌谱、抗菌活性、肾毒性及对β-内酰胺酶的稳定性可分为五代[2]。

2018年我省对口服头孢菌素类抗生素药品进行有关物质专项监督抽验，抽得样品共7个品种58批次。本文按检验标准对所有样品进行有关物质检查，并对结果进行分析，同时对发现的问题进行探讨，为口服头孢菌素类抗生素的有关物质分析及质量控制提供参考。

1 仪器与试药

1.1 仪器与试剂

Waters e2695/2489液相色谱仪(美国Waters公司)，Agilent 1200液相色谱仪(美国Agilent公司)，XPE205电子天平(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司)。甲醇、乙腈为色谱纯(MERCK公司)，盐酸、醋酸钠、10%四丁基氢氧化铵溶液、磷酸、乙酸、磷酸氢二钠、氢氧化钠、磷酸二氢铵、甲酸、25%四甲基氢氧化铵溶液、乙二胺四醋酸二钠、磷酸二氢钾、氢氧化钾均为分析纯，水为MillQ去离子水。

1.2 样品

头孢氨苄对照品(130408-201411，94.4%)，双氢苯甘氨酸对照品(130434-201403，94.7%)，7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸(130416-201006，98.5%)，α-苯甘氨酸(130415-200904，99.8%)，α-对羟基苯甘氨酸(130435-200502，99.4%)均由中国食品药品检定研究院提供。

58批次样品由河南省食品药品检验所监督办抽自省内经营单位57批次、医疗机构1批次，共7个品种。按照生产企业所属省份，覆盖全国14个省、自治区、直辖市，共29家，有一定的抽样代表性。具体抽样信息见表1。

2 试验方法

2.1 色谱条件

色谱柱为Kromasil 100-5-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)，进样量20 μL。各品种有关物质色谱条件见表2。

2.2 标准规定

各品种供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按表3的检验标准规定限值进行判定。

3 试验结果

本次抽验样品中，不同企业的同一品种相同剂型样品有关物质含量差异较小，且均远低于标准规定限值，表明目前上市的头孢菌素类抗生素有关物质总体情况均良好。

3.1 头孢拉定

头孢拉定胶囊检出主要杂质17个，7-ADCA结果为未检出0.01%，均值为0.03%；杂质13含量最高，均值为1.3%；杂质2～杂质6含量相对较高，均值在0.03%～0.14%之间；其余杂质含量均较低，均值不大于0.01%；不同企业间的样品同一杂质含量差异较小。

3.2 头孢克肟

抽验头孢克肟品种包含4个剂型，头孢克肟片、胶囊、分散片有关物质标准为中国药典2015年版二部，不同剂型样品中均为杂质5含量最高，除杂质2外，其余杂质的含量基本无差异，见图1。头孢克肟咀嚼片有关物质执行标准为国家食品药品监督管理局标准YBH02452012，共检出14个杂质，见图2，同一企业不同批次间结果基本一致。

表1 抽验样品信息

表2 有关物质色谱条件

表3 各品种有关物质标准规定限值

3.3 头孢氨苄

抽验头孢氨苄片仅1批次，未检出7-ADCA，α-苯甘氨酸含量为0.006%，其他单个杂质为0.1%，其他各杂质和为0.2%，均远低于规定限值。

头孢氨苄胶囊共19批次，检出5个杂质，各企业间样品的7-ADCA、α-苯甘氨酸、其他单个杂质及其他各杂质和含量差异较小，均远低于标准规定限度。

3.4 头孢呋辛酯

抽验头孢呋辛酯片、胶囊共检出6个杂质，典型色谱图见图3，其中△3-异构体含量相对较高，且各企业间差异稍大，但均低于规定限度，△3-异构体为降解产物[13]，故其含量的差异可能与企业间不同生产工艺有关；其余杂质含量基本一致。

3.5 头孢泊肟酯

抽验头孢泊肟酯片共检出18个杂质，见图4，杂质C+杂质B-Ⅱ的含量最高，且企业间差异较大；其余杂质含量均较低，企业间结果基本一致，差异较小。

3.6 头孢地尼

头孢地尼胶囊仅抽到1批次，检出杂质G与杂质H和为0.2%，杂质I为0.1%，杂质J为0.1%，杂质M与杂质N和为0.1%，杂质Q为0.1%，杂质S为0.04%，各杂质峰面积和为0.5%，均低于规定限度。

3.7 头孢羟氨苄

本次抽验抽取头孢羟氨苄片仅1批，仅检出α-对羟基苯甘氨酸，含量为0.04%，其他杂质均未检出。

4 讨论

4.1 样品的有关物质总体质量

按规定质量标准检验结果显示，本次我省头孢菌素类抗生素口服固体制剂的专项监督抽验样品有关物质情况良好。

4.2 质量标准探讨

由于β-内酰胺抗生素的不稳定性及其生产工艺特点，使其有关物质的含量相对较高，种类也较多，这也是β-内酰胺抗生素产生速发型过敏或其他严重不良反应的主要来源，所以有关物质研究是其质量控制的重点也是难点[14]。本次抽样有关物质测定结果显示各品种检出杂质数目较少，且大部分杂质的含量均远低于标准规定限值，说明各生产厂家的生产工艺能很好地控制质量标准下规定的有关物质，对产品质量起到了一定的控制作用。但各品种的现行标准中有关物质项尚不完善，主要体现在以下几个方面。

图1 头孢克肟片、胶囊、分散片的有关物质含量图

图2 头孢克肟咀嚼片的有关物质含量图

图3 头孢呋辛酯类制剂的有关物质含量图

图4 头孢泊肟酯片的有关物质含量图

4.2.1 色谱条件

流动相缓冲液盐浓度高(0.2mol/L)，在做大批量样品的评价性检验工作时，易造成盐的析出，堵塞色谱系统，造成色谱柱柱压明显升高[15]。

4.2.2 杂质限度

国外药典已增加对已知杂质的控制，且在限度控制方面较中国药典更为严格。如BP2019中头孢拉定[16]有关物质项下，除控制单杂、总杂外，对特定杂质A、B、C、D、E、F、G均单独控制，而中国药典2015年版二部中头孢拉定[17]有关物质项仅对双氢苯甘氨酸、7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸单杂和总杂进行控制，且各限值均比EP规定限值低。对原料中有关物质的严格控制是影响制剂中杂质水平的首要因素，从产品安全性方面考虑，建议中国药典对头孢拉定及其制剂中的有关物质限度进行完善和提高，收录英国药典中杂质A～杂质F的结构，结合该品种历年国家药品评价性抽验的探索性研究结果，增加对特定杂质的定量控制。

4.2.3 质量标准的统一

个别产品未收载于药典，同一品种不同剂型的产品质量标准不统一，如头孢克肟分散片、胶囊剂、片剂均收载于中国药典，而头孢克肟咀嚼片执行国家食品药品监督管理局局颁标准。两个标准中有关物质的色谱条件存在差异，限度规定也不同，一定程度上增加了对该品种有关物质质量进行评价和比较的难度，不利于该品种质量水平的提高。

为更客观地反映各品种有关物质的质量情况，并与其不良反应建立关联，保证用药安全，建议统一各剂型的质量标准，改进标准中有关物质的色谱系统，结合我国每年的药品评价性抽验相关研究内容，对各品种确定的已知杂质进一步研究并按需要写入标准进行控制，持续提高质量标准。