头孢克肟栓剂的制备及质量评价

蒋 妮，鲍 旭，高 萌，何 艳，田 舸，田 燕

(1.大连儿童医院 药剂科，辽宁 大连 116012；2.大连医科大学 药学院，辽宁 大连 116044)

头孢克肟(Cefixime)，化学名为7{[2-氨基-4-噻唑基(羧甲氨基)]亚胺-乙酰基)-氨基-3-乙烯基-8-氧-5-硫杂-卜氮杂二环[4.2.0]-2-辛烯-2-羧酸[1]，对α-溶血性链球菌、 溶血性链球菌和肺炎球菌有强大抗菌作用，是一种抗菌谱广，抗菌作用强，血药浓度维持时间长，对多种内酰胺酶稳定，可口服的第三代头孢菌素类抗生素[2]。目前，头孢克肟的剂型主要有胶囊剂、片剂、分散片、咀嚼片、颗粒剂、干混悬剂等，但药动学数据提示口服头孢克肟各剂型相对生物利用度差异无显著性意义(P>0.05)[3]。

由于头孢克肟在水中溶解度小、对胃肠道副作用较大，尤其是空腹时可引起恶心、呕吐、腹泻等，使其应用受到限制，为此根据肛门栓剂直肠给药可以降低肝脏首过效应的原理研制头孢克肟栓剂，通过改变给药途径的方法来降低其对胃肠道的不良反应。根据头孢克肟本身的结构和性质，本研究采用热熔法制备头孢克肟栓剂，并对其进行质量评价，测定其含量、体外释放度等，为头孢克肟的开发和应用奠定基础。

1 材 料

1.1 仪 器

1200型高效液相色谱仪(美国Angilent 公司)，RB-1融变时限测试仪(天津天光光学仪器有限公司)，FA1104I上皿电子天平(上海精科仪器有限公司)，501型超级恒温水浴(上海市实验仪器厂)，RCZ-5A智能药物溶出仪(天津大学精密仪器厂)。

1.2 试 药

头孢克肟对照品(中国药品生物制品检定所，批号：100610，纯度：97%)，头孢克肟(上海天寰药业有限公司，批号：100330，纯度：98%)，头孢克肟胶囊(上海海虹实业集团巣湖今辰药业有限公司，批号：100925，规格：100 mg/粒),聚乙二醇4000(PEG4000，国药集团化学试剂有限公司，批号：100427)，聚乙二醇400(PEG400，国药集团化学试剂有限公司，批号：(00330)，吐温 80(沈阳新兴试剂厂，批号：091109)，乙腈(色谱纯，美国Tedia公司，批号：1009262)，磷酸氢二钾、磷酸二氢钾等试剂均为分析纯。头孢克肟栓剂(大连医科大学药剂学教研室自制，规格：100 mg/枚)。

1.3 测定波长的选择

精密称取头孢克肟对照品适量，用流动相溶解稀释，制成约20 μg/mL的对照品溶液，在200～400 nm范围内扫描(见图1)，最大吸收波长在288 nm 处，而所用辅料在此条件下无干扰，故选择288 nm作为头孢克肟的检测波长。

1.4 色谱条件[4]

色谱柱为HYPERSIL C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：乙腈:0.25%四丁基氢氧化铵溶液(1∶2，取0.4 mol/L 四丁基氢氧化铵溶液25 mL，用纯化水稀释至1000 mL，用1.5 mol/L磷酸调至pH7.0)；检测波长：288 nm；流速：1.0 mL/min；温度：25℃。在此条件下，理论塔板数按头孢克肟计算不低于4000。精密量取头孢克肟对照品10 mg和头孢克肟栓剂适量(含头孢克肟约10 mg)，分别置50 mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，按上述色谱条件，分别进样，头孢克肟对照品和头孢克肟栓剂的HPLC色谱图分别见图2和图3(保留时间在10.1 min左右，图3中峰1为头孢克肟峰)，分离度符合要求。

图1 头孢克肟对照品的紫外光谱图

图2 头孢克肟对照品的HPLC色谱图

图3 头孢克肟栓剂的HPLC色谱图

2 方法和结果

2.1 头孢克肟栓剂的制备

采用热熔法，称取PEG4000 5.5 g和PEG400 3.5 g置蒸发皿中，在水浴上加热使全部熔化、混匀，另称取头孢克肟样品1.0 g，分散于适量吐温80中，在搅拌下加入到已制好的水溶性基质中，搅拌均匀。趁热注入已涂好润滑剂的栓模中，共制10枚，固化(温度为-2℃)。脱模，用吸水纸吸去栓剂表面残留的液体石蜡，得头孢克肟栓剂，每枚1.0 g(规格：100 mg/枚)。

2.2 质量评价[5]

2.2.1 外 观

按上述工艺条件制备三批栓剂(批号：20100915，20100916，20100917)，均为乳白色，外形光滑圆整，大小均匀，色泽一致，硬度适中。

2.2.2 重量差异及融变时限

按《中国药典》2010版二部附录规定操作，三批栓剂(批号：20100915，20100916，20100917)的重量差异分别为±1.12%、±1.51% 和±1.47%；融变时间分别为22 min 14 s、20 min 23 s和21 min 35 s，结果符合《中国药典》规定。

2.2.3 含量测定

2.2.3.1 头孢克肟标准曲线的绘制：精密称取干燥至恒重的头孢克肟对照品10 mg于10 mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，得浓度为1 mg/mL的对照贮备液。精密量取头孢克肟对照贮备液100、200、400、800、1200、1600 μL置于10 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，配成10、20、40、80、120、160 μg/mL的系列浓度对照液，分别进样分析，按1.4项色谱条件测定峰面积，以对照品溶液的浓度(C)为横坐标、以峰面积(A)为纵坐标作图，进行线性回归，得标准曲线方程为A=4237.8C-1589.3，r=0.9996，头孢克肟浓度在10～160 μg/mL之间,线性关系良好。

2.2.3.2 精密度试验：精密量取头孢克肟对照贮备液200、800、1200 μL各5份，置10 mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，制备成20、80、120 μg/mL的低、中、高3个组，按2.2.3.1项下方法测定5次和每天在同一时间进样、连续测定5 d，分别测定头孢克肟对照贮备液的日内精密度和日间精密度(5 d)。结果日内RSD分别为1.57%、2.13%、1.96%，日间RSD分别为2.24%、2.35%、2.47%，取样精密度良好。

2.2.3.3 重现性试验：取同一批号的头孢克肟栓剂(批号：20100915，200 mg/枚)5份，200 mg/份，分别置于25 mL量瓶中，加入约50℃ 60%甲醇溶液20 mL，使其溶解后再加甲醇定容至刻度，摇匀后过滤，弃去初滤液，精密量取续滤液1000 μL置于10 mL量瓶中，用流动相稀释后按1.4项色谱条件分别进样分析，测定峰面积A，根据标准曲线方程计算含量。测得样品中头孢克肟含量的RSD为1.78%，该方法重复性好。

2.2.3.4 加样回收试验：精密称取同一批号的头孢克肟栓剂(批号：20100916)9份，250 mg/份，分别置25 mL量瓶中，每3份分别精密加入1 mg/mL头孢克肟对照贮备液500、1000、1500 μL，余下操作同2.2.3.3项。于288 nm波长处测定峰面积A，根据标准曲线方程计算含量，以测得量与加入量比较，计算回收率。结果低、中、高浓度样品中头孢克肟平均回收率分别为98.97%、100.35%、101.86%(RSD=1.47%)，此法用于测定样品含量的准确度好。

2.2.3.5 稳定性试验：分别精密称取自制头孢克肟栓剂(批号20100918)100、200、300 mg，按2.2.3.3项下操作，取续滤液1000 μL置于10 mL量瓶中，制备成低、中、高三个浓度的样品溶液，分别测定0、0.5、1、2、4、6、12、24、36、48 h时的峰面积A。根据标准曲线方程计算含量，结果测得低、中、高三个浓度的RSD分别为2.10%、0.76%、0.38%，样品溶液在48 h内稳定。

2.2.3.6 含药量的测定：精密称取相当于头孢克肟约20.0 mg的头孢克肟栓剂三批(批号：20100915，20100916，20100917)各200 mg，余下按2.2.3.3 项下操作，测定峰面积A，根据标准曲线方程计算含量。结果样品中头孢克肟含量平均为10.2%(RSD=1.57%，与理论含药量10%接近)。

2.2.4 有关物质检查

取头孢克肟栓剂三批(批号：20100915，20100916，20100917)1000 mg各3份(每份含头孢克肟约100 mg)，置100 mL量瓶中，加磷酸盐缓冲液(pH 7.0)溶解(必要时超声处理使溶解完全)并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；同法制备对照品溶液。精密量取对照品溶液20 μL，按2.2.3.3 项下操作，调节灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为记录仪满量程的20%。再精密量取对照品和供试品溶液各20 μL，记录色谱图至主成分峰保留时间的2.5倍。根据标准曲线方程计算各杂质的总量，结果三个批号有关物质平均含量分别为1.03%、0.87%、0.94%，符合规定。

2.2.5 溶出度的测定

按照《中国药典》2010年版溶出度测定法规定[6]采用转篮法，转速为100 r/min，温度为(37±1)℃。以pH 7.2的磷酸盐缓冲液为溶出介质(取磷酸二氢钾6.8 g，加水适量溶解，用1 mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值至7.2，用纯化水稀释至1000 mL)，取头孢克肟栓剂6枚(规格：100 mg/枚)及头孢克肟硬胶囊6粒(规格：100 mg/粒)分别投入杯中，自样品与介质接触时开始记时，分别于5、10、15、30、45、60、90、120 min采样5 mL，并立刻补充同体积等温新鲜介质，每个取样操作在30 s内完成，0.45 μm微孔滤膜过滤，得到溶出液样品。分别按1.4项色谱条件进样分析，测定峰面积，根据标准曲线方程计算含量，并用SPSS 11.5统计软件，多组资料采用方差分析，两组间比较采用t检验，结果见表1。

表1 头孢克肟在硬胶囊剂和栓剂中的溶出度

Tab 1 Dissolution rates of Cefixime suppositories and Cefixime hard capsules

表1 头孢克肟在硬胶囊剂和栓剂中的溶出度

1)与硬胶囊剂溶出度相比，P<0.05

时间(min)5101530456090120栓剂溶出度48.8±2.2369.2±1.2181.6±1.2290.3±1.311)95.9±1.6897.8±0.9098.2±0.8798.7±0.88硬胶囊剂溶出度43.7±2.4859.6±1.3670.5±1.4081.2±1.5982.8±1.5383.5±0.9884.2±0.9484.9±0.86

结果表明，头孢克肟栓剂在规定介质中30 min时的体外溶出度为(90.3±1.31)%，而市售头孢克肟硬胶囊的体外溶出度为(81.2±1.59)%，二者在30 min时的体外溶出度差异有显著性意义(P<0.05)，结果均符合《中国药典》2010版二部附录规定。

3 讨 论

头孢克肟是一种抗菌谱广、抗菌作用强、引人注目的头孢菌素类抗生素。但是，由于其口服后对胃肠道不良反应较大，根据其结构和性质，通过改变剂型可以提高其生物利用度、降低药物的不良反应[7,8]。

用热熔法制备的头孢克肟栓剂呈白色，表面光滑圆整，色泽均一，硬度较好，重量差异、融变时限均符合《中国药典》2010版二部附录规定[5]。

热熔法制备栓剂是基于固体分散体的原理[9]，将药物高度分散于药物基质中，药物以分子、胶态、微晶或无定形粉末等状态存在，能大幅度减小难溶性药物的粒度，增大其溶出面积。同时，聚乙二醇类基质水溶性较强，能将药物表面润湿，有利于药物的溶出，加快了有效成分的溶出速度，提高其吸收效果。本研究采用水溶性基质，用热熔法制备头孢克肟栓剂，改善了药物的溶解性能，加快其溶出速度。试验结果表明，30 min时头孢克肟栓剂的体外溶出度比头孢克肟硬胶囊的体外溶出度提高约11.2%(P<0.05)，而头孢克肟栓剂在体内的生物利用度及药物动力学等有待于进一步的研究。

参考文献：

[1] Rex N, Brogden-eborah M, Campoli-Richards. Cefixime: A review of its antibacterial activity, pharmacokinetic properties and therapeutic potential[J]. Drugs, 1989,8:524-550.

[2] Liu XD, Xie L, Gao JP, et al. Cefixime absorption kinetics after oral administration to humans[J]. Eur J Drug Metab Pharmacokinet,1997,22: 185-188.

[3] 张建国,王本杰,郭瑞臣,等.头孢克肟3种剂型的人体生物等效性评价[J].中国临床药学杂志,2005,14(5):297-301.

[4] 毕津莲,李湘斌.高效液相色谱法测定头孢克肟胶囊的含量[J].中国现代医学杂志,2008,18(21):3214-3216.

[5] 中华人民共和国药典委员会.《中华人民共和国药典》(二部)[S].北京:化学工业出版社,2010.附录7-8,83-85, 87-88.

[6] 中华人民共和国药典委员会.《中华人民共和国药典》(二部)[S].北京:化学工业出版社,2010.184-185.

[7] 董淑英,童旭辉,李见春.头孢克肟口腔崩解片在健康人体的生物等效性[J].中国医院药学杂志,2009,29(20):1739-1742.

[8] 张媚,金乐红,唐婷.高效液相色谱法测定头孢克肟咀嚼片的含量[J].健康研究,2011,31(1):9-11.

[9] 龙晓英,房志仲.药剂学[M].北京:科学出版社,2009.172-173.