731例胎儿和新生儿溶血病预防性检测结果分析

马 玲

(河北省承德市中心血站， 河北 承德 067000)

近五年来，胎儿和新生儿溶血病(Hemolytic Disease of the fetus and the newborn,HDFN)患病数量呈上升趋势，预防性产前新生儿溶血病检测抗体及效价发现存在新生儿溶血病风险并能够将胎儿和新生儿溶血病的危害降到最低。新生儿溶血病发生机制是胎儿微量红细胞进入母体血液循环后，由于与母血血型存在差异，发生溶血现象。胎儿的血型基因来自于父亲母亲，母亲缺少父亲所携带的基因，母体的抗体由于胎儿红细胞膜上父亲基因编码的抗原刺激产生，此抗体为IgG类免疫性抗体，能够通过胎盘进入胎儿血循环，并且与胎儿红细胞相结合并破坏红细胞而发生溶血现象。本文选取血站需要进行新生儿溶血病检测的血液标本，共计731例，按照血型、孕妇抗体效价、新生儿发病率进行相关分析，以期发现HDFN的发病相关危险因素。

1 资料与方法

1.1一般资料:收集2015年至2019年期间送往本血站需要进行新生儿溶血病检测的血液样本731例，孕妇年龄23～42岁，孕周16～32周。纳入标准：孕妇为A型B型O型AB型或RhD阴性血液样本；所有受检孕妇均知情同意，及新生儿怀疑溶血病标本进行血型血清学检查,血样均为3mL EDTA抗凝管采集。

1.2方法:采用试管法进行ABO和RhD血型鉴定，CcEe抗原检测，2-疏基乙醇(2-ME)处理待检血清，7支试管分别标记1∶4；1∶8；1∶16；1∶32；1∶64；1∶128；1∶256，用生理盐水进行倍比稀释，加入处理后血清与丈夫相应血型红细胞，应用间接抗人球蛋白法测定血清lgG抗-A和(或)抗-B效价及不规则抗体的检测，对抗体筛查阳性者进行抗体效价的检测及抗体特异性鉴定。应用微柱凝胶卡法进行新生儿溶血三项试验，包括直接抗人球蛋白试验、抗体释放试验和游离抗体试验。

1.3评价标准:ABO血型系统IgG抗-A和(或)抗-B效价值≥64时或RH血型系统抗D,抗E,抗Ce等抗体效价值≥32时提示具有患病风险。孕期检查共分为三次，第一次检测在16-20周，第二次在28周左右，第三次在32周左右,三次中有一次抗体效价值超过临界值，此标本记为一个存在风险性标本。新生儿溶血三项试验：游离试验(阳性怀疑患病)，直接抗人球蛋白试验、放散试验(其中放散试验一项或两项阳性为患病),三项阳性为患病。

1.4统计分析:采用SPSS21.0统计软件包进行计算分析，计数资料以率(%)表示，采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1孕妇HDFN检测出存在风险的血型分布:ABO血型系统及Rh血型系统存在风险样本进行统计分析，ABO血型系统检测出存在风险样本83例，ABO-HDFN(+)检出率为11.36%，Rh血型系统检测出存在风险样本15例，Rh-HDFN(+)检出率为2.06%，χ2=4.27，P<0.05，差异具有统计学意义。在731例样本中，孕妇新生儿溶血病检测存在风险样本的血型分布不同，ABO-HDFN(+)检出率高于Rh-HDFN(+)检出率,孕妇O型检测数和检出率均最高。见表1。

表1 731例样本中孕妇HDFN检测存在风险的血型分布n(%)

2.298例高风险HDFN孕妇抗体分布情况:98例高风险HDFN孕妇中，74例新生儿溶血病，达75.51%(74/98)，且抗体滴度越高，发生HDFN病风险越高，在抗体效价≥1:128时，HDFN患病率最高，与其他不同效价抗体滴度比较，有统计学差异。见表2。

2.398例高风险HDFN孕妇胎儿出生时间分布情况:98例存在新生儿溶血病风险的孕妇中，新生儿出生时间越早，发生HDFN风险越高，与出生4～10d比较,第0～3天所生新生儿HDFN发生率显著升高，有统计学差异(P<0.05)。见表3。

表2 HDFN孕妇抗体分布情况n(%)

表3 HDFN新生儿出生时间分布情况n(%)

3 讨 论

通过检测孕妇体内是否存在相应的lgG类导致胎儿溶血的抗体及效价,预测母亲与胎儿之间是否可能存在血型不合，导致新生儿溶血病[1]。本文研究发现，进行孕妇新生儿溶血病检测的血液样本731例中，ABO-HDFN(+)显著高于Rh-HDFN(+)检出率，ABO血型系统的新生儿溶血病主要发生在第一胎，Rh血型系统的新生儿溶血病主要发生在第二胎，但Rh血型系统患病比ABO血型系统患病严重，孕妇O型检测数和检出率均最高，胎儿为A型或者B型造成新生儿溶血病的可能性更大，是由于A、B型的胎儿在母亲血型抗体免疫刺激下产生更多的IgG抗体，胎儿红细胞上的B位点抗原决定簇较A位点少，同时B型的IgG抗体结合力也弱于A型[2]。

溶血程度与效价值呈正相关，使之产生不同程度的溶血，可引起胎儿贫血、水肿、流产、死胎、早产。本文中检测出孕妇存在风险样本98例，跟踪检测所生新生儿患病数74例，患病率为75.51%，抗体效价≥1:128患病率最高，患病率有随抗体效价值增加而增高的趋势，孕妇在怀孕前就有可能多种原因已产生高效价的LgG类ABO抗体[3]。女性由于妊娠、流产或输血等免疫刺激下产生抗体，胎儿体液免疫不成熟，体内抗体几乎全部来自母体的血液循环，红细胞上有相应的抗原，则导致新生儿溶血病的发生。随着妊娠次数的增加，患新生儿溶血病的机会也会随着增加，并且更加严重[4]。早发现早治疗，为临床提供有价值的诊断和防治的依据。

新生儿采样时间越早阳性检出率越高，0～3d阳性率88.71%高于4～10d阳性率52.78%，这一结果与迟媛媛等[5]的文献报道结果一致，因此临床怀疑新生儿溶血应尽早采集标本。因为发病时间越长，会中和大部分的IgG血型抗体，结合成抗原抗体复合物并且失去了反应原性，同时机体识别并溶解破坏大部分的致敏红细胞，阳性检出率也就下降。出生3d内采集标本，更能准确的检测出新生儿溶血病，这对降低新生儿的病死率以及提高治愈率具有非常重要的意义[6]。

病情取决于孕妇产生抗体的多少、抗体与红细胞结合并破坏的强弱、胎儿造血和免疫功能等诸多状况。孕妇产前抗体检测和抗体效价监测，产后新生儿溶血三项试验和高胆红素测定，能够有效确诊新生儿溶血病。孕妇对于新生儿溶血病进行早期筛查应引起重视，通过产前抗体及效价检测，早发现并及时与孕前、孕中及产后采取相应处理，降低造成新生儿溶血病的风险，减少对新生儿的损害。尤其再次妊娠(包括流产)或者输过血的女性，免疫刺激下产生抗体，孕前及孕中都有必要做新生儿溶血病预防性检测。出生后怀疑为新生儿溶血病的患儿，要尽早采集3d内标本进行新生儿溶血病确诊检测，为提高治愈率争取宝贵时间。