陕北白绒山羊消化道线虫驱虫试验及驱虫后两个月消化道线虫感染变化

冯 平，折帅帅，李 直，史 杰，王玉荣，秦凯星，张 艳

(榆林学院 生命科学学院，陕西榆林 719000)

陕北是羊传统养殖区，羊存栏占陕西省的59.3%，其中榆林占54%。近年来，由于经济的快速发展，人民生活水平也大幅度提高，使群众对畜产品的消费需求也日益提高。从市场来看，羊肉的价格持续走高，羊肉的需求量日益增长，羊养殖行业也迅猛发展起来。羊寄生虫感染也成为羊养殖业的巨大难题，特别是榆林地区羊场饲养密度大，卫生条件难于保障，寄生虫的危害是非常大的，它以一种极隐蔽的形式消耗羊的营养，影响羊只健康，损害其繁殖性能，抑制羔羊的生长发育，降低羊产品的产量和质量，严重时会导致羊群大批量死亡，给养殖企业造成巨大的经济损失。尽管采取了多种措施，也开展了驱虫，但羊的寄生虫感染仍然得不到解决。杨红等[1]、岳宪志[2]、秦绍林[3]对羊寄生虫病进行研究，发现羊寄生虫病的危害并提出了具体的防治措施。李兴如等[4]对陕西地区的羊寄生虫感染情况开展研究，详细介绍了陕西地区的主要羊寄生虫感染情况，并提出了具体的驱虫方案。有研究用不同驱虫药物做了相关驱虫试验，从常用驱虫药物中筛选出针对羊寄生虫的驱虫药，使用这些驱虫药能有效地提高驱虫效率，并简化驱虫工作[5-8]。因此，在常用驱虫药中筛选合理有效的驱虫药，可为羊生产的驱虫实践提供理论依据和技术支持。在动物生产中，畜牧业生产者使用合理有效的驱虫药进行驱虫，可提高驱虫效率，增加养殖效益，但在实际的驱虫工作中往往会忽略寄生虫的耐药性问题。有关研究[9-12]针对寄生虫对常用驱虫药的耐药性进行分析，结果发现，寄生虫普遍存在耐药性问题，从而影响驱虫效果。羊消化道寄生虫主要包括线虫、球虫、绦虫、吸虫等，其中线虫、球虫的感染率较高。不同季节、不同年龄的羊可感染消化道寄生虫，张艳艳等[13]、阎晓菲等[14]对羊只消化道寄生虫的感染季节动态变化进行相关试验，通过对寄生虫的优势虫种和流行规律的研究，提高了驱虫工作的效率。本试验通过对陕北白绒山羊消化道线虫的调查及驱虫试验，并对驱虫后寄生虫的动态变化进行研究，以期为陕北白绒山羊养殖中寄生虫驱虫计划的制定提供参考。

1 材料与方法

1.1 材 料

1.1.1 主要药品与试剂 伊维菌素注射液：成都中牧生物药业有限公司(批号：220981028)；伊维菌素芬苯达唑预混剂：山东圣地宝药业有限公司(批号：150056305)；芬苯达唑粉剂：湖南加农正和生物技术有限公司(批号：180191289)；氯化钠：天津市大茂化学试剂厂(批号：20180516)；氢氧化钠：天津奥普升化工有限公司(批号：20170620)；碘化钾：天津市科密欧化学试剂有限公司(批号：20180905)。

1.1.2 主要仪器 生物显微镜：麦克奥迪实业集团有限公司(型号：BA400Digital)；恒温培养箱：北京科伟永兴仪器有限公司(型号：DH 303)。

1.2 方 法

1.2.1 试验分组与给药方法 选取64只陕北白绒山羊，随机分为4 组，分别为空白饲喂组、伊维菌素注射液组、芬苯达唑粉组、伊维菌素芬苯达唑预混剂组，均为陕西省榆林市绥德县瑞鑫养羊合作社成年母羊。空白饲喂组为正常饲喂，不进行任何驱虫；伊维菌素注射液组：驱虫方式为皮下注射，使用剂量为0.2 mg/kg；芬苯达唑粉组：驱虫方式为内服，使用剂量为5～7.5 mg/kg；伊维菌素芬苯达唑预混剂组：驱虫方式为混饲，使用剂量为1 g/kg[15]。

1.2.2 粪便采集 随机采集试验羊只粪便，收集于一次性塑料袋内，将袋内空气排空，密封，置于4 ℃冰箱内备检。

1.2.3 粪便检查 驱虫前，驱虫后14 d分别对试验动物的粪便进行线虫虫卵检查及虫卵种类鉴定；并分别于驱虫前，驱虫后14 d、1个月、2个月进行线虫虫卵检查和虫卵计数。

用饱和食盐溶液漂浮法检查被检粪样，得出感染率。根据虫卵、幼虫的大小、颜色、形态等特征，参考文献和蠕虫标准图谱确定虫卵种类[16-18]，感染线虫中感染率最高的线虫种类确定为该羊场优势虫种。

用司陶尔虫卵计数法对有线虫虫卵的粪样进行虫卵计数[18]，得到感染强度结果，用每克粪便中的虫卵数(EPG)来表示(n/g)。

1.2.4 虫卵转阴率、虫卵减少率的计算 虫卵减少率=(对照组在试验14 d后的虫卵数-试验组在试验后14 d的虫卵数)/对照组在试验14 d的虫卵数×100%

虫卵转阴率=虫卵转阴动物数/试验动物数×100%

1.2.5 消化道寄生虫耐药性评估 根据世界兽医寄生虫学促进协会对驱蠕虫药耐药性的检测方法[19]，判定该羊场消化道线虫是否存在耐药性。

1.2.6 陕北白绒山羊消化道剖检查找寄生虫，并确定驱净率 驱虫14 d后，每组选取2只寄生虫感染强度较小的陕北白绒山羊进行尸体剖检，查找其消化道内线虫，得到大概的驱净率结果[18]。

1.2.7 驱净率的计算 驱净率=驱净虫体的动物数/全部试验动物数×100%

1.3 数据统计和分析

通过Excel 2010软件对驱虫前，驱虫后 14 d、1个月、2个月的虫卵检查和虫卵计数所得数据进行整理，虫卵计数结果表示为“平均值±标准差”。

2 结果与分析

2.1 陕北白绒山羊消化道线虫种类鉴定结果

本试验共检出6种线虫，捻转血矛线虫(Hemonchuscontortus)，食道口线虫(Oesophagostomumspp.)，毛圆线虫(Trichostrongylussp.)，仰口线虫(Bunostomumtrigonocephalum)，夏伯特线虫(Chabertiasp.)，细颈线虫(Nematodirussp.)，见图1。

A.捻转血矛线虫卵；B.食道口线虫卵；C.毛圆线虫卵；D.细颈线虫卵；E.仰口线虫卵；F.夏伯特线虫卵

2.2 陕北白绒山羊驱虫前后不同种类消化道线虫感染情况

通过对消化道线虫感染率的调查可知，陕北白绒山羊消化道寄生虫的优势虫种为捻转血矛线虫(Hemonchuscontortus)。驱虫前，各试验组与空白对照组的不同种类的消化道线虫的感染率比较接近，总的感染率也均在81.25%以上，最高的感染率为空白对照组，感染率为93.75%。驱虫后14 d，与驱虫前相比，各试验组的不同种类的消化道线虫的感染率均有下降，总感染率也均有下降，其中以伊维菌素芬苯达唑预混剂组试验组的感染率下降最大，详见表1和表2。

表1 驱虫前、驱虫后14 d不同种类线虫感染率

2.3 耐药性分析

驱虫14 d后，伊维菌素注射液组的虫卵转阴率为6.25%，芬苯达唑粉组的虫卵转阴率为 31.25%，伊维菌素芬苯达唑预混剂组的虫卵转阴率为50.00%，见表2。使用供试的3种驱虫药后，羊只消化道线虫的感染率均有所下降，其中伊维菌素注射液组对消化道线虫的虫卵转阴率较低，可能是由于生产中长期使用伊维菌素驱虫导致羊只严重地耐药性。

表2 陕北白绒山羊驱虫后14 d虫卵转阴率

驱虫14 d后，伊维菌素注射液组的虫卵减少为65.00%，芬苯达唑粉组的虫卵减少率为 84.21%，伊维菌素芬苯达唑预混剂组的虫卵减少率为77.27%，试验组的驱虫驱净率均为0，见表3。根据世界兽医寄生虫促进协会报道，粪便中虫卵减少率小于95%时均为有耐药性，而虫卵减少率越小，耐药性越大，表明3种试验药物中伊维菌素的产生的耐药性最大，而混合药物试验组介于2种试验单方药物之间。

表3 陕北白绒山羊驱虫后14 d虫卵减少率及驱净率

2.4 驱虫后不同时间消化道线虫动态变化情况

驱虫1个月后陕北白绒山羊消化道线虫的感染率及感染强度均有所上升，其中伊维菌素驱虫组其感染率为75%，感染强度为400 n/g；驱虫2个月后，陕北白绒山羊消化道线虫的感染率及感染强度达到驱虫前水平，其中伊维菌素组其感染率为87.50%，感染强度为800 n/g，详见表4。

表4 驱虫后1月、2月陕北白绒山羊消化道线虫的动态变化

驱虫1个月后，陕北白绒山羊消化道线虫的感染率及感染强度均有所上升，但未达到驱虫前水平，说明供试的驱虫药对消化道线虫的再感染和发展仍然具有一定的抑制。驱虫2个月后，羊只消化道线虫的感染率及感染强度均达到甚至超过驱虫前水平，提示在陕北白绒山羊驱虫生产实践中，应在春季驱虫后2个月进行再次驱虫，从而提高生产效率。

3 讨 论

本试验共计检测出6种类型的消化道线虫其中捻转血矛线虫为优势虫种，这与冯平等[20]的报道基本一致，其原因可能是捻转血矛线虫产卵远远多于其他消化道线虫，具有感染性的捻转血矛第三期幼虫可在放牧环境中长期生存，最大生存周期长达一年半。本试验在虫卵检查时检出细颈线虫虫卵，而幼虫培养时，未发现细颈线虫三期幼虫，其原因可能是细颈线虫从虫卵发育至具有感染性的第三期幼虫约所需时间较长，且其虫卵在4月初到10月底均可发育，在4月底到5月初只可发育出少量的第三期幼虫，幼虫培养时间为4月15日至25日，培养时间较短，因此没有观察到细颈线虫[21]。本试验表明该羊场陕北白绒山羊消化道线虫感染情况较为严重，且多为混合感染。

现在市场上销售的驱虫药种类较多，其中以伊维菌素和芬苯达唑类药物最为常见。此次试验选取伊维菌素注射液、芬苯达唑粉与伊维菌素芬苯达唑预混剂3种常见驱虫药，旨在从3种驱虫药中找出驱虫效果较好的一种作为羊场的指导用药。使用伊维菌素注射液驱虫后虫卵转阴率较低，虫卵减少率较低，伊维菌素不仅可驱除消化道寄生虫，而且可驱杀体表寄生虫，近年来在生产中使用率较高，从而使感染羊只的寄生虫对伊维菌素产生了一定的耐药性，导致生产中使用伊维菌素的驱虫效果越来越差，这与敖登高娃[9]、王鹏龙等[10]的研究结果相似。本次试验中检出优势虫种为捻转血矛线虫，而该虫种易对伊维菌素产生耐药性，也是造成伊维菌素组虫卵转阴率低的可能原因，这与王瑞[12]的研究结果相符。

芬苯达唑粉也是一种广谱、高效、低毒的驱虫药，可抑制蠕虫虫卵的孵化和发育，对蠕虫的成虫、幼虫和虫卵均具有高效的杀灭作用[16，22]，试验中单独应用芬苯达唑粉驱虫效果优于伊维菌素，这与周忠勇等[23]的试验结果相似。在本次试验中，伊维菌素芬苯达唑预混剂的驱虫效果比2种单制剂驱虫药的驱虫效果好，冯兴明等[24]曾进行过相似的驱虫试验，得出复方制剂驱虫效果优于单制剂驱虫效果，这与本试验的研究结果一致。建议驱虫药的后期研发中,不仅要注重单一驱虫成分的药品的研发，同时也要注重不同成分的组合制剂的研发，以期提高驱虫药生物利用度、降低寄生虫耐药性,确保更好的驱虫效果，提高养殖 效益。

线虫春季高潮显著、秋季次之、夏季感染率最低,因此在常规的驱虫生产计划中，一般是1 a进行2次驱虫，即春季驱虫和秋季驱虫。本试验是在原来春季驱虫计划的基础上开展春季驱虫，并在驱虫后对其开展动态监测，直至寄生虫的感染率和感染强度均发展到驱虫前水平。从驱虫后寄生虫发展的动态来看，驱虫后效果明显但其药效持续时间较短，驱虫2个月后线虫感染率及感染强度均上升至驱虫前水平。根据研究结果，建议陕北白绒山羊养殖过程中，每2个月驱虫1次，以最大程度的减少寄生虫带来的危害和经济损失。

羊场寄生虫病是羊场疫病防治的重要内容，在羊生产中需定期进行寄生虫感染情况检测，其中包括感染率、感染强度、优势虫种的鉴别，寄生虫感染率和感染强度达到一定水平需进行定向驱虫。研究寄生虫的动态变化可找到其流行规律，为确定最佳驱虫时间及驱虫药物、制定科学合理的防制措施提供依据。做到预防性驱虫，可以减少寄生虫病对羊场造成的危害，从而有效地提高养殖场的经济效益。