通辽地区女性患者HPV分型检测结果及其与其他地区对比分析

张冬丽,霍万学，王 迪，吕 广

(内蒙古民族大学医学院，内蒙古 通辽028000)

人乳头瘤病毒(HPV)是一种能特异性感染人类皮肤和黏膜的小型双链环状DNA病毒，具有多种型别，目前已经确定的HPV型别大约有100余种，其中40多种与生殖道疾病有关[1]。HPV根据其导致宫颈癌发生的能力大小分为低危型HPV 和高危型HPV，通过大量的流行病学和病原学研究，已经明确高危型HPV是宫颈癌前病变和浸润性宫颈癌发生的必要条件[2]，低危型HPV多引起良性病变[3]。故HPV分型检测对于宫颈病变的早期筛查、防治及预后判断具有重要的临床意义。本研究采用导流杂交的方法对565例女性患者HPV感染进行了分型检测，将检测结果与其他地区对比分析，旨在为临床医生对本地区HPV感染的预防和治疗提供指导。

1 资料与方法

1.1 研究对象2016年3月至2018年11月在内蒙古民族大学病原生物学与免疫学研究所就诊的565例患者，年龄21-65岁。

1.2 试剂与仪器HPV21分型检测试剂盒(潮州凯普生物化学有限公司)，快速导流核酸杂交仪(凯普生物技术有限公司)，PCR 仪(ABI2720)，离心机(珠海黑马公司)。

1.3 方法

1.3.1样本的采集 采集人员以窥器暴露宫颈口，用棉拭子将宫颈口多余的分泌物擦去。将采样刷深入宫颈口，顺时针轻轻转动采样刷5周，取出采样刷，将其放入装有细胞保存液的样本管中，在瓶口处将刷柄折断，将刷头留在样本管中，旋紧管盖，注明姓名和日期。如不能马上检测，应将样本置于4℃存放，并于两周内完成检测。

1.3.2检测方法与结果判读 采用PCR仪、潮州凯普生物化学有限公司的快速导流核酸杂交仪及其配套试剂，对标本进行DNA分离提取、扩增，以凯普医用核酸分子快速杂交仪为平台，利用导流杂交原理，在已经固定好核酸探针的低密度基因芯片膜上，可一次性快速检测21种HPV亚型的基因分型。包括15种高危亚型:16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68；6种低危亚型:6、11、42、43、44 和81(CP8304)。检测过程严格参照说明书进行，其中包括DNA分离提取、PCR扩增、产物杂交、显色和结果判断。

1.3.3不同地区数据处理与对比方法 按上述检测方法得到通辽地区565例女性HPV分型检测结果，将21种基因亚型的阳性率进行了排序。同时，将检索获得的2013年以来我国其他不同地区以相同检测试剂、相同的检测方法获得的21种HPV亚型的阳性率进行了同样的处理。东北地区选择黑龙江省[4]、华北地区选择河北省[5]、华中地区选择湖南省[6]、华东地区选择江西省[7]、华南地区选择广东省[8]、西南地区选择贵州省[9]、西北地区选择宁夏[10]。具体数据处理以6亚型为例，通辽地区及其他7个地区阳性率和该亚型阳性率在本地区21种HPV亚型阳性率中的排序分别是：9.84%(6)、6.05%(10)、7.08%(4)、2.15%(14)、0.75%(15)、2.74%(12)、6.87%(5)、4.63%(5)；将上述8个地区某一种HPV亚型阳性率排序数的和除以8共得到21个平均基数，将这些平均基数按照大小排序，即得到某一种HPV亚型的平均序位。如果有的地区某一种HPV亚型检测数据欠缺，排序数的和除以数据完整的地区数，得到实际平均序位。

1.4 统计学方法采用SPSS11.0软件进行统计学处理，所有数据均采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HPV感染的年龄分布情况、各年龄段的总例数以及阳性率565例女性标本中共检出阳性标本183例，总感染率为32.39%。不同年龄组受检人数及阳性例数、阳性率见表1。各年龄组HPV感染的阳性率差异有统计学意义(χ2=10.84，P<0.05)。

表1 不同年龄人群感染率

2.2HPV感染的型别分布情况在21种HPV亚型中除43型外，其他20种亚型均有检出，最常见类型依次为16、58、39、6、11。其中单一亚型感染115例(20.35%，115/565)，混合亚型感染68例(12.04%，68/565)。在HPV高危型别感染中以HPV16型最多共38例次，其次为HPV58型27例次，39型23例次。在HPV低危型别感染中以HPV6型最多共18例次，其次是11型15例次。见表2。

2.3 通辽地区与其他地区HPV分型检测结果对比见表3。

3 讨论

本研究共有565例女性患者，HPV感染率为32.39%，与国内其他7个地区比较：东北地区的黑龙江省45.36%、华北地区的河北省38.49%、华中地区的湖南省14.81%、华东地区的江西省49.17%、华南地区的广东省24.69%、西南地区的贵州省34.47%、西北地区的宁夏34.36%。与上述地区相比感染率处于中等偏下水平，提示HPV感染率可能与地域差异有关，也可能由于不同的研究者筛查时选取的研究对象有关。

表2 HPV各型别感染构成比

文献报道HPV感染情况与年龄有一定关系。本研究在不同年龄组HPV感染阳性率有差异：21-30岁年龄组感染率最高，其次为50岁以上组。可能由于年轻女性，因为性生活频繁而感染HPV的机会增多[11]，而对于年长女性，又处于绝经期、卵巢功能下降和机体对外界有害因素的抵抗力降低，加上宫颈因多次分娩而受损容易被HPV感染[12]。

本研究在21种HPV亚型中除43型外，其他20种亚型均有检出，高危型以HPV16、58、39为主，低危型以HPV6、11为主。与前述的其他7个地区相比：与平均序位无差别的有HPV16、53、58、59、42、43；低于平均序位1位的有HPV68；低于平均序位2位有HPV45；低于平均序位4位的有HPV18；低于平均序位5位的有HPV52；低于平均序位7位的有HPV81；低于平均序位10位的有HPV33。高于平均序位1位的有HPV35、56、44；高于平均序位2位的有HPV6；高于平均序位4位的有HPV66、11；高于平均序位5位的有HPV31、51；高于平均序

表3 通辽地区与其他地区HPV分型检测结果对比

位6位的有HPV39。这说明在各个地区HPV流行的亚型是有差异的，这对疫苗的研发具有指导意义。目前第一代疫苗只针对HPV16和18型，在新一代疫苗的研发中，世界卫生组织专家提出如果增加HPV31、33、35、45、52和58型，可以在预防70%的子宫颈癌基础上增加约20%的预防能力[13]，同时我国的疫苗研发还应对HPV39型予以重视。