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探究影响黄芪多糖抗氧化活性的因素

2020-10-20劳军王楠楠

中国食品 2020年14期
关键词:清除率自由基乙醇

劳军 王楠楠

作为一种常见的中草药,黄芪(Astragalus membranaceus)是豆科属多年生草本植物,其药用部分为根部,含有多糖、皂苷及酚类等成分。其中,黄芪多糖可以用来抗氧化自由基、降低血糖和延缓衰老。黄芪中的多糖可以分为水溶性多糖和水不溶性多糖,本文通过水提醇沉法提取黄芪水溶性多糖,再通过DPPH法研究其抗氧化活性。

一、材料与方法

1.材料

(1)实验用黄芪为市售,购自于吉林大药房,烘干后研磨成粉。无水乙醇、 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)均为国产分析纯。

(2)实验所用仪器主要有TU-1901型紫外可见分光光度计(北京普系统仪器有限公司)、电热恒温干燥箱(DHG-9245A)、离心机(PDZ5-WS)。

2.方法

(1)采用水提醇沉法提取黄芪水溶性多糖。称取100g黄芪粉,加适量的水定容于900ml,水浴加热至70℃。维持100min之后,加75%乙醇300ml沉淀多糖物质,3000rpm,离心10min之后即为粗多糖。

(2)DPPH法对不同浓度黄芪多糖清除自由基能力的测定。将上述黄芪多糖配成10mg/ml、25mg/ ml、50mg/ml、75mg/ml、100mg/ml的溶液,对照组加入水50μL、DPPH溶液2ml和95%乙醇950μL;实验组分别加入不同浓度的黄芪多糖溶液50μL、DPPH溶液2ml和95%乙醇950μL;混合后摇匀,静置30min。在分光光度计517nm处测出每组的吸光度值。把吸光度代入如下公式,从而计算出DPPH自由基的清除率(A代表实验组,A0代表对照组)。

(3)不同pH对黄芪多糖清除自由基能力的影响。把DPPH溶液2ml和95%乙醇950μL混合成反应液,使用NaOH和HCl分别把反应液调制成pH为2、3、4、5、6、7、8、9的系列溶液,然后再分别加入黄芪多糖溶液50μL,从而测定对DPPH自由基的清除率。

(4)不同温度对黄芪多糖清除自由基能力的影响。把上述反应液分别置于4℃、20℃、50℃、80℃中10min后,再分别加入黄芪多糖溶液50μL,静置30min,然后测定对DPPH自由基的清除率。

二、结果分析

1.不同浓度黄芪多糖清除自由基的能力

如图1所示,随着黄芪多糖的浓度不断增加,自由基的清除率也不断增加,当浓度达到50mg/ml时,清除率可达84%;然后随着浓度增大,自由基清除率达到了一个平台期,这可能是由于DPPH溶液中的自由基有限,在黄芪多糖浓度为50mg/ml已基本上把自由基清除干净,因此以下系列实验选择在此浓度下进行研究。

2.不同pH及反应温度对黄芪多糖清除自由基能力的影响

不同pH对黄芪多糖自由基清除率的影响如图2A所示,当pH小于5时,随着pH的增大清除率升高;当pH为5时,自由基的清除率最高为57.3%;当pH大于5时,随着pH的增大清除率不断下降,这极有可能是黄芪多糖的稳定性所导致。不同温度对黄芪多糖自由基清除率的影响如图2B所示,随着温度的升高,自由基清除率不断下降,由4℃的71.9%降至80℃的62.3%,这极有可能是由于随着温度的不断升高,黄芪多糖化学成分不稳定或者DPPH在高温释放出更多的自由基所致。

三、结论

现有的研究已經证明,黄芪多糖具有一定的抗氧化能力,在清除自由基方面高于公认的维生素C。本文对黄芪多糖的抗氧化性及各种影响条件进行研究探讨,结果发现,黄芪多糖对自由基的清除最佳pH为5;随着温度的升高,对自由基的清除能力逐渐下降。

作者简介:劳军(1979-),男,山东东营,博士研究生,主要研究方向:生物学。

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