武汉地区表观健康人群脂蛋白相关磷脂酶A2水平调查

梁 涛，刘 凤，张德太，王 琳，胡丽华

（华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科，湖北 武汉 430022）

随着生活水平的不断提高，我国居民的饮食及生活习惯发生了很大变化，导致心脑血管疾病的发生率逐年升高。心脑血管疾病一旦突然发作，往往会造成严重的后果。因此，有必要早期筛查出高风险人群，提供预警信号，加强早期预防工作。然而，目前尚缺乏针对表观健康人群的有效的心脑血管疾病发生风险预测指标。脂蛋白相关磷脂酶A2（lipoproteinassociated phospholipase A2，Lp-PLA2）是一种具有多种促炎性质的酶，广泛参与动脉粥样硬化斑块形成、破裂等过程，可作为冠心病和缺血性脑卒中的独立危险预测因子[1-2]。中国老年学学会心脑血管病专业委员会建议将Lp-PLA2作为预测心脑血管疾病事件发生风险的指标[3]。目前，有关Lp-PLA2在冠心病、动脉粥样硬化、脑梗死等心脑血管疾病中的应用的研究较多，但对于Lp-PLA2在表观健康人群中的筛查价值少有研究。为此，本研究拟通过检测血清Lp-PLA2水平，评估武汉地区表观健康人群Lp-PLA2水平的分布、阳性检出率及Lp-PLA2水平升高者与正常者之间相关资料的差异，为早期预测表观健康人群心脑血管疾病发病风险提供参考依据。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2018年4月—2019年4月在华中科技大学同济医学院附属协和医院体检中心的体检者。体检内容包括一般内科检查、外科检查、心电图、血常规、尿常规、血压、胸部X线检查、心脏B超、头部电子计算机断层扫描（computed tomography，CT）、常规生化项目检测及免疫项目检测等。根据体检结果

排除血压异常、急性感染、慢性感染、恶性肿瘤、近期手术史、近期用药史以及有严重肝、肺、肾等重要器官功能障碍的体检者，根据影像学检查结果及相关调查结果排除既往有心肌梗死、冠心病及脑梗死治疗史的体检者。本研究共入组表观健康者1 503名，其中男1 010名、女493名，年龄17～86岁。收集所有对象的一般资料，包括年龄、性别及总胆红素（total bilirubin，TB）、直接胆红素（direct bilirubin，DBil）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、γ-谷氨酰基转移酶（gamma-glutamyltransferase，GGT）、血尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）、肌酐（creatinine，Cr）、尿酸（uric acid，UA）、胱抑素C（cystatin C，Cys C）、血糖（glucose，Glu）、总胆固醇（total cholesterol，TC）、三酰甘油（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、载脂蛋白A（apolipoprotein A，apo A）、载脂蛋白B（apolipoprotein B，apo B）、脂蛋白（a）[lipoprotein（a），Lp（a）]等常规生化指标的检测结果。

1.2 方法

采用含惰性分离胶的促凝管采集所有研究对象空腹静脉血3 mL，1 500×g离心10 min，分离血清，1 h内完成检测，剩余血清-20 ℃冷冻保存。

Lp-PLA2采用NORMAN散射比浊分析仪（南京诺尔曼生物技术有限公司）及配套试剂（散射免疫增强比浊法）检测，试剂盒检测上限为2 000 ng/mL，参考区间为＜200 ng/mL，以≥200 ng/mL为升高（阳性）标准。血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A，SAA）采用乳胶增强免疫比浊法检测，试剂盒、质控品及校准品均购自广州微米生物科技有限公司。同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）采用酶循环法检测，试剂盒、质控品及校准品均购自北京九强生物技术股份有限公司。检测仪器均为AU5800全自动生化分析仪（美国Beckman Coulter公司）。所有操作均严格按仪器和试剂盒说明书要求进行。

1.3 统计学方法

采用SPSS 22.0软件进行统计分析。所有计量数据经正态性检验后均呈偏态分布，以中位数（M）[四分位数（P25～P75）]表示，各组间比较采用Mann-WhitneyU检验。计数资料以率表示，组间比较采用χ2检验。Lp-PLA2与其他项目的相关性评价采用Spearman相关分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同性别表观健康者一般资料分析

所有研究对象男、女性之间年龄差异无统计学意义（P＞0.05），男性血清Lp-PLA2水平高于女性（P＜0.001）。1 503名表观健康者血清Lp-PLA2水平为130（100～238）ng/mL，有413名（27.48%）血清Lp-PLA2阳性，其中男性的阳性率为20.96%（315/1 503），女性的阳性率为6.52%（98/1 503）。男性Lp-PLA2阳性率明显高于女性（P＜0.001）。见表1。

表1 不同性别表观健康者一般资料分析

2.2 不同年龄表观健康者血清Lp-PLA2水平及阳性率

在表观健康者总体人群及男、女性人群中，≥61岁组Lp-PLA2阳性率均高于41～60岁组及≤40岁组，且41～60岁组血清Lp-PLA2水平最高。见表2～表4。

表2 不同年龄表观健康者血清Lp-PLA2水平及阳性率比较

表3 不同年龄男性表观健康者血清Lp-PLA2水平及阳性率比较

表4 不同年龄女性表观健康者血清Lp-PLA2水平及阳性率比较

2.3 Lp-PLA2升高组及Lp-PLA2正常组一般资料及常规生化指标比较

将1 503名表观健康者按血清Lp-PLA2水平分为Lp-PLA2升高组（413名）及Lp-PLA2正常组（1 090名）。Lp-PLA2升高组年龄、SAA、ALT、AST、ALP、GGT、BUN、UA、Cr、Cys C、Glu、TG、apo B、Hcy均高于Lp-PLA2正常组（P＜0.05），TB、DBil、HDL-C、apo A均低于Lp-PLA2正常组（P＜0.05），2个组之间TC、LDL-C、Lp（a）差异无统计学意义（P＞0.05）。见表5。

2.4 不同程度Lp-PLA2升高者一般资料及常规生化指标比较

将413名Lp-PLA2升高者按血清Lp-PLA2水平分为轻度升高（200～300 ng/mL）组、中度升高（301～400 ng/mL）组、高度升高（＞400 ng/mL）组。高度升高组LP-PLA2、SAA、GGT、Glu水平显著高于中度升高组及轻度升高组（P＜0.05），其他指标3个组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。见表6。

表5 Lp-PLA2升高组及Lp-PLA2正常组一般资料及常规生化指标比较

2.5 Lp-PLA2升高组Lp-PLA2与其他指标的相关性分析

Spearman相关分析结果显示，Lp-PLA2与SAA、GGT呈正相关（r值分别为0.422、0.162，P值分别为＜0.001、0.001），与其他指标[DBil、ALT、AST、ALP、Cr、BUN、UA、Cys C、Glu、TC、TG、HDL-C、LDL-C、apo A、apo B、Lp（a）、Hcy]均无相关性（r值分别为-0.059、0.03、-0.023、0.114、-0.022、0.034、-0.002、0.016、0.051、-0.070、-0.080、-0.020、-0.053、-0.034、-0.051、0.047、-0.006，P＞0.05）。

表6 不同程度Lp-PLA2升高者一般资料及常规生化指标比较

3 讨论

目前，心脑血管疾病已成为严重影响人类健康的一种具有致残性、致死性危险的疾病。然而，心脑血管疾病在发生之前往往难以被察觉，因此迫切需要能早期预警心脑血管疾病发生风险的生物标志物，以便在表观健康人群中筛选出有高发病风险的个体。近年来，有多种生物学标志物被广泛研究，Lp-PLA2是其中最受关注的指标之一，尤其是其促进动脉粥样硬化的作用逐渐被重视[4]。尽管关于Lp-PLA2与动脉粥样硬化、心肌梗死、脑梗死等心脑血管疾病的研究已较多，但Lp-PLA2在表观健康人群中的筛查价值却较少被关注，因此本研究对湖北省武汉地区1 503名表观健康者的血清Lp-PLA2水平进行了分析。结果显示，男性血清Lp-PLA2水平明显高于女性（P＜0.001）；在1 503名表观健康者中，血清Lp-PLA2水平超过参考区间的有413名，阳性率为27.48%，其中男315名、女98名，男性的Lp-LPA2阳性率高于女性（P＜0.001）。由于本研究的入组人数有限，男性发生心脑血管疾病的风险是否比女性更高，或性别对Lp-PLA2水平的影响还有待更广泛、更深入的流行病学调查结果加以证实。有研究结果显示，血清Lp-PLA2活性存在性别差异，女性Lp-PLA2活性与雌激素水平相关[5]。为了分析Lp-LPA2与年龄是否存在关联性，本研究将所有对象按年龄分为≤40岁组、41～60岁组和≥61岁组，结果显示在表观健康者总体人群及男、女性人群中，≥61岁组的Lp-PLA2阳性率均高于41～60岁组及≤40岁组，但其血清Lp-PLA2水平却未见显著升高，血清Lp-PLA2水平最高的是41～60岁组，这种现象可能与本研究≥61岁的受试者过少有关。丰睿捷等[6]在建立健康成人血清Lp-PLA2活性参考区间时发现，血清Lp-PLA2活性会随着年龄缓慢升高。因此，我们将在后续研究中扩大老年人群的样本量，以验证这一结果。

本研究进一步分析了Lp-PLA2升高者与Lp-PLA2正常者之间常规生化指标的差异，结果显示Lp-PLA2升高组年龄、SAA、ALT、AST、ALP、GGT、BUN、UA、Cr、Cys C、Glu、TG、apo B、Hcy均高于Lp-PLA2正常组（P＜0.05），TB、DBil、HDL-C、apo A均低于Lp-PLA2正常组（P＜0.05），这提示Lp-PLA2升高组可能存在肝、肾功能受损及血脂和/或Glu异常现象。本研究结果还显示，Lp-PLA2高度升高组仅SAA、GGT、Glu水平显著高于中度升高组及轻度升高组（P＜0.05），这为Lp-PLA2联合其他指标预测表观健康者心脑血管疾病的发生提供了参考依据。由于本研究并未对上述Lp-PLA2阳性者，尤其是具有较高Lp-PLA2水平的阳性者进行定期、长期的随访，因此难以预测其心脑血管疾病事件是否真正发生。此外，本研究中Lp-PLA2仅与SAA、GGT呈正相关（r值分别为0.422、0.162，P值分别为＜0.001、0.001）。Lp-PLA2与SAA相似，在血管炎症反应中发挥一定的作用，但Lp-PLA2与GGT呈正相关的原因尚不清楚，还有待后续进一步研究。

综上所述，武汉地区表观健康人群中具有较高心脑血管疾病潜在风险的人并不少见，因此有必要在表观健康人群中开展Lp-PLA2筛查，从而实现对心脑血管疾病的早期发现、早期干预。