临床微生物标本规范采集和送检在临床中的重要作用

赵淑凤，樊玉凤

（河北省枣强县人民医院，河北 枣强）

0 引言

临床细菌检验是指从临床检验的各种标本中分离、培养和鉴定细菌并对所检测到的细菌进行抗生素敏感性实验，是感染性疾病病原学诊断、抗菌药物合理使用以及流行病学调查的依据。为保证正确的细菌检验结果，实验室应负责指导临床正确采集和送检临床各种标本，并对合格标本进行进一步处理[1]。

1 资料与方法

以我院2018年10月至2019年9月送检的1880例微生物培养及鉴定标本为观察对象，对所有标本进行染色、培养。试剂：革兰染色液、抗酸染色液、瑞氏染色液、10%KOH、1% H2SO4。方法：对不同类型标本分别进行染色后显微镜镜检、培养。

2 结果

两组微生物标本检验情况详见图1和图2，其中阳性为有致病菌检出，阴性为无致病菌检出。

图1 第一组共939例微生物标本分析统计表

图2 第二组共941例微生物标本分析统计表

通过以上两组数据比较，第二组不合格标本明显减少，病原微生物的检出率有所提高。血液和尿液标本送检率明显增多，血培养阳性率明显提高。

3 讨论

随着当前各种病原体的分布变异以及耐药率增高,经验诊断和用药面临极大挑战,这也直接导致临床对感染性疾病的病原学诊断和治疗的需求增加。精准的病原学诊断和治疗要求正确的标本采集和运输[2]。

3.1 临床微生物学检验标本的采集和转运常见的问题

（1）痰液标本：含有食物残渣、口水、鼻咽分泌物，为拒收标本；采集痰液标本前已使用抗微生物的药物。

（2）尿液标本：中段尿接取前没有清洗，定植菌污染；直接送检尿袋里的尿液，有污染；有留置管的患者超过72 h有多种细菌定植菌污染。

（3）脑脊液、胸腹水、术后引流液等无菌部位的体液，直接采集引流收集器内的标本送检，标本被污染。

（4）血液标本：采集时机不准确；护士采血手卫生不合格；病人皮肤不卫生，消毒不合格。

（5）采集封闭伤口分泌物时常消毒不合格或过度消毒；采集开放性伤口分泌物时，不是采集的创面处的分泌物。

（6）粪便标本：采集时不是采取粘液、脓血异常部位；没有及时送检，标本污染。

3.2临床微生物学检验标本的采集和转运应注意和遵循的事项

按WS/T640-2018临床微生物学检验标本的采集和转运行业标准执行，具体内容如下。

3.2.1标本的采集

（1）标本的采集时机、部位、方法：在抗微生物药物治疗之前或者在起始治疗后立即采集标本，治疗中为评估治疗效果或治疗后为评估结局可以进行采样；应尽快在疾病初发时采集首份标本；避免感染部位周围以及感染部位附近皮肤或黏膜定植菌群的污染；对于有多种细菌定植的部位，宜选择合适的方法检验特定的病原菌，并防止非致病定植菌群的污染。

（2）采集足够量的标本用于常规细菌学检验，至少送检0.5 mL或者0.5 g（除外特殊标本）。当送检标本体积不足时，与临床沟通，并根据医嘱选择优先检验项目。

（3）血标本采集时机：可疑感染患者出现以下任一指征时，可考虑采集血培养：体温>38 ℃或<36 ℃；寒战；外周血白细胞计数增多（>10.0×109/L，特别有“核左移”时）或减少（计数<4.0×109/L）；呼吸频率>20次/min或动脉血二氧化碳分压（PaCO2）<32 mmHg；心率>90次/min；皮肤黏膜出血；昏迷；多器官功能障碍；炎症反应参数如C反应蛋白、降钙素原（PCT）、1，3-β-D-萄聚糖（G 试验）升高等。

（4）痰标本采集时机：咳痰适用于肺部感染患者，咳痰前，患者用无菌生理盐水漱口，指导患者咳出深部痰，勿留取唾液和鼻咽腔分泌物；气管吸出物，仅当气管插管的患者出现肺炎症状时（如发热或浸润），可采集气管吸出物标本，从气管中吸痰，无菌容器留取送检（注：气管在插管24 h后即有定植菌，若未有肺部感染指征时送检气管吸出物，可导致结果与疾病不符）。

（5）尿标本采集：宜采集晨尿，嘱患者睡前少喝水或不喝水，尿液在膀胱内潴留至少4 h以上，不停止尿流，采集中段尿。无症状的患者应连续采集3 d晨尿送检。不宜送检或接收导尿管的管尖进行培养；通常情况下，带有留置管的患者48～72 h就会有定植菌，且常为多种细菌。

采集直接或留置导尿管尿液：用肥皂水或清水清洗尿道口，无菌操作将导管通过尿道插入膀胱；弃去先流出的15 mL尿液之后，采集尿液于无菌容器；夹住留置导尿管10～20 min后，用75%酒精消毒导管采集部位，用注射器无菌采集5～10 mL尿液于无菌容器。

（6）粪便标本：在感染急性期采集腹泻粪便标本，排除一些病原体的携带状态，需要连续3份标本阴性，两次采集标本间隔48 h。用无菌竹签挑取标本中异常部分（有粘液、脓液和血液的部分）2～5 mL粪便悬液或2～5 g粪便标本置于无菌容器中，立即送检。标本拒收：干燥的拭子、含钡粪便、黄软成形便、干便或明显污染的粪便；一天内重复送检的标本。

（7）分泌物：闭合性脓肿，消毒皮肤后，用注射器抽取脓肿物于无菌管中；开放性脓肿，用无菌生理盐水去除表面分泌物，尽可能采集抽吸物，或将采样拭子插入至病灶的底部或脓肿壁取其新鲜边缘部分。

（8）子宫颈内或宫颈标本：用温盐水湿润阴道窥器；使用阴道窥器轻轻按压子宫，打开窥器，使用藻酸钙、涤纶或没有毒性的棉拭子采集分泌物。或者打开窥器，将拭子插入宫颈管1～2 cm，转2～3圈采集分泌物，必要时停留20～30 s并转动取样；怀疑淋病奈瑟菌时，可以同时采集直肠拭子与子宫颈标本。

（9）男性泌尿生殖道标本：从尿道挤压分泌物，一根拭子采集分泌物用于培养，保存于转运培养基中送检。另一根拭子采集分泌物用于涂片，将拭子在玻片表面滚动2～3 cm；若无分泌物，可将泌尿生殖道拭子插入尿道约2 cm，轻轻旋转取出。将标本尽快接种于特殊培养基，并置于35 ℃ CO2环境中培养。接种后的拭子制备、涂片用于染色，最好采集两个拭子，分别用于涂片和培养（注：尿道分泌物革兰染色查到白细胞内革兰阴性双球菌可作为男性淋病患者的诊断依据）。

3.2.2 标本转运

标本采集手册应当明确说明某些检验项目的特殊转运方法，以保证医护人员、标本运送人员在标本采集之前能获得有关标本采集和转运的准确信息；标本的转运应由经过培训的专人负责。标本采集后，应减少运送环节，在规定时间内运达实验室，并尽可能缩短转运时间。

用于普通细菌学检验的标本宜在2 h内送到实验室。如果转运时间超过2 h，宜使用转运培养基或在冷藏条件下转运；一般而言，用于细菌培养的标本室温下保存不能超过24 h；血培养标本不可以冷藏转运；标本量较少的体液标本（<1 mL）或组织标本（<1 cm3），宜在30 min内送到实验室。采集后立即送检，对周围环境敏感的细菌如百日咳鲍特菌、志贺菌属、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和厌氧菌；可能分离出对低温敏感细菌的标本，采集后不宜冷藏，如脑脊液、生殖道、眼部、中耳及呼吸道标本；对低温敏感的细菌如淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌和肺炎链球菌注意保温送检。

3.3 小结

标本的正确采集、转运和保存是保证微生物学检验结果准确的前提条件。标本采集工作涉及医生、护士、病人和其他工作人员，很难由实验室完全控制，是全面质量管理最薄弱的环节。所以实验室就采取制定标本采集手册、监控标本运送、制定不合格标本拒收标准等措施，来保证标本质量[3]。临床微生物检验专业人员严格按照行标执行，并督导接收合格的临床微生物学检验标本，提高病原微生物的检出率，为临床疾病治疗提供有效信息。