黄金菊药效组分及其给药途径对大鼠急性咽炎模型的影响

郑路路,张贵君

(1.洛阳市第一人民医院制剂室，河南 洛阳 471002； 2.北京中医药大学中药学院，北京 100102)

黄金菊由金莲花、野菊花和黄芩三味中药组成，是用于治疗上呼吸道感染、咽炎、扁桃体炎的一个临床验方。中药药效组分系统地反映中医药临床应用的特点，药效成分的有序组合[1]，在中药药效组分理论[2]的指导下，张春晖等[3]已经通过高效液相色谱(HPLC)分析法从黄金菊汤剂中得到了4种化学药效组分分别为：黄芩苷0.264 4%、绿原酸0.016 3%、荭草苷0.014 1%和牡荆苷0.003 6%,并通过现代药理实验进行了验证。药效组分中药“黄金菊”是在这些研究的基础上由北京中医药大学实验室研究出的药效组分新药。本研究通过对质量分数15%氨水造成的大鼠急性咽炎模型的血常规和病理切片结果分析，验证黄金菊药效组分的作用并比较口服和静脉注射两种不同给药途径对急性咽炎的影响，报道如下。

1 材料与方法

1.1 大鼠及试剂 CD(SD)大鼠，体质量190～210 g，雌雄各半，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，大鼠合格证号：SCXK(京)2006-0009。将CD大鼠在室温22～25 ℃、相对湿度为65%的动物室中12 h明暗交替照明3～4 d，让其自由进食、饮水。 氨水500 mL(北京化工厂)；双黄连粉针剂(哈药集团中药二厂，国药准字Z10940044，规格：600 mg/瓶)；质量分数0.9%氯化钠注射液(四川科伦药业股份有限公司，国药准字H51021157，规格：250 mL/瓶)，喉头喷雾器(西化仪北京科技有限公司，型号SJY16-02)，黄金菊口服制剂(批号180522)和黄金菊粉针制剂(批号180601，规格：300 mg)均为本实验室自制。

1.2 方法

1.2.1 大鼠急性咽炎模型的建立 筛选合格大鼠40只，雌雄各半，除空白组外每日用喉头喷雾器将质量分数15%的氨水向大鼠咽部喷雾2次，上、下午各一次，每次喷3下，连续喷3 d。氨水是碱性刺激物质，高浓度局部喷雾能刺激咽部黏膜，使之充血肿胀，形成急性咽炎模型[4]。

1.2.2 用药与分组 将大鼠随机分为5组,即空白组(给等量蒸馏水)、模型组(给等量生理盐水)、阳性对照组(尾部静脉注射双黄连粉针剂，0.378 g·kg-1·d-1)、黄金菊药效组分口服组(27 mg·kg-1·d-1)和黄金菊粉针组(尾部静脉注射黄金菊粉针，6.75 mg·kg-1·d-1)，每组8只。除空白组外其他组均按1.2.1造模3 d后，于4～7 d给药，每天给药1次。

1.2.3 指标测定 末次给药结束后，取各组动物的股静脉血查血常规。然后拉脊处死，立即从环状软骨水平剪断气管食管，自咽后壁向上分离软组织至腭帆水平，切断组织。摘取咽部黏膜及其下组织入质量分数4%多聚甲醛PBS(pH值7.2～7.6)固定12 h，制作切片进行HE染色观察，取染色后的咽组织切片在显微镜下进行病理学观察。

2 结果

2.1 大鼠活动情况 从造模第2天开始，模型组和用药组大鼠均逐渐出现挠痒抓口及喉部，口腔分泌物增多，饮水明显增多，并且食量下降，自主活动减少，空白组则未出现上述情况。第3天发现除空白组外各组均咽部充血肿胀呈鲜红色。用药4 d后，阳性对照组、黄金菊药效组分口服组和黄金菊粉针组的大鼠基本恢复正常，而模型组上述症状体征则仍然存在。

2.2 血常规 模型组大鼠的白细胞(WBC)计数、淋巴细胞(LYM)百分比、单核细胞(MONO)百分比、中性粒细胞(NEUT)百分比指标均高于空白组和用药各组大鼠，并且高于正常水平[WBC：(5.2～17.8)×109·L-1，LYM：(73.2～92.0)%，MONO：(2.1～10.6)%，NRUT：(2.2～16.0)%]则证明造模成功。用药各组与模型组比较，各项指标差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)；黄金菊药效组分口服组和黄金菊粉针组与阳性对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 大鼠血常规检查结果

2.3 病理切片 空白组大鼠咽部上皮组织比较平滑，鳞状上皮细胞结构清晰，周围无炎细胞，而模型组大鼠咽部组织黏膜上皮角化、坏死和大面积片状脱落，黏膜下组织出现大量的炎症细胞弥漫性浸润，血管扩张充血且有出血，腺体萎缩，证明造模成功。黄金菊药效组分口服组和黄金菊粉针组与模型组比较，大鼠咽部组织均有一定改善。见图1。

空白组

模型组

阳性对照组

黄金菊药效组分口服组

黄金菊粉针组

3 讨论

急性咽炎是由病毒、细菌或支原体感染导致的咽部黏膜、黏膜下组织及其淋巴组织的急性炎症，多由柯萨奇病毒、腺病毒、副流感病毒、鼻病毒以及流感病毒引起[5]。现代医学多使用抗生素或抗病毒药物治疗，但不良反应大且容易反复发作。中医学认为急性咽炎为外邪疫毒侵袭人体而致，红肿热痛等热象是临床常见症状，多因肺胃之热而起，故治疗以清热解毒为主[6]。黄金菊由黄芩、金莲花、野菊花三味中药组成，其中黄芩具有清热燥湿、泻火解毒的功效，主入肺经，善清泻肺火及上焦实热，用治肺热壅遏所致咳嗽咽红痰稠[7]，现代药理学证明其对金黄色葡萄球菌[8]、卟啉单胞菌[9]和流感病毒[10]均有较强的抑制作用；金莲花是一味历史悠久的传统蒙药，清代赵学敏所著的《本草纲目拾遗》,谓其“味苦、性寒、无毒”,可“治口疮、喉肿、浮热 牙宣、耳疼、目痛”,并具“明目、解岚障”之功效，现代药理学证明其有较强的抑菌和抗病毒作用[11]；野菊花清热解毒，辛散苦降，用治热毒蕴结、疔疖丹毒、痈疽疮疡、咽喉肿痛[12]，现代药理试验证明其具有抑菌[13]和体内外抗H1N1病毒作用[14]。三药合用，以达到清热解毒、抗炎消肿的功效。黄金菊药效组分在MDCK细胞中对甲型流感病毒具有直接抑制作用[15]，且最小抑制浓度均明显低于最大中毒剂量，疗效确切且组分明确，质量可控性强。

目前临床上把WBC计数及分类作为炎性分析指标用来鉴别急性咽炎的细菌性感染和病毒性感染已经比较成熟[16]。本研究血常规结果显示，模型组大鼠的WBC计数、LYM%、MONO%和NEUT%均高于空白组和用药各组大鼠，并且高于正常水平，则证明模型组大鼠已被细菌或病毒感染，但用药后阳性对照组、黄金菊药效组分口服组和黄金菊粉针组的各项指标均在大鼠正常范围内，表明黄金菊药效组分口服和静脉注射两种途径对大鼠急性咽炎模型均有治疗作用。由氨水刺激造成的大鼠急性咽炎模型，其黏液分泌逐渐增多、咽喉黏膜充血肿胀、肿胀呈鲜红色、饮水增加等现象与临床症状较为一致，其病理切片上可看到黏膜上皮外层角质化且明显增生，小血管扩张充血、水肿，部分上皮细胞坏死形成空洞，黏膜下弥漫性炎症细胞浸润，局部溃疡，鳞状上皮明显增生，符合急性咽炎的病理学特征，用药后黄金菊药效组分口服组和黄金菊粉针组与模型比较，大鼠咽部组织均有一定改善，炎症细胞浸润现象明显减少。

血常规结果显示,两种给药途径比较，黄金菊药效组分口服组大鼠用药后的WBC计数和LYM%均降至正常值，低于黄金菊粉针组，甚至低于阳性对照组；病理结果显示：黄金菊药效组分口服组的治疗结果更佳，上皮组织比较平滑且结构清晰，只有极少量的炎症细胞浸润现象。由此可见，黄金菊药效组分更适合制成口服剂型，但单就粉针剂的剂型优点来说，直接入血且可与静脉注射一起使用，能更快地减轻发热等症状，值得进一步研究。