儿童急性淋巴细胞白血病中细胞周期相关因子cdt1 蛋白及mRNA 的表达情况探讨

黄骥斌

（成都迪安医学检验所有限公司 四川 成都 610046）

cdt1 是细胞周期中DNA 复制的复制前复合物成分，对DNA的复制起到调控作用，细胞周期调节异常会影响到基因结构和基因的异常表达，且会引起细胞恶性病变，与恶性肿瘤的发生具有密切关系，目前认为其在恶性肿瘤淋巴细胞中呈高表达状态[1]。本次以2018 年5 月—2019 年5 月收治的儿童ALL 与健康儿童为样本，检测cdt1 的表达水平与儿童ALL 发生发展的关系进行探讨，阐述如下。

1. 资料与方法

1.1 一般资料

将2018 年5 月—2019 年5 月首次诊断的儿童急性淋巴细胞白血病病例30 例纳入研究组，将同期健康体检儿童30 例纳入对照组。研究组男女分别占比18:12, 年龄3 ～14 岁，均龄（7.25±1.58）岁，对照组男女分别占比20:10, 年龄2.5 ～13 岁，均龄（7.36±1.64）岁，两组基线资料统计学对比差异无统计学意义（P＞0.05），可比。

纳入标准：（1）研究组均为初诊未治的急性淋巴细胞白血病患儿；（2）通过经医院伦理委员会审批；（3）所有受检者家长及监护人均知晓并同意签署协议。

1.2 方法

对象：研究组患儿治疗前后及对照组，所有均抽取空腹静脉血5ml，置于抗凝试管中，摇匀后作为检测标本，与PBS 液1:1稀释，在液面上加入淋巴细胞分离液，进行离心处理（转速为1500r/min），15min 后收集界面上的细胞，然后置入3ml、PBS 液，混合均匀后再次离心处理（转速为1000r/min），10min 后最终所留沉淀物则为淋巴细胞[2]。

1.3 观察指标

采取免疫组织化学染色法对两组的cdt1 蛋白水平进行检测，采取ET-PCR 检测法对cdt1 mRNA 表达水平进行检测[3]。

1.4 统计学方法

2. 结果

2.1 cdt1 蛋白水平评价

相比对照组，研究组的cdt1 蛋白表达水平较高，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组cdt1 蛋白水平对比（±s）

表1 两组cdt1 蛋白水平对比（±s）

组别 n 100 个细胞中的阳性细胞数研究组 30 15.34±4.59对照组 30 7.02.±2.47 t-8.742 P-0.000

2.2 cdt1 mRNA 表达水平评价

经检测显示对照组中无cdt1 mRNA 表达，研究组cdt1 mRNA表达水平（0.51±0.36），处于高表达状态，组间对比差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 两组cdt1 蛋白水平对比（±s）

表2 两组cdt1 蛋白水平对比（±s）

组别 n 平均光密度比值研究组 30 0.51±0.36对照组 30 0 t-7.759 P-0.000

3. 讨论

肿瘤是因正常组织过度增值引起，细胞周期异常调控与其发生具有一定的关系，而cdt1 中涵盖了546 个氨基酸，对细胞周期S 期复制起到调控作用，是细胞核染色质完整的重要保障，同时直接关系到基因结构的稳定性。相关研究指出，cdt1 的表达与癌症的发生及发展相关，呈显著升高趋势[4]。

本次通过抽取ALL 患儿静脉血分离淋巴细胞，检测细胞周期相关因子cdt1 蛋白及mRNA 的表达水平，ALL 患儿癌细胞中发生了cdt1 蛋白及mRNA 过度表达的现象，相比正常群体，两者的表达水平存在明显的差异。结果表明：相比对照组，研究组的cdt1蛋白表达水平较高，差异有统计学意义（P＜0.05）；同时经检测显示对照组中无cdt1 mRNA 表达，研究组cdt1 mRNA 表达水平（0.51±0.36），处于高表达状态，组间对比差异有统计学意义（P＜0.05）。提示细胞的异常增长与cdt1 表达水平存在相关性，因cdt1 的高表达会对血细胞造成促进其异常增生，且发生恶性病变，进而产生白血病细胞，诱导疾病发生及发展。同时可看出cdt1 及mRNA 的表达不一致，可能与蛋白代谢及细胞周期相关[5]。

儿童急性淋巴细胞白血病与cdt1 表达水平具有相关性，对临床诊疗工作的开展提供有效的参考，因此加强对cdt1 发生机制的研究具有显著的临床价值。