抗-C、抗-E复合抗体临床输血策略探讨*

田亚娟 乔芳 王远花 郭霞 钱明明 何路军 王振雷

在临床输血实践中，为有效减少因同种免疫性抗体导致的输血不良反应,输血前进行意外抗体筛查,可有效提高输血的安全性。若患者输注了含有相应抗原的红细胞,会导致红细胞输注无效甚至发生溶血反应。输血前血型血清学实验是保证输血安全的前提。在保证供者，受者ABO及RhD同型的基础上，由于意外抗体的检出与否关系到急性溶血或迟发性输血反应的发生而更有临床意义[1]。

对象与方法

1 病史 患者，女，83岁，A型，Rh（D）阳性，有妊娠史和输血史，无器官移植史，Hb：58g/L，RBC:2.73×1012/L。临床诊断：结肠癌，缺铁性贫血。医院交叉配血不合，送往我中心申请交叉配血去白悬浮红细胞4 U。

2 血清学检查

2.1 试剂：抗A、抗B试剂（上海血液生物医药有限公司，批号：20160302），反定型标准红细胞（IMMUCOR,批号115308C），IgM+IgG抗-D1(IMMUCOR，批号：517097)，IgM+IgG抗-D2(Sanquin，批号：8000227190)， IgG抗-D3（上海血液生物医药有限公司，批号20151224）、抗-C（上海血液生物医药有限公司，批号：20163002）、抗-c（上海血液生物医药有限公司，批号：20163103）、抗-E（上海血液生物医药有限公司，批号：20163201）和抗-e（上海血液生物医药有限公司，批号：20163302）。筛选细胞（Sanquin，批号：8000239806），谱细胞（Sanquin，批号：8000239357），凝聚胺试剂（珠海贝索生物技术有限公司，批号：116041）,抗人球蛋白交叉配血卡（长春博讯生物技术有限公司，批号：20160901）。

2.2 仪器：血清学专用离心机（珠海贝索生物技术有限公司，2005-2），血球洗涤离心机（ultracw）。

3 方法 按照文献[2]及试剂说明书进行血型鉴定、Rh抗原分型、意外抗体筛查与特异性鉴定、交叉配血等血清学试验。

结 果

1 血型鉴定 患者血型为A型，ccDee。

2 直接抗人球蛋白实验（DAT） 抗-IgG:阴性抗-C3：阴性。

3 间接抗人球蛋白试验（IAT） 阳性。

4 意外抗体筛查及抗体特异性鉴定 将患者血清与16份谱细胞分别在盐水和抗人球蛋白介质中反应，患者血清在盐水介质中均未发生溶血和凝集，在抗人球蛋白介质中与1、2、3、5、6、11、12、13、15号标准细胞发生凝集，与CCDee和ccDEE型红细胞凝集。检测结果显示, 在盐水介质中, 抗体筛查为阴性, 而抗人球蛋白介质中, 反应为阳性, 提示抗体为IgG类[3], 由抗体鉴定反应格局可以看出, 患者血清中存在IgG类抗C和抗E抗体（见表）或者抗CE复合抗体。以上试验能确定血清中存在不规则抗体, 但未能确定是两种独立抗体还是联合抗体, 用异体吸收试验吸收1种抗体后, 检测另外1种抗体是否存在, 即可确定是否联合抗体。在患者血清中加入洗涤后的A型，CCDee红细胞,37℃孵育30 min, 离心取红细胞，细胞做热放散后，放散液与C阳性细胞凝集，与E阳性细胞不凝集，鉴定抗体特异性为抗-C。取血清加入洗涤后的A型，ccDEE红细胞进行37℃孵育30 min, 离心取红细胞，细胞做热放散后，放散液与E阳性细胞凝集，与C阳性细胞不凝集，鉴定抗体特异性为抗-E。上述结果说明抗体为独立的抗C和抗E。

5 交叉配血 选择A型，ccee悬浮红细胞在盐水和凝聚胺介质中配血均相合。输血后，患者血红蛋白逐渐升高，Hb：58 g/L，RBC:3.37×1012/L贫血症状改善。

表1 患者血清抗体鉴定结果

讨 论

红细胞不规则抗体，又称意外抗体，是指除ABO血型系统以外的血型抗体[4]，其大多数是IgG类抗体，天然抗体存在少部分，主要经输血或妊娠等免疫刺激产生。由于女性在妊娠或输血等因素影响下，机体受到刺激的机会高于男性，因此女性的意外抗体检出率高于男性。意外抗体的阳性率与输血次数和妊娠次数等因素有关。输血次数或者妊娠次数越多，意外抗体阳性率越高[5]。意外抗体检测方法包括盐水法、酶介质法、凝聚胺法、微柱凝胶法、抗人球蛋白法等 。盐水法只能检出IgM类的不规则抗体;木瓜酶法在检测IgG抗体效价时敏感性略低,而且有漏检的可能;凝聚胺法检测结果不易判断;抗人球蛋白法和微柱凝胶法对IgG类抗体检测敏感性较高,高于凝聚胺法。

Rh血型系统在输血医学中的重要性仅次于ABO血型系统。有研究对29 808大样本人群受血者进行意外抗体筛查，其中89.2%的意外抗体产生来自Rh系统[6]。Rh血型系统是红细胞血型系统中最为复杂的遗传多态性血型系统之一，Rh基因位于人类第1号染色体短臂p区[7]，现已确定的Rh血型抗原有54个[8]。其中5个与临床关系密切的抗原：C、c、D、E、e，可引起溶血性输血反应，新生儿溶血病等[9]。抗原性强弱顺序为D＞E＞c＞C＞e, 其中D抗原最为重要, 亚洲人中, D抗原阴性即为通常所说的稀有血型[10]。现今在临床上, D抗原已经作为血型鉴定中的常规抗原进行了检测, 因而很少有经输血产生的抗D抗体, 但越来越多的输血产生Rh系统其它抗体[11]。由于Rh系统的抗原都有很强的免疫原性, 在输血和妊娠的过程中, 极易引起很强的免疫性溶血症状, 或者输血后很容易产生相应抗体[12]。据文献[13，14]报道我国汉族人Rh血型表现型分布频率以CCDee和CcDEe为主要类型，其次依次为ccDEe、CcDee、ccDEE、CCDEe、ccDee、CcDEE、CCDEE。其中ccDee血型的分布频率仅为0.003%。在我国汉族人群中发现的Rh系统同种抗体中，由于CcDEe血型在我国大部分人群中分布频率比较高，抗-C联合抗E抗体较少见，一旦产生抗-C联合抗-E抗体，很难找到相容的RhD阳性血液，引起交叉配血困难。 另外，Rh表型一致的人由于基因型的不同,其红细胞上会存在或缺失某些CE复合抗原,缺失抗原的人经过输血或妊娠免疫,可能产生针对该复合抗原的抗体，抗CE,而这种复合抗原抗体与单纯的C、c、E、e抗原均无反应性[15]。

本例患者最终选择A,ccee悬浮红细胞4 U在盐水和凝聚胺介质中配血均相合，输血后，患者血红蛋白逐渐升高，贫血症状改善。Rh系统抗体都为IgG类抗体,大多数为IgG1亚类，能引起很强烈的溶血反应, 同时也能引起新生儿溶血病，因而输血时必须选择抗体对应抗原为阴性的血液。为保证输血治疗的安全有效, 对长期输血或可能多次手术的患者, 尽量选择Rh系统表型一致的血液输注, 特别是免疫原性很强的E、c抗原[16]。因此，在实际工作中，对区域性献血者进行稀有血型普查，建立各型稀有血型供者资料库（如ccDee型），并与相邻区域建立联动机制，是保障稀有血型患者临床治疗用血的重要手段，具有不可替代的临床意义。

利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突