过敏性疾病临床诊断中血清IgE、细胞结合IgE水平检验的应用及分析

曾钊宇

广东省佛山市高明区人民医院检验科，广东佛山 528500

过敏性疾病是一种比较常见的变态反应性疾病，主要有四种分型，临床常见的是Ⅰ型过敏性疾病，包括过敏性鼻炎、过敏性哮喘、荨麻疹等[1]。世界卫生组织（WHO）已将过敏性疾病列为21世纪重点研究和防治疾病[2]。Ⅰ型过敏反应中最常见是由血清免疫球蛋白E（IgE）介导的。血清IgE是健康人体中含量低于免疫球蛋白总量0.001%的免疫因子[2]，含量虽低但在变态反应性疾病的发生、发展中起关键作用，是临床进行过敏诊断的重要指标[3]。目前临床进行患者诊断时血清IgE的具体检测指标并不相同，存在血清IgE和细胞结合IgE之分，还有医生对处理后的样本进行放置，监测放置一段时间后的血清IgE和细胞结合IgE，不同的检测指标将对患者的检查结果、治疗及预后产生不同的影响[3]。临床也存在血清IgE水平升高是否确定为过敏的争议，是否存在患者已经产生过敏反应而血清IgE水平没有升高或血清IgE水平明显升高而患者没有发生过敏[4-6]。本研究以2018年7月～2019年7月于本院进行变态反应性疾病诊断和治疗的96例患者为研究对象，与健康体检人员进行比较，比较两组血清IgE与细胞结合IgE水平，以及标本室温下放置48h和96h时两组血清IgE与细胞结合IgE水平，同时对过敏患者免疫原特异性IgE种类进行分析，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年7月～2019年7月于本院进行变态反应性疾病诊断和治疗的患者96例，定义为观察组。其中患者年龄4～61岁，平均（33.2±5.6）岁，所有患者均经免疫印迹法检测，确诊为过敏原特异性IgE阳性。96例患者中男42例，女54例，其中患有哮喘36例，荨麻疹42例，湿疹16例，药疹、痒疹等其他变态反应性疾病共2例。患者入选标准：由过敏原检测及皮肤试验而确诊；近2周均未服用抗过敏药；无其他种类的免疫性疾病；未并发肿瘤；病历数据资料完整。另将同期进行健康体检人员，过敏原特异性IgE抗体阴性者50例，定义为对组照，其中男26例，女24例，年龄6～63岁，平均（36.6±11.4）岁。两组的一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究已获得医院伦理委员会的认可与批准。

1.2 方法

1.2.1 标本处理 观察组和对照组患者均经肘静脉采血两管：一管采集于血清管，血液样本后分离血清，保存于4℃，于当天或次日内完成检测；另一管采集于EDTA-K2抗凝管，保存于4℃，于当天进行标本预处理。

1.2.2 过敏原特异性IgE的测定 观察组采用免疫印迹法检测，依据IgE抗体检测试剂盒说明书操作，进行吸入性及食物性过敏原特异性测定，判断观察组患者过敏原特异性IgE的种类分布，利用欧蒙公司EIROLineScan系统软件判定检测结果＜35000U/L为阴性，≥35000U/L为阳性[7-9]。

1.2.3 血清总IgE的测定 采用罗氏 cobas e601电化学发光法检测器进行两组患者的血清总IgE的测定。

1.2.4 细胞结合IgE的测定 按上海酶联生物生产的酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）试剂盒说明书对EDTA-K2抗凝标本采取预处理：即取1mL全血，离心，弃去上清液，加入等量的 ACK Lysis Buffer 溶解红细胞，冰敷2min，用于解离细胞膜结合IgE；再次进行离心，取上清，加入适量的5%氢氧化钠溶液中和，总体积维持1mL，按照试剂盒说明书要求进行检测。

1.3 观察指标

探讨观察组患者过敏原特异性IgE种类，比较两组血清IgE与细胞结合IgE水平，以及标本室温下放置48h和96h时两组血清IgE与细胞结合IgE水平。

1.4 统计学方法

本研究数据采用SPSS20.0分析，计量资料以（）表示，采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 观察组患者过敏原特异性IgE种类分布情况

观察组患者存在1种过敏原阳性者13例（13.54%），2种过敏原阳性 53例（55.21%），3种及以上者30例（31.25%）。其中因食物引起过敏者67例，多为海鲜和高蛋白食品；因吸入引起过敏者82例，多为尘螨、花粉和霉菌。见表1。

表1 观察组患者过敏原特异性IgE种类分布情况

2.2 两组血清IgE与细胞结合IgE水平比较

观察组血清IgE和细胞结合IgE水平明显高于对照组（P＜0.001），观察组细胞结合IgE水平明显高于血清IgE（P＜0.001），见表2。

表2 两组血清IgE与细胞结合IgE水平比较（x ± s，ng/mL）

2.3 标本室温放置不同时间后血清IgE与细胞结合IgE水平比较

经过48h和96h的放置后，血清IgE与细胞结合IgE水平明显降低，且放置时间越长，影响越大，见表3～4。

表3 放置后两组血清IgE水平比较（x ± s，ng/mL）

表4 放置后两组细胞结合IgE水平比较（x ± s，ng/mL）

3 讨论

临床研究表明，Ⅰ型超敏反应的发生多与IgE相关，机体受到变应原刺激时，血清IgE水平上升，IgE通过与肥大细胞或嗜碱性粒细胞结合，产生致敏状态[10-12]。当机体再次与该抗原接触时，变应原可与细胞表面的IgE发生结合，产生过敏反应[13]。已有研究发现 ，血清IgE不能完全反映机体IgE水平，患者机体内可能有大量IgE与单核细胞、嗜碱性粒细胞和中性粒细胞结合，使血清IgE水平正常或较低，使检查结果呈假阴性状态[14-15]。

本研究以2018年7月～2019年7月于本院进行变态反应性疾病诊断和治疗的96例患者为研究对象，与健康体检人员进行比较，分析两组血清IgE与细胞结合IgE水平，以及标本室温下放置48h和96h时两组血清IgE与细胞结合IgE水平，同时对过敏患者免疫原特异性IgE种类进行分析。本研究发现过敏患者存在1种过敏原阳性者13例（13.54%），2种过敏原阳性53例（55.21%），3种及以上者30例（31.25%）。其中因食物引起过敏者67例，多为海鲜和高蛋白食品；因吸入引起过敏者82例，多为尘螨、花粉和霉菌；经检测，结果表明，观察组血清IgE和细胞结合IgE水平明显高于对照组（P＜0.001），观察组细胞结合IgE水平明显高于血清IgE（P＜0.001）；经过48h和96h的放置后，血清IgE与细胞结合IgE水平明显降低，且放置时间越长，影响越大。

综上所述 ，血清IgE 水平和细胞结合IgE水平检测均可作为过敏性疾病的临床诊断指标，但临床检查时应注意，二者指标水平会因样品放置时间延长而降低，影响结果。未来还将对患者血清IgE水平和细胞结合IgE水平与患者过敏性症状的相关性展开研究。