Xpert MTB/RIF技术对肺结核的灵敏度和特异性分析

陆善词 黄 贞 张绮丽 冯健华 郭 炜

广东省中山市第二人民医院检验科，广东中山 528447

结核病为结核分岐杆菌（MTB）引起的传染病，其对人类健康造成重大威胁[1]，涂片镜检的敏感度不高，容易出现漏诊，也无法进行耐药检测；采用分枝杆菌培养的敏感度、特异性均较高，也能进行药敏试验，但是该方法的结果回报时间过长，对临床医生制定治疗决策不利[2-3]。利福平耐药实时荧光定量核酸扩增（Xpert MTB/RIF）技术以半巢式实时定量PCR为基数基础，对结核杆菌与利福平耐药同时进行分子水平上的检测，其具有检测结果准确可靠、结果回报时间短的优势，能在早期检测耐药结核杆菌与结核杆菌，从而为诊断肺结核与启动治疗时间创造了良好的条件[4-5]。本研究主要对XpertMTB/RIF技术应用于肺结核诊断的灵敏度与特异性进行分析，从而为临床早期诊断肺结核提供一定参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

经本院伦理委员会批准后，选取2017年8月～2019年6月我院肺科门诊收治的300例初诊肺结核可疑患者300例，其中男186例、女114例，年龄22～65岁、平均（42.2±2.2）岁。300例患者均表现胸痛、咯血、咳嗽、咳痰等症状，患者的临床资料完整，知情同意参与研究。

1.2 方法

留取所有患者的痰标本共3份，实验室对3份标本分别进行涂片镜检、固体培养以及Xpert MTB/RIF检测。

1.2.1 涂片镜检 严格按照《结核病诊断实验室检查规程》中的操作程序进行检查。

1.2.2 分离罗氏固体培养 吸取痰标本2mL，放置于带有螺旋盖的前处理管中，根据样本的形状加入1～2倍体积的4%氢氧化钠前处理液，放置于涡旋振荡器上振荡30～60s直至标本充分混合，室温下放置15min。待前处理完毕后，吸取前处理液0.1mL并将其均匀接种于2支酸性罗氏培养基斜面上，斜面水平向上，37℃下培养24h，转变为直立面培养。接种完毕后3、7d对培养情况进行观察，每7天观察1次，将生长结果纪录于分离培养结果记录本上[6]。

1.2.3 Xpert MTB/RIF检测 取痰标本共1mL，加入前处理管，加入SR痰标本处理液，量为2倍痰标本体积，将前处理管旋紧后震荡15～30s，室温下静置15min，直至痰标本充分液化。将反应盒打开，取后处理样品共2mL，经加样孔缓慢加入反应盒，反应盒放置于检测模块，由仪器进行自动检测。待反应结束后，经检测系统窗口读出测试结果。

1.3 观察指标

2个月后进行随访，将随访结果作为金标准，比较涂片镜检、固体培养以及Xpert MTB/RIF检测对肺结核杆菌的灵敏度、特异性以及准确度。采用Kappa一致性检验，Xpert MTB/RIF检测与固体培养的一致性，Kappa值≥0.75提示一致性较好。

1.4 统计学处理

本研究数据经SPSS19.0处理，计数资料（%）采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 随访结果

300 例初诊肺结核可疑患者中，经临床综合诊断与治疗后，确诊肺结核244例，占81.33%；其余56例患者为非肺结核患者，占18.66%。

2.2 涂片镜检与金标准比较

300 例患者经涂片镜检结果：漏检3例，阳性48例，阴性249例，涂片镜检的灵敏度为19.67%（48/244）、特异性为 22.22%（56/252）、准确度为18.94%（104/549），见表1。

表1 涂片镜检与金标准比较

2.3 固体培养与金标准比较

300 例患者经固体培养检查结果：漏检28例，阳性98例，阴性174例，固体培养的灵敏度为36.03%（98/272）、特异性为 27.72%（56/202）、准确度为32.49%（154/474），见表2。

表2 固体培养与金标准比较

2.4 Xpert MTB/RIF技术与金标准比较

300 例患者经Xpert MTB/RIF技术检查结果：漏检0例，阳性115例，阴性185例，Xpert MTB/RIF的灵敏度为47.13%（115/244）、特异性为30.27%（56/185）、准确度为 35.26%（171/485），见表3。

表3 Xpert MTB/RIF技术与金标准比较

2.5 Xpert MTB/RIF技术与固体培养的灵敏度、特异性以及准确度一致性分析

Xpert MTB/RIF技术与固体培养的灵敏度、特异性以及准确度分析发现，Kappa值为0.860、0.879、0.872，均＞ 0.75，二者一致性良好。

3 讨论

控制肺结核疫情、消除结核病对人类健康造成危害的关键在于早发现、早诊断、早治疗。长期以来，结核病诊断技术仍然是传统的细菌学、影像学检查方法，尽管培养法、涂片法的特异性高，但是其敏感度低而容易出现漏诊；采用传统 “培养+药敏”的方法结果回报时间长，这对临床医生制定结核病初始治疗决策不利，容易造成患者的病情延误，对控制传染源、防止疫情扩散也不利。传统涂片镜检阳性检出率低；固体培养法的耗时较长，通常在8周左右，因此对肺结核的诊疗不利[7-9]。Xpert MTB/RIF技术回报时间短的优势使其前移了肺结核的诊断关口，这有助于实现早发现、早诊断、早治疗。

Xpert MTB/RIF技术基础为半巢式实时定量PCR技术，其同时对利福平与MTB进行分子水平上的检测；该技术具有结果准确可靠的优势，结果回报时间短，回报时间在2h以内，这一优势使其具有取代传统TB检测的潜力；该技术将PCR扩增与检测整合于封闭反应盒内，将样本加入后自动在反应盒内完成试验过程，具有操作简便的特点，简化了操作，减少了检验人员的工作量；该技术还具有样本处理简单的优势，液化样本的试剂具有灭活MTB的能力，减少了检验过程中的生物污染风险，因此该技术具有作为即时检验工具的潜力；由于该技术对实验室基础设施的要求不高，该技术也可以应用于城镇实验室，因此其具有推广的价值[10-13]。该技术还可以对利福平的耐药性进行评价，其有助于指导临床治疗。

本研究结果提示，Xpert MTB/RIF技术诊断肺结核的灵敏度、特异性、准确度均高于传统涂片镜检，该技术的检测结果与固体培养的一致性良好，提示这一技术检测肺结核的灵敏度、特异性以及准确度均较传统检测方法更高。这一技术可以进行结核分枝杆菌的快速鉴定，还能快速检测对利福平的耐药性，能发现传统检测技术难以发现的结核患者，这对早发现、早诊断、早治疗具有重要意义[14-15]。

但需要注意的是，Xpert MTB/RIF技术的检测成本比较高，因此这一技术当前还无法广泛应用于基层医院，在当前资源有限的局面下，建议将该技术应用于利福平耐药率比较高的医院。该技术大范围应用仍然需要进行不断研究。

综上所述，Xpert MTB/RIF技术应用于肺结核诊断的灵敏度、特异性均较涂片镜检更高，与固体培养的一致性较高，其具有操作简便、检验迅速的优势，值得推广。