臭氧自血疗法辅助治疗慢性心力衰竭患者的临床疗效及安全性分析

杨伊萍 傅慎文 钟鸣 何建荣 何鸣皓

慢性心力衰竭（chronic heart failure，CHF）是严重危及患者生命的一种疾病，即使经过积极治疗，其5年生存率仍不足50%，而且其发病率、病死率呈逐年增加趋势[1]。CHF的病理机制较为复杂，研究显示氧化应激在CHF的发生、发展过程中起着重要作用[2]。臭氧自血疗法（ozone autohemotherapy，O3-AHT）是一种补充性的新型生物疗法，通过向自体血中外源性补充臭氧（ozone，O3），改善氧化应激，提高血氧饱和度。O3-AHT目前已应用于脑卒中、缺血性外周血管病、冠心病等疾病治疗[3-4]，但在治疗CHF方面尚属起步阶段，本院对CHF患者在常规药物治疗的基础上联合O3-AHT治疗，分析其临床疗效和安全性，现报道如下。

1 对象和方法

1.1对象 选择2018年7月至2019年6月在本院住院的CHF患者60例，其中男33例，女27例，年龄45～78（61.6±8.6）岁；合并高血压27例，糖尿病16例；缺血性心脏病34例，非缺血性心脏病26例。按入院先后顺序采用随机数字表法将患者分为O3-AHT组和对照组，各30例，O3-AHT组男17例，女13例，年龄45～78（61.7±8.9）岁；对照组男16例，女14例，年龄47～76（61.4±8.4）岁。两组患者性别、年龄比较差异均无统计学意义（均P＞0.05），具有可比性。纳入标准：所有患者均符合中华医学会心血管病学分会制定的《慢性心力衰竭诊断治疗指南》中的诊断标准；左心室射血分数（left ventricular ejection fraction，LVEF）＜50%；纽约心脏协会（New York Heart Assocation，NYHA）分级Ⅱ～Ⅲ级。排除标准：急性心肌梗死患者；急性感染、肝肾功能严重不全、甲状腺功能亢进或甲状腺功能减退者；恶性肿瘤、免疫系统、神经系统或消化系统严重疾病者；出血性疾病、凝血功能障碍、血小板减少、葡萄糖-6-磷酸酶缺乏者；妊娠。本研究取得患者知情同意，并经过医院伦理委员会批准（2018-170-001）。

1.2方法

1.2.1 治疗方法 对照组患者采用常规药物治疗，包括血管紧张素转化酶抑制剂（angiotensin converting enzyme inhibitor，ACEI）/血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂（angiotensinⅡreceptor antagonist，ARB）、β受体阻滞剂、利尿剂，必要时加用地高辛、硝酸酯类药物。O3-AHT组患者则在常规药物治疗的基础上联合O3-AHT治疗,依据“臭氧治疗规范”[5]进行操作，采用德国赫尔曼公司生产的医用臭氧发生设备。O3-AHT操作步骤：（1）专用血袋（内含枸橼酸钠抗凝剂）与采血回输器连接；（2）选肘正中静脉穿刺置针，在专用血袋内抽取患者外周血100 mL；（3）取等体积的O3加入专用采血袋内，与血液充分混合5 min；（4）O3自体血回输至体内。治疗过程中严密监测患者生命体征及不良反应，注意无菌操作。O3-AHT每2 d 1次，10次为1个疗程，共1个疗程。O3的浓度为20～35 mg/L，从20 mg/L开始，每次增加5 mg/L直至35 mg/L。

1.2.2 O3-AHT治疗安全性观察O3-AHT治疗过程中及治疗后15 min内监测生命体征，观察患者有无畏寒、发热、胸闷、气急、恶心、呕吐等不适。观察患者穿刺处有无出血、血肿、过敏反应、感染以及是否耐受多次治疗。

1.2.3 检测指标 （1）脑钠肽（brain natriuretic peptide，BNP）测定：于治疗前、治疗1个疗程后采集患者空腹静脉血2 mL，BNP采用纯态氧介导化学发光法测定（参考值：0～450 pg/mL），试剂盒购自德国罗氏公司。所有标本检验均严格按照操作流程及说明书进行。（2）6 min步行试验（6-minute walking test，6MWT）：于治疗前、治疗1个疗程后行6MWT，6 min内，如果步行距离＜150 m，为严重心力衰竭；150～425 m，为中度心力衰竭；426～550 m为轻度心力衰竭。（3）心脏彩超：患者治疗前及治疗后6个月分别进行心脏彩超检查，采用荷兰飞利浦公司IE-33心脏超声仪，检测患者左心室舒张末期内径（left ventricular end diastolic diameter，LVEDd），左心室收缩末期内径（left ventricular end systolic diameter，LVESd），Simpson法测定LVEF。

1.2.4 随访 治疗后定期随访，每月1次，共6个月。记录随访期间心血管不良事件发生情况。心血管不良事件包括：（1）症状恶化（NYHA分级增加）；（2）因心力衰竭加重需要增加药物剂量或增加新的药物；（3）因心力衰竭或其他原因需住院治疗；（4）死亡。

1.3统计学处理 采用SPSS22.0统计软件，计量资料以表示，组间比较采用两独立样本t检验，组内治疗前后比较采用配对t检验；计数资料以百分率表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1两组患者治疗前后BNP及6MWT比较 见表1。

表1两组患者治疗前后BNP及6MWT比较

由表1可见，治疗前两组患者BNP水平及6MWT距离差异均无统计学意义（均P＞0.05），治疗后两组BNP水平降低，6MWT距离增加，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。治疗后O3-AHT组BNP水平低于对照组，6MWT高于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

2.2两组患者治疗前后心脏彩超指标比较 见表2。

表2两组患者治疗前后心脏彩超指标比较

由表2可见，两组患者治疗前LVEDd、LVESd及LVEF差异均无统计学意义（均P＞0.05），治疗后两组LVEDd和LVESd下降，LVEF升高，差异均有统计学意义（均P＜0.05），O3-AHT组LVEDd和LVESd低于对照组，LVEF高于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

2.3两组患者不良反应发生情况比较O3-AHT组发生穿刺处出血1例，采用指压止血方法止血后好转，无一例出现畏寒、发热、胸闷、气急、恶心、呕吐、过敏反应及感染。两组不良反应发生率比较差异无统计学意义（χ2=1.02，P＞0.05）。

2.4两组患者心血管不良事件发生情况比较6个月内O3-AHT组发生因心力衰竭症状加重需要调整药物剂量1例（3.3%）；对照组因心力衰竭住院1例、因心力衰竭症状加重需要调整药物剂量2例，共3例（10.00%）。O3-AHT组6个月内心血管不良事件发生率低于对照组，但差异无统计学意义（χ2=1.07，P＞0.05）。

3 讨论

文献报道CHF住院期间病死率为5%～8%，1年病死率高达20%～40%[6]。CHF的病理机制较为复杂，包括神经激素失衡、炎性介质异常、氧化应激和心室重塑等多种因素。目前临床治疗已从单纯缓解症状转变为以防止、延缓或逆转心室重塑为主，以期降低患者住院率与病死率[7]。

O3-AHT疗法通过外源性O3与自体血混合，发挥抗氧化应激及改善氧和等作用。目前在心血管领域已应用于高脂血症、高血压病、冠心病等疾病治疗[8-10]，并取得了良好的临床效果。但其在辅助治疗CHF方面国内研究较少。Buyuklu等[11]研究了40例NYHAⅡ～Ⅲ级、LVEF＜35%的CHF患者，给予5周的O3-AHT治疗，发现O3-AHT组LVEDd和LVESd显著降低，6MWT距离增加，提示O3-AHT对CHF患者心功能的改善有一定帮助。

本研究发现O3-AHT组较对照组治疗后BNP、6MWT改善显著，治疗后6个月O3-AHT组LVEDd和LVESd降低，LVEF升高，且O3-AHT治疗不良反应较少，这与Buyuklu等[11]的研究结果一致。本研究提示在常规药物的基础上，辅助O3-AHT治疗不仅有助于改善患者心功能及心室重构，而且安全性高。分析可能机制有：（1）O3-AHT治疗改善氧化应激：O3溶于血浆中，能与多不饱和脂肪酸等多种底物发生反应，生成活性氧、脂质氧化产物和还原型谷胱甘肽，参与调节细胞代谢，改善氧化应激。Martínez-Sánchez等[10]研究显示O3-AHT治疗可以使超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性分别降低57%和32%，提高机体抗氧化状态。Buyuklu等[11]发现O3-AHT可以显著减少CHF患者一氧化氮和丙二醛，增加超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、还原型谷胱甘肽和谷胱甘肽过氧化物酶，提示O3-AHT可能通过改善CHF患者的氧化应激，进一步改善心功能。（2）抗炎因子：研究显示炎性因子的释放可导致人体神经内分泌功能紊乱，加快心室重构，损伤心功能，而心室重构又可进一步激活炎性因子，形成恶性循环[12]。研究证实O3可以通过Toll样受体-核转录因子Kappa B通路降低肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素（interleukin，IL）-1β和IL-6及细胞间黏附分子-1、微小RNA表达水平，从而降低体内炎性因子水平，达到潜在的抗炎效应[12-13]。（3）O3作为一种强氧化剂，可激活红细胞代谢，增加血液携氧及组织供氧量，降低氧合血红蛋白的结合程度，使氧离曲线右移，促进红细胞对氧气的释放，使组织储备氧气的能力增强[7]。

综上所述，O3-AHT辅助治疗CHF能有效降低BNP，改善6MWT，提高LVEF，改善心功能和心室重塑且安全性高，具有较好的临床应用价值。但本研究样本量较少，随访时间短，O3-AHT具体的适应证、使用疗程等有待进一步大样本、多中心的观察。