采取最佳的前处理方法 准确测定固态食品中的人工合成着色剂

曹张欢

当前食品加工过程中常使用到色素，色素又分为天然色素和人工合成着色剂两类。人工合成着色剂主要是以化工产品为原料，通过化学反应而制得，因性能好且价格低廉而被广泛添加到食品中，但长期过量摄入会对人体造成伤害。国家标准GB 5009.35的前处理方法并不适用于固态食品，可操作性差、回收率低，本文以胭脂红为代表进行检测，对固态食品中人工合成着色剂的前处理进行研究。

一、仪器与材料

1.仪器、耗材：赛默飞世尔高效液相色谱仪，高速冷冻离心机；目聚酰胺粉（80-100）、乙醇、甲醇（色谱纯）、氨水、甲酸、柠檬酸、钨酸钠、正己烷、乙酸铵、胭脂红标准品（中国标准物质研究中心）。

2.色谱条件：色谱柱：安捷伦C18。柱温：30℃。流速：1.0mL/min。流动相：甲醇+乙酸铵（0.02mol/L）。检测波长：254nm。进样体积：10μL。梯度洗脱甲醇：5%，0-3min；35%，3-10min；100%，10-15min；5%，15-23min。

3.样品种类：蛋糕，鱼酸菜，腊肉。

二、样品前处理

1.提取。称取已粉碎样品10g，置于50mL离心管中，加入15mL无水乙醇-氨水-水溶液，涡旋、超声提取10分钟，离心，获取上清液并置于50ml離心管中，再加入10ml无水乙醇-氨水-水溶液重复提取两次，合并上清液。

2.除脂肪、沉降蛋白。加入5mL正己烷，摇匀离心，弃去上清液，在70℃水浴上浓缩提取液至20ml，用20%柠檬酸溶液调pH值3.5-4.5，加10%钨酸钠溶液1ml，使蛋白质沉淀。离心，上清液收集于50ml烧杯中。

3.纯化。按GB5009.35的前处理方法，将1.0g聚酰胺粉加少许水调成粥状，倒入加热至70℃的试样溶液中，搅拌使色素完全被吸附。用水将聚酰胺粉少量多次全部转移至G3垂融漏斗中，打开真空泵抽滤，用柠檬酸溶液洗涤4次，再用甲醇+甲酸洗涤4次，最后用水洗至流出液呈中性。上述洗涤过程需搅拌。用无水乙醇+氨水+水解吸4次，收集解吸液，水浴蒸发至近干，加水超声溶解，定容至5ml，经滤膜过滤，上液相色谱仪测定。

三、试验结果与讨论

固态食品含有大量淀粉、脂肪、蛋白质等，不同的前处理方法会直接影响实验的可操作性和回收率。每种样品各称取四份相同的样品，一份用于检测样品中胭脂红含量，结果为阴性；其余三份样品中加入胭脂红标准样品100μm，用不同的处理方法，回收率见下表。结果显示，用无水乙醇+氨水+水超声离心提取样液、除蛋白、除脂肪处理固态食品是最佳的处理方法，既满足实验的可操作性，又得到较好的回收率。

本实验方法可操作性强，重现性好，回收率高。对国标合成着色剂检测实验中遇到的难题给出了解决方案，在检测固态食品时可参考此方法。