STin2 VNTR 基因多态性与偏头痛易感性Meta 分析*

关欣颖 董 欣 万 琪

（1 南京医科大学康达学院附属医院连云港市第一人民医院神经内科，连云港222000；2 南京医科大学第一附属医院神经内科，南京210036）

偏头痛是一种常见的慢性神经血管性疾患，以反复发作的单侧或双侧搏动性头痛为特点，常伴有恶心、呕吐、畏光、畏声，头痛一般持续4～72 h。根据国际头痛学会(international headache society, IHS)分类标准，偏头痛可以分为先兆偏头痛和无先兆偏头痛[1]。根据最新的全球疾病负担显示，在50岁以下的人群中偏头痛已跃居致失能性疾病排行榜第一位[2]，严重影响病人工作、学习、家庭和社会关系[3]。

目前偏头痛的发病机制尚不明确，其中三叉神经血管学说受到广泛认可。五羟色胺(5-HT)在其中起着重要的作用，低5-HT 水平可促发三叉神经血管疼痛通路进而触发偏头痛发作，而5-HT 受体激动剂能起到终止偏头痛急性发作的作用，同时5-HT 转运蛋白(5-HTT)介导的突触前再摄取也可以使5-HT失活[4]。因此，5-HT 转运蛋白在偏头痛的发生中发挥着重要作用[5]。5-HT 转运蛋白由位于人类染色体17q11.1-17q12 上的SLC6A4（the solute carrier member 6, family 4）基因编码[6]，其中VNTR 是位于SLC6A4 内含子2 的17-bp 的可变数目串联重复序列，包含多个等位基因：STin2.7，STin2.9，STin2.10，STin2.11 和STin2.12[7]。这一基因多态的具体生物功能尚不明确，但是其中STin 2.10 (360 bp, 10 copies) 和STin 2.12 (390 bp, 12 copies)可能与转录调控有关[8]。因此，STin2 VNTR 基因多态性是重要的偏头痛候选基因，可能与偏头痛易感性相关，但是目前国内外相关研究得出的结论并不一致， Schurks 等[9]的系统分析指出STin2.10/10，10/12 基因型对欧洲后裔具有偏头痛保护作用，但是未纳入亚洲人群研究结果，因此本文的Meta 分析增加纳入亚洲人群的相关研究结果，进一步探讨STin2 VNTR 基因多态性与偏头痛之间的相关性及种族差异性。

方 法

1.文献检索

全面检索Pubmed 和Embase 数据库，检索的主题词和关键词包括： “头痛”、“偏头痛” 、“五羟色胺”、“SLC6A4”、“基因”、“多态性”、“遗传变异”，检索时限截至2018 年10 月，只筛选公开发表的英文文献。

2. 纳入标准

符合下列标准的文献被纳入Meta 分析：①探讨STin2 VNTR 基因多态性与偏头痛关系的队列研究或病例对照研究；②偏头痛的诊断标准采用国际头痛分类第三版的诊断标准；③可以提取病例组和对照组基因型和等位基因的分布频率；④若有重复发表的数据，选择最近发表或最完整的文献。

3. 数据提取

从纳入研究中提取以下信息：第一作者、发表时间、研究对象国家和种族、研究方法、对照组和试验组病例数、偏头痛分类（所有偏头痛病人All、有先兆偏头痛MA、无先兆偏头痛MO）、等位基因及基因型分布频率。种族亚组被分为白人和亚洲人。所有文献数据提取由两名研究者独立完成，意见存在分歧的部分通过协商讨论达成一致。若文献中提供的数据不全，尽可能地与通讯作者联系获得。

4. 统计学分析

本研究采用Review Manager 5.0 软件和STATA 11.0 软件进行数据分析。采用X2检验对每项研究中对照组的基因型分布进行Hardy-Weinberg (H-W)遗传平衡检验。本研究探讨5-HTT STin2 VNTR 基因多态性和偏头痛的相关性主要基于以下遗传模型：①等位基因比较；②显性模型；③隐性模型；④共显性模型（纯合子模型和杂合子模型），同时根据人群不同种族和偏头痛类型进行亚组分析。采用Q检验进行异质性分析，并根据I2值来评估异质性大小。当I2≤50%说明纳入研究之间异质性较小，采用固定效应模型合并数据；I2＞ 50%提示纳入研究之间异质性明显，则采用随机效应模型进行数据合并。采用Begg's 漏斗图和Egger's 检验评估发表偏倚，并采用敏感性分析评价结果的稳定性，P＜ 0.05为差异有统计学意义。

结 果

1.文献纳入及基本特征

共检索出316 篇文献，根据本研究文献的纳入标准，最终共纳入7 篇文献[7,10～15]。其中5 项研究人群来自白种人，2 项研究人群来自亚洲人，有5项关于MA 病人的研究，5 项关于MO 病人的研究，有2 项研究对照组不符合H-W 遗传平衡定律，纳入对照组1166 例，病例组897 例。表1 列出纳入研究的基本特征。

2. STin2 VNTR 多态性和偏头痛的关系

（1）STin2 VNTR 多态性与所有偏头痛的关系：在所有遗传模型中，总体人群和种族亚组分析均未见STin2 VNTR 与所有偏头痛(All)的关联性（见表2、3 和图1）。

（2）STin2 VNTR 多态性与有先兆偏头痛(migraine with oura, MA)的关系：等位基因比较和隐性模型分析提示STin2.12 等位基因及12/12 基因型增加MA 的易感趋势，在种族亚组分析中，白种人群也存在类似的易感趋势（见表2）；亚洲人群中未见此类易感趋势（见表3）。

（3）STin2 VNTR 多态性与无先兆偏头痛(migraine without oura, MO)的关系：等位基因比较提示STin2.12 等位基因增加MO 的易感趋势；隐性模型分析表明STin2 VNTR 多态性与MO 呈显著正相关，与（12/其他+其他/其他）基因型相比，12/12 基因型携带者显著增加MO 发病风险(OR= 1.31, 95%CI = 1.03-1.66,P= 0.03,I² = 31%)；在白种人群中亦提示STin2.12 等位基因和12/12 基因型增加MO 的易感趋势（见表2 和图2）；但在亚洲人群中未见此趋势（见表3）。

3. 发表偏倚和敏感性分析

Egger's 线性回归分析提示在纯合子模型中STin2 VNTR 多态性与MA 的相关性研究可能存在发表偏倚(P= 0.015)，但Begg's 秩相关检验结果表明此发表偏倚消失(P= 0.086)，其他遗传模型中STin2 VNTR 多态性与偏头痛及其亚型的相关性研究均未见发表偏倚（见表2 和图3）。敏感性分析提示在隐性模型中STin2 VNTR 多态性与所有偏头痛(All)易感性的关联性研究，当剔除OR 值最大的Yilmaz[7]研究或不符合H-W 遗传平衡定律的两项研究（Lea[11]研究和Yilmaz[7]研究）后，合并效应量ORs 分别为1.27 (1.04-1.56)和1.33 (1.06-1.67)。其他模型中，STin2 VNTR 多态性和所有偏头痛、MA、MO 相关性的分析结果均未见明显改变，提示Meta 分析结果是稳定的。

表2 STin2 VNTR 不同遗传模型合并分析的OR 值和异质性

图1 5-HTT VNTR 基因与偏头痛相关性的森林图（All migriane 隐性模型：12/12 vs. 12/其他+其他/其他；种族分组：Caucasion 白人、Asian 亚洲人）

讨 论

本研究关于STin2 VNTR 多态性与偏头痛相关性的Meta 分析共纳入897 例病例和1166 例对照。Meta 分析结果提示STin2.12 和STin2.12/12 基因型增加有先兆偏头痛和无先兆偏头痛的易感趋势，其中STin2.12/12 基因型与无先兆偏头痛易感性呈显著正相关。Schurks 等[9]发现STin2.12/12 与欧洲人群偏头痛易感性存在关联性，与本研究结果中STin2.12/12 基因型显著增加无先兆偏头痛易感性相一致。

图2 5-HTT VNTR 基因与偏头痛相关性的森林图（MO 隐性模型：12/12 vs. 12/其他+其他/其他）

表3 亚洲人群STin2 VNTR 不同遗传模型合并分析的OR 值和异质性

图3 5-HTT VNTR 基因与偏头痛相关性发表偏倚漏斗图(All migraine 等位基因比较12 vs. 其他：P = 0.582)

既往研究显示循环中的5-HT 代谢水平异常改变是偏头痛发作的触发事件[16]，偏头痛发作时血浆中5-HT 降低，血小板5-HT 再摄取率降低，血小板5-HT 再摄取由5-HT 转运蛋白介导[17]。SLC6A4编 码5-HT 转 运 蛋 白，VNTR 是SLC6A4 基 因 多态中的一种。STin2 VNTR 多态性的生物功能尚不明确，据推测STin2 VNTR 扮演转录调节子的作用，具有等位基因依赖性及增强子的特性[18]。功能学研究提示STin2.12 和STin2.10 显著增加基因转录活性，且STin2.12 显著高于STin2.10[8]。同时STin2.12 纯合子携带者的血小板5-HT 再摄取率显著低于STin2.10 和STin2.9 杂合子携带者[18]。这些研究结果在一定程度上解释了本研究中STin2.12/12基因型显著增加无先兆偏头痛的易感性，但是有关STin2.12/12 基因型对有先兆偏头痛病人易感性的作用，有待大样本队列研究及相关功能实验加以验证。

本研究存在一定不足：①本研究共纳入病例组897 例和对照组1166 例，研究样本量较小；②本研究纳入的文献均为英文文献，可能会带来一定的选择偏倚；③纳入研究间的异质性对最终结论的可靠性有一定的影响。各研究间的混杂因素不一，如年龄分布、性别、种族、生活环境、对照组的选择标准及匹配信息等均可能会对研究结论造成影响；④纳入研究中没有国内人群相关研究数据，在中国人群中STin2 VNTR 基因多态性与偏头痛易感性的关系需要进一步临床研究研究进行验证。

综上所述，本研究表明STin2.12/12 基因型与无先兆偏头痛易感性呈显著正相关。在未来的研究中，还需要进一步开展大样本、标准化的临床研究以验证STin2 VNTR 基因多态性与偏头痛易感性的关系 ，进而为偏头痛的发生机制提供更多思路，为偏头痛的临床治疗提供新的途径。