长寿花观赏价值及组织培养初步研究

马 群，薛永飞，齐占涛，郭 妙

(1.大同市城墙带状公园管理中心，山西 大同 037004；2.大同市智家堡公园，山西 大同 037004；3.大同市儿童公园，山西 大同 037004)

1 引言

长寿花(Kalanchoebolssfeldiana)属景天科伽蓝属多年生肉质草本植物，又名矮生伽蓝菜、圣诞伽蓝菜、寿星花，原产非洲马达加斯加岛。19世纪末已开始商品生产，现已成为优良冬春季室内盆花[1]。长寿花喜温暖湿润和阳光充足环境，不耐寒，耐干旱，夏季怕高温，宜良爽气候，冬季温度不低于5 ℃；对土壤要求不严，以肥沃沙壤土为好。盆栽后，在稍湿润环境下生长旺盛；过于干旱或温度偏低，生长缓慢，叶片发红，花期推迟[3]。当前，提高品质是国内长寿花生产者面对的主要难题[2]。由于长寿花繁殖系数低，不能满足生产的需要，为了提高繁殖系数，对长寿花进行了离体快繁技术的初步研究。

2 长寿花的概述

2.1 形态特征及品种

茎直立，株高10～30 cm，株幅15～30 cm；全株光滑无毛，叶肉质，交互对生；椭圆状长圆形，叶片上半部具圆齿或成波状，下半部全缘，深绿色，有光泽，边略带红色，花朵细密拥簇成团，整体观赏效果甚佳。圆锥状聚伞花序，花多数，花色有绯红、桃红、橙红、黄、橙黄、紫红、白，花期2～5月[2]。目前长寿花销售可大致分为5个系列[3]。

丰花长寿是品种花色最多的系列。观赏效果出色，适合窗台、茶几、餐桌等处摆放[3,4]。迷你系列株形小巧，生产周期短、产量高[4]。光照充足即可，对生长环境要求不高，适合新手养殖盆栽。垂吊系列花色较少，常见的有下垂风铃状花、四角星状花[4]。特殊品种系列有黄、橙黄、橘黄、白色，特点是叶片鹿角状，很受追求独特的消费者喜爱[3]。重瓣系列总体花期更长、花色更丰，常见品种主要有：卡罗林(Caroline)、西莫内(Simone)、内撒利(Nathalie)、阿朱诺(Arjuno)、米兰达(Miranda)、块金(Nugget)系列、四倍体的武尔肯(Vulcan)、肯尼亚山(MountKenya)、萨姆巴(Sumba)、知觉(Sensation)和科罗纳多(Coronado)[3,4]。目前这五个系列市场销路都不错，尤其重瓣系列已成为花卉市场的主要利润增长点[1]。

2.2 栽培技术

扦插苗上盆时，腐叶土2份与1份砂或煤渣混合。生长期盛夏遮荫时，保持60%的透光率，春、秋、冬季注意充足光照[1]。天气干燥，需在植株上及周围喷水，以增加空气湿度。旺盛生长期，施肥2～3次/月[3,4]。冬季室内10 ℃以上，仍然可以有很好的长势并保持开花，室内不低于0 ℃可以安全越冬[3,4]。病虫害应及时发现、及时防治，保持植株健康生长。

2.3 目前市场状况

多年来，长寿花一直是普通老百姓喜爱的花卉之一，能常年保持较好的市场份额，价格相对稳定，且品种更新换代快、紧跟国外育种公司的脚步[1，2]。多肉植物未来5年市场销售仍将处于上升期，利润十分可观，除去成本和运输、人工等费用，一盆普通多肉植物利润为零售价的50%以上[2]。目前，国内销售的高品质长寿花大多依赖荷兰进口，把品质提高是国内长寿花生产者所面对的主要难题[3]。

2.4 组织培养研究目的

目前，长寿花在园林中应用日益增多，为了提高繁殖系数，以长寿花的幼叶和幼茎为外植体，接种在加入不同浓度植物生长调节剂的培养基中，诱导愈伤组织及丛生芽，对其进行组织培养的初步研究。

3 材料与方法

3.1 材料

长寿花供试材料均来自四川农业大学林木遗传育种的实验苗圃。以幼茎和幼叶为材料，取生长健康的当年生枝条若干，除去附着在外植体表面的污物，用浓洗衣粉液浸泡10 min，再用自来水冲洗2 h[4]。在无菌条件下，用75%的酒精处理15 s，接着用0.1%升汞溶液分别处理5min和7 min；再用升汞浸泡杀菌、无菌水漂洗过程中，间隔1～2 min轻轻搅动,达到更好的杀菌和减少升汞残留的目的[4]。将处理好的外植体放在培养皿的无菌纱布上，吸取表面水分，然后将外植体剪成约0.5 cm长的小段，接种在配制好的培养基上。

3.2 试验方案

以MS培养基为基本培养基，附加不同的激素构成(表1)。将每个处理分为两部分，用0.1%升汞溶液分别处理5 min和7 min，观察不同灭菌时间对灭菌效果及外植体成活率的影响。

表1 培养基中植物生长调节剂浓度及其组合

3.3 培养条件

对取下的茎和叶进行常规消毒。将处理好的茎段和叶片接种到快繁培养基(表1)上，其中琼脂6～7 g/L，蔗糖30 g/L，pH值调至7.0左右，高压蒸汽灭菌18 min。培养温度为25 ℃，光照周期为8 h/d，弱、散射光。所有试验均使用试管[5]。每个处理接种15支，每支1个外植体。培养35 d开始统计愈伤组织块数和丛生芽个数。

4 结果与分析

4.1 不同处理愈伤组织诱导的差异

将剪下的叶片、茎段接种在初代培养基上进行培养，培养8～10 d，愈伤组织在切口处形成，培养基中不同浓度植物生长调节剂及其组合对长寿花叶片、茎段形成愈伤组织的时间、生长速度、愈伤组织的致密性等方面的影响较为明显，详见表2。通过观察发现，不同处理的长寿花在初代培养基上诱导愈伤组织的反应不一，主要表现在开始产生愈伤的时间、愈伤组织的生长速度和生长状态、愈伤组织产生。

表2 不同处理愈伤组织的诱导情况

从表2可以看出，NAA浓度较高时，诱导形成的愈伤组织疏松、透明、湿润、生长迅速，接种后8～10 d开始有愈伤组织在切口处形成，10～15 d进入迅速生长期。2,4-D在低浓度下(不大于1.0 mg/L)，愈伤组织诱导率较低、黄绿色、致密、生长缓慢、易褐化；高浓度下(大于1.0 mg/L)愈伤组织墨绿色、黏稠、湿润、生长慢、不褐化。6-BA浓度较高的处理在接种后10～11 d开始有愈伤组织在切口处形成，15～20 d进入迅速生长期。

2,4-D的浓度对愈伤组织诱导的影响比较明显，NAA的浓度对愈伤组织质量或状态影响较大。当NAA浓度一定时，愈伤组织诱导率和增殖情况随6-BA浓度的升高而增加，生长状况变化不大。因此，在长寿花愈伤组织诱导和增殖中，适当提高培养基中的6-BA浓度和降低NAA浓度，可提高诱导率和增殖情况，并获取较高质量的愈伤组织。

4.2 不同处理丛生芽诱导的差异

由表3可以看出，2,4-D 的浓度对诱导芽数的影响较大，如浓度为1.0 mg/L时，诱导的丛生芽芽数多、无失绿现象，而浓度为1.5 mg/L时，芽数少、有部分失绿现象。6-BA 较高时，诱导芽数较高。NAA的浓度对诱导芽数的影响不大。

4.3 不同灭菌时间对外植体灭菌效果的影响

由表4可以看出，升汞处理时间为7 min的材料污染率较低，外植体成活率较高。从死亡材料来看，多为切割较小的材料。所以，对于长寿花外植体的表面灭菌处理时间，应按取材的老嫩程度做适当调整，升汞处理时间7 min为宜。

表3 不同处理丛生芽的诱导情况

表4 不同灭菌时间对灭菌效果及外植体成活率的影响

5 结论与讨论

5.1 结论

通过对长寿花在不同浓度、不同植物生长调节剂的组合上诱导愈伤组织和增殖情况的研究，从愈伤组织的致密性、较高的诱导率和较好的增殖情况综合得出，适合长寿花愈伤组织诱导的培养基为MS+2，4-D(1.0 mg/L)+6-BA(1.5 mg/L)+NAA(1.0 mg/L)+蔗糖(30 g/L)+琼脂(6-7 g/L)。2,4-D 的浓度对诱导芽数的影响较大。长寿花升汞处理时间7 min为宜，外植体的表面灭菌处理时间，应按取材的老嫩程度做适当调整。

5.2 讨论

在植物组织初代培养中，污染直接影响无性系建立的速度[7]。就长寿花而言，在切口处流出的大量汁液，常导致细菌性污染，可能与汁液包裹着杂菌一起附着在外植体表面，造成升汞触杀困难有关。本试验中用0.1%升汞溶液处理外植体7 min，除去附着在外植体表面的汁液，减少污染的效果明显，但不能减轻褐化，且消毒时间梯度偏少，时间跨度偏小。