沉液质调节剂与血液质调节剂对正常大鼠肝脏能量代谢的相关因子的影响

买买提艾力·卡的，熊成，艾尼瓦尔·塔力甫()

(1.新疆医科大学，新疆 乌鲁木齐；2.新疆维吾尔自治区维吾尔医医院，新疆 乌鲁木齐)

0 引言

体液学说是维吾尔医学最基本而最重要的学说之一。体液学说是指认识人体所有的四种体液并运用于生理病理现象的学说。维吾尔医认为，体液是在火、气、水、土等自然界四大物质和人体气质的影响下，以摄取的各种饮食为基础，通过肝脏的正常功能所产生的胆液质、血液质、黏液质、沉液质等四种体液[1]。调节法，是为调节非体液型失调气质或调节轻度体液型气质失调而用的治疗方法。调节非体液型(热性、湿性、寒性、干性和干热性、湿热性、湿寒性、干寒性)气质失调用寒化法、热化法、湿化法及干化法。调节体液型(胆液质、血液质、黏液质、沉液质)气质失调，则用相应的调节剂[2]。

调节剂是成熟、调整及加强免疫功能的复方剂，它是一个维吾尔传统医学的特色疗法之一，是治疗气质失调性疾病的最重要的过程；具有调整气质，提高免疫力，补充液体作用之外，有辅助治疗作用，提高治疗效果；因此在维吾尔医临床上得以广泛发的应用[3]。本研究通过分别观察沉液质调节剂与血液质调节剂组对正常大鼠肝脏能量代谢相关因子的影响，分析它们的作用趋势和特点，为维药调节疗法及用药提供理论依据，为调节剂的研究打下基础。

1 实验材料

1.1 试验药物

1.1.1 沉液质调节剂制备

分别取牛舌草、水龙骨、破布木果、薰衣草、西青果、香青兰、天山堇菜、刺糖等药材(药材均由新疆维吾尔自治区自治区维吾尔医医院草药房提供，在新疆维吾尔自治区维吾尔医医院药学实验室制备)，加适量水加热，于60～70℃浸泡4 小时，滤过；药渣加水煎煮1 小时，同时收集蒸馏液300mL，煎液滤过，与上述浸液合并，静置，滤过，滤液浓缩至适量，加入蔗糖和防腐剂适量，加热使溶解，放冷，加入上述蒸馏液，并加水调至1000mL，搅匀，即得。

1.1.2 血液质调节剂制备

分别取诃子、毛诃子、余甘子药材(药材均由新疆维吾尔自治区自治区维吾尔医医院草药房提供，在新疆维吾尔自治区维吾尔医医院药学实验室制备)，以1：1：1 剂量比配制成血液质调节剂组合方，加入10 倍量水，浸泡60min，回流提取60min，倒出药液，残渣再加入8 倍水，回流提取60min。合并2 次药液，过滤、浓缩后成1.0g 生药量/L,-20℃放置备用，用前稀释成相应的浓度。

1.2 实验试剂及仪器

Na+-K+ATP 酶、Ca2+-Mg2+ATP 酶、琥珀酸脱氢酶(SDH)、肝糖原(HG)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)和促甲状腺激素(TSH)均为武汉基因美生物技术公司提供的批号为201903 试剂盒。

由美国塞默飞世尔(Thermo)科技有限公司出厂的超低温冰箱、台式高速离心机和移液枪；美国伯乐公司出厂的低温离心机、酶标仪和荧光定量PCR 仪；枪头、美国Axygen 公司出厂的无酶EP 管和八连拍；美国Scotsman 公司出厂的AF100型制冰机；上海医用恒温设备厂出厂的恒温箱；上海精博器材公司出厂的组织匀浆机。

1.3 实验动物

实验所使用的SD 大鼠均由新疆医科大学动物实验中心提供，许可证号：SCXK(新)2003-2001。30 只2 月龄的SD 大鼠，均为雄性，体重(222.00±17.89)g、所有实验动物实验开始前3d，在实验温室环境(21±3)℃下进行常规的适应性饲养。

2 实验方法

2.1 动物分组及给药

动物在实验室适应性喂养3d，30 只大鼠随机分成3 组，即：空白对照组、沉液质调节剂组、血液质调节剂组，每组10只。动物实验室环境为SPF 级，按昼夜节律自然照明，室温22～26℃，相对湿度40%～70%CRH。

沉液质调节剂组与血液质调节剂组动物均按《中华人民共和国药典》2010 版成人临床用量换算成大鼠用药量，成人用药量乘以0.018，再乘5 倍，灌胃容积为10mL·kg-1·d-1的量进行连续灌胃给药30d，空白组给予相等容积的生理盐水。

2.2 指标检测

禁食、不禁水12h，腹腔注射0.6 mL 2%戊巴比妥钠进行麻醉，取出肝脏，称重后准确称量一定量肝组织，按重量体积比加9 倍生理盐水，制成10%的匀浆，以1500r/min 离心10 min，收集上清液，严格按照相应试剂盒说明书采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)进行肝组织Na+-K+-ATP 酶、Ca2+-Mg2+-ATP 酶以及琥珀酸脱氢酶(SDH)活性、肝糖原(HG)含量及血浆三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)、促甲状腺激素(TSH)含量的检测。

3 统计学处理

数据用SPSS 21.0 统计软件进行统计学分析。计量资料的描述采用均数±标准差(±s)表示，计量资料如服从正态分布采用t检验，不服从正态分布采用秩和检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

4 结果

4.1 对Na+- K+ ATP 酶、Ca2+-Mg2+ ATP 酶、SDH 活力及肝糖原的影响

与空白组比较，沉液质调节剂组、血液质调节剂组Na+-K+ATP 酶、Ca2+-Mg2+ATP 酶、SDH 活力及肝糖原均明显升高，有显著差异(P＜0.05)；沉液质调节剂组与血液质调节机组比较，Na+- K+ATP 酶、Ca2+-Mg2+ATP 酶、SDH 活力及肝糖原均升高，有显著差异(P＜0.05)，其中Na+- K+ATP 酶、肝糖原差异更明显(P＜0.01)；(见图1)。

4.2 对血清T3、T4、TSH 的影响

与空白组比较，沉液质调节剂组血清T3、T4、TSH 水平明显升高，有显著差异(P＜0.05)；而血液质调节剂组没有明显变化；沉液质与血液质调节剂组比较，T3、T4、TSH 均有显著差异(P＜0.05)；(见图2)。

图1

图2

5 讨论

线粒体是能量代谢的重要场所，食物被消化后进入细胞，被分解成所需要的分子，进入线粒体进行三羧酸循环，然后转化成线粒体电子传递链所需要的底物，促进线粒体的呼吸并合成 ATP[4]。细胞膜上的ATP 酶被称为离子泵，参与细胞的逆浓度梯度的主动运输，且酶的活性与转运强度成正比。当Na+-K+ATP 酶和Ca2+-Mg2+ATP 酶的活性降低时，会使细胞内的Na+和Ca2+的外排减少，从而导致Na+和Ca2+大量积聚在细胞内，生物膜上的跨膜转运的平衡被打破，造成肝细胞的转运功能失常，毒素的外排和物质的交换受到影响，肝细胞受损[5-6]。本实验研究结果显示：沉液质调节剂与血液质调节剂均提高Na+- K+ATP 酶、Ca2+-Mg2+ATP 酶、SDH 活力及肌糖，提高肝脏的能量代谢，防止多余的Na+和Ca2+聚集在细胞内日，从而加快肝脏物质交换，使毒素体外保护肝脏，沉液质调节剂与血液质调节也存在明显的差异，沉液质调节剂的作用效果更为明显。

甲状腺激素水平的增加也会刺激其他组织器官，如肌肉、肝脏和心脏的线粒体生物合成[7]，甲状腺素T3、T4 主要是调节物质代谢，T3、T4 能促进体内绝大多数组织细胞内的物质氧化，提高耗氧率，增加产热，使基础代谢增高，体温升高，食欲增加等[8]，促甲状腺激素TSH 是垂体前叶分泌的一种糖蛋白激素，甲状腺激素的合成及分泌由促甲状腺激素(TSH)和交感神经双重机制调节，因此TSH 水平能反应甲状腺的功能状态[9-10]。结果表示：沉液质调节剂组血清T3、T4、TSH 水平明显升高，有显著差异(P＜0.05)；与血液质调节剂组比较，T3、T4、TSH 也均有显著差异(P＜0.05)；说明沉液质调节剂除了能加快肝脏能量代谢，也能明显的提高甲状腺水平。这证实了沉液质调节剂与血液质调节剂在临床上的应用价值，也为以后的维吾尔医的成熟疗法及清除疗法奠定了基础。