2016—2018年梅州地区3610例男性不育患者精液质量分析

孙丛萌,罗 兰

梅州市妇幼保健计划生育服务中心生殖中心，广东 梅州 514021

男性不育症是指夫妇婚后同居未避孕1年以上而未育，由男方原因引起的称为男性不育。现如今已婚夫妇的不育率约15%，其中由男性引起的不育约为50%，且呈逐渐上升趋势。精液质量分析是评价男性不育的基本指标；其中精液量、圆细胞、精子浓度、前向运动精子（PR）、精子正常形态率、精子存活率、畸形精子指数（TZI）等参数是评估精液质量的重要指标，对科学有效的治疗男性不育症具有重要意义。本研究通过对全面放开二胎政策后3 610例男性不育患者精液进行质量分析，精子形态学评估，探讨梅州地区男性不育患者精液质量现状，以及这些检测项目在男性不育诊断的应用价值。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年1月—2018年12月期间来梅州市妇幼保健计划生育服务中心生殖中心就诊的男性患者3 610例，年龄19～65岁，平均年龄（33.1±6.3）岁，纳入标准：主诉夫妇婚后同居未避孕1年以上未育，体检未发现明显睾丸、附睾、输精管异常，均无性功能障碍史，无泌尿生殖道感染、性传播疾病和腮腺炎性睾丸炎的病史，无外伤及遗传性疾病家族史。

1.2 方法

（1）严格按照WHO第五版《人类精液检查与处理实验室手册》标准所有检测者禁欲2～7天手淫法采集精液标本。精液射入已证实对精子无毒性的、预先称重的无菌痰杯，标记上其姓名和编码。记录获取精液时间、颜色、禁欲时间，电子称量取体积，采用广泛精密试纸测定PH值。（2）精液采用计算机精液分析系统进行辅助分析（CASA），分析精子浓度、精子活力等参数。精液质量分析标准按照WHO第五版《人类精液检查与处理实验室手册》作为精子质量分析的参考标准：精液体积≥1.5 m l；精液PH≥7.2；精子浓度≥15×106/m l；PR≥32%；精子存活率≥58%。以上指标均符合者界定为正常。（3）精子形态学分析。洗涤精子，将0.5 ml精液加10 ml生理盐水中稀释，800 g离心10分钟，使用拉薄技术，将5～10 ul精子混悬液均匀涂在载玻片上。采用巴氏染色法，严格按照WHO第五版《人类精液检查与处理实验室手册》标准进行精子形态学的分类，通过光学显微镜观察精子包括头、颈、中段、主段和末段，每张涂片至少评估200个精子。

1.3 统计学方法

采用SPSS 20.0软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验，多组间比较采用方差分析；计数资料以例数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验，以α=0.05为检验水准，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3610例精液质量分析结果正异常均值分析

在梅州地区3 610例男性不育患者精液质量分析结果中，精液质量分析正常组473例，占比13.1%，年龄均值为32.71岁；精液分析异常组3 137例，占比86.9%，年龄均值为33.11岁，两组间的年龄差值差异无统计学意义（t=1.36，P＞0.05）。正常组和异常组在各精液质量结果的比较中，异常组的精液量呈显著减少（t=2.63，P＜0.05），而精子浓度、 PR、精子正常形态率和存活率等指标呈显著下降趋势（t=4.37、t=21.98、t=26.15、t=9.50，P＜0.01），TZI显著上升(t=15.27，P＜0.05)，见表1。

2.2 3137例精液质量结果异常率分析

3 137例异常精液质量分析结果中，除去重度（＜2.0×106）少精子症76例和无精子症55例，其主要异常表现为精子正常形态率异常，占68.34%，其次为PR精子数＜32%的占23.69%、精子总数＜39×106的占15.59%、精子浓度＜15×106/ml的占14.92%、精子存活率＜58%的占13.48%、精液量异常为11.57%和TZI异常为10.77%，见表2。

2.3 圆细胞正异常组精液质量均值结果对比分析

3610例精液质量分析结果中，圆细胞≥1.0×106/m l的715例，占比19.8%，除去重度（＜2.0×106）少精子症76例和无精子症55例，在精液圆细胞≥1.0×106/m l（异常组）与圆细胞＜1.0×106/m l（正常组）两组精液质量分析结果比较中，圆细胞＞1.0×106/m l的精液量、精子正常形态率、PR、精子存活率明显下降和TZI异常率显著升高，差异有统计学意义（t=6.86、t=9.13、t=5.84、t=4.51，P＜0.05）；而两组精子浓度差异无统计学意义（t=1.48，P＞0.05），见表3。

2.4 3610例精液质量结果不同年龄段分析

不同年龄组的精液质量分析结果显示，精液量明显减少的有＞40岁年龄组(t=5.52，P＜0.05)，精子浓度明显减少的为≤25岁年龄组(t=2.73，P＜0.01)；PR精子数与精子存活率按年龄梯度呈下降趋势，其中≤35岁的PR精子数在总体的平均PR精子数之上，＞35岁的PR精子数低于总体均值；而精子正常形态率则呈反向趋势，年龄组越大，平均值越高，≤30岁的精子正常形态率低于总体均值；TZI在＞40岁年龄组中体现最明显，明显高于总体平均值，见表4。

2.5 不同年龄组结果异常率对比分析

＞40岁年龄组患者与其他各年龄组相比精液异常率较高。对样本进行统计学分析，各年龄组之间差异无统计学意义（χ2=4.27，P＞0.05），见表5。

3 讨论

随着生活环境污染加剧，工作压力增加，个人不良生活习惯等因素，不孕不育的发生率呈逐渐上升，据资料统计，现如今已婚夫妇的不育率约15%，其中由男性引起的不育约为50%，且呈逐渐上升趋势[1]。随着国家二胎政策放开，男性的精子检测，对优生优育也由为重要。精液质量分析作为评价男性不育症的基本诊治指标。本文的3 610例男性不育精液标本中，精液质量分析异常率占86.9%，这与兰州地区88.5%的[2]数据相近，比全国多中心调查报告的平均水平要高（57.7%，2003年）[3]。在3 610例精液质量分析结果中，精子浓度异常率为14.35%和精子毛细管穿透试验的异常率为8.86%。无精子症55例，占1.52%；重度少精子症（精子浓度＜5.0×106/ml）126例，占3.49%；其中无精子症和重度少精子症的主要年龄段分布为25～30岁。精液不液化的有130例，占3.60%；精液量均值为3.2 m l，＜1.5 m l的有363例，占10.06%。在3 137例异常精液质量分析结果中，主要的异常表现为形态学异常1 987例，占63.34%，其次为PR精子数，异常数为743例，异常率为23.69%；第三是精子总数异常，异常数为489例，异常率为15.59%。与张圣杰[4]的研究结果有所不同，本研究表明精子畸形率上升是本地区引起男性不育的主要因素，这可能与我中心遵从Tygerberg的严格标准对精子形态学进行定义有关，有文献表明精子形态率与体外受精妊娠率呈正相关[5]。圆细胞≥1.0×106/ml有715例，占19.81%，而白细胞过氧化物酶阳性有283例，占总数的7.84%，阳性率为39.58%，本研究认为精液圆细胞增多，可能与睾丸受损或者男性生殖道感染有关，与精子质量下降呈正相关[6]；不同年龄组精液质量分析全年龄段的平均年龄为33.05岁，其中大于45岁有109例，占3.02%；小于20岁1例，占0.03%；检查人群主要分布为25～40岁，占67.5%。≤25岁年龄组的精液分析各项参数异常较明显，尤其体现在浓度和精子正常形态率结果均低于总体均值，但是PR精子总数和精子存活率高于其他年龄组，可能与其个人生活不良习惯相关，年龄上占优势，故活力等情况较好，＞40岁年龄组的异常率明显增高，精液量减少较为明显，PR精子总数和精子存活率明显低于其他各个年龄组，在精子正常形态率结果高于总体均值的情况下TZI值高于其他年龄组，精子中段和尾段的异常应该明显高于其他年龄组，这在一定程度上也印证了精子活力低于其他年龄组，还原了精子质量随年龄的增长逐渐下降，与低生育率呈正相关。不同年龄组异常率分析认为，没有显著性差异，与赣西地区的[7]结果存在差异，可能与本地区是世界长寿之乡，生态环境好相关。

表1 3610例精液质量分析结果正异常均值分析

表2 3137例精液质量结果异常率分析

表3 圆细胞正异常组精液质量均值结果对比分析

表4 3610例精液质量结果不同年龄段分析（±s）

表4 3610例精液质量结果不同年龄段分析（±s）

项目年龄（岁）精液量（ml）浓度（×106/m l）PR(%)存活率(%)正常形态率(%)TZI≤25岁23.8±1.9 3.2±1.5 63.9±46.7 47.1±17.0 76.4±24.6 2.8±2.9 1.35±0.36＞25～≤30岁28.0±1.6 3.3±1.5 69.3±57.5 45.5±18.0 74.2±24.9 3.3±2.9 1.35±0.36＞30～≤35岁32.7±1.8 3.3±1.5 76.4±59.4 45.1±18.8 74.5±24.7 3.5±0.4 1.34±0.37＞35～≤40岁37.9±2.1 3.2±1.5 71.7±58.0 42.9±17.3 72.2±21.4 3.6±2.9 1.36±0.30＞40岁44.0±3.6 2.9±1.4 74.8±57.8 37.3±17.3 67.6±24.4 3.7±3.0 1.40±0.34

表5 不同年龄组结果异常率对比分析

综上所述，梅州地区不育男性精液质量现状主要表现为精子形态学异常率升高，其次为PR精子数和精子存活率下降。随着近几年来人工授精、体外受精-胚胎移植技术的成熟，更多的精子功能检测项目（精子顶体酶、精子DNA碎片率等）应用于临床诊治；男性随着年龄的增长，精子质量下降，因男性患者精液质量检查较女性不孕症患者检查简便易行，建议本地区不孕不育患者就诊时男性患者首先进行精液检查，探寻不孕不育因素，进行科学有效的不孕不育治疗，提高妊娠率。