2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病患者血浆中Prx5的表达水平及意义

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种除外乙醇及其他明确病因的肝损伤因素所引起的，以弥漫性肝细胞大泡样脂肪变性为特征的疾病[1-2]。近年来，随着人们生活方式及饮食结构的改变，高糖高脂饮食模式较普遍，导致NAFLD的发病率逐年攀升，且发病趋于年轻化[3]。据流行病学调查显示，NAFLD在中国的发病率为1%～30%，已成为常见的慢性肝病之一[4]。2型糖尿病(T2DM)易并发NAFLD，对于NAFLD目前临床上尚无理想的治疗方式。因此，探寻T2DM并发NAFLD的早期生物学标志物的意义重大。有研究显示，过氧化物酶5(Prx5)可通过调节活性氧的生成和成脂基因的表达来抑制脂肪生成[5]，但关于其与T2DM并发NAFLD的关系的报道较少。本文就此开展研究，以期阐明Prx5是否参与了T2DM并发NAFLD的过程。

1 资料与方法

1.1 一般资料

前瞻性选取2018年8月至2019年8月在胜利石油管理局临盘医院确诊的187例T2DM患者作为研究对象。根据是否合并NAFLD将患者分为两组：T2DM合并NAFLD组119例(设为A组)和T2DM组68例(设为B组)。参照《中国2型糖尿病防治指南(2017年版)》[6]诊断T2DM，参照《非酒精性脂肪性肝病诊疗指南(2010年1月修订)》[7]诊断NAFLD。纳入标准：(1)患者年龄>18岁；(2)接受肝部超声或CT检查。排除标准：(1)1型糖尿病或妊娠糖尿病患者；(2)病毒性肝炎或自身免疫性肝炎患者；(3)药物性或酒精性肝损伤者；(4)合并严重心、肝、肾等脏器功能障碍者；(5)合并血液系统疾病者；(6)合并神经系统疾病者；(7)合并恶性肿瘤者。A组中男性84例，女性35例，平均年龄为(42.36±6.87)岁；B组中男性42例，女性26例，平均年龄为(43.55±5.97)岁。两组受试者均签署了知情同意书。本研究经本院医学伦理委员会批准(编号LP20180147)。

1.2 收集临床基本资料

收集所有患者的年龄、性别、体质指数(BMI)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、肝脏超声结果及疾病史等信息。计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)，公式为：HOMA-IR=FPG(mmol/L)×FINS(mIU/L)/22.5。

1.3 指标检测方法

抽取所有患者肘部空腹静脉血10 mL，室温下3 500 r/min离心15 min，提取上清液，-20 ℃冰箱内保存，待验。采用酶联免疫吸附法检测血浆Prx5水平，试剂盒购自USCN Life Science公司。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 两组基本资料的比较

两组患者在年龄、性别、FPG、TC方面比较，差异无统计学意义(P>0.05)。A组的BMI、FINS、HOMA-IR和TG水平高于B组，而LDL-C、HDL-C和Prx5水平低于B组，差异均有统计学意义(P均<0.05)。见表1。

表1 两组基本资料比较

2.2 Prx5与BMI及血清学指标的关系

Prx5与BMI、FINS、HOMA-IR、TG和LDL-C均呈负相关关系(r=-0.453，P<0.001；r=-0.378，P<0.001；r=-0.453，P<0.001；r=-0.532，P<0.001；r=-0.321，P=0.003)，与HDL-C呈正相关关系(r=0.648，P<0.001)，与FPG和TC无相关性(r=-0.042，P=0.593；r=-0.027，P=0.784)。

2.3 T2DM并发NAFLD的影响因素分析

将可能影响T2DM并发NAFLD的相关因素BMI、FINS、HOMA-IR、TG、LDL-C、HDL-C和Prx5作为自变量(纳入标准α≤0.1)，将T2DM是否并发NAFLD作为因变量纳入多因素Logistic回归分析。结果显示，BMI、FINS、HOMA-IR、LDL-C和Prx5与T2DM并发NAFLD密切相关(P<0.05)。见表2。

2.4 T2DM并发NAFLD的模型构建

采用Logistic回归分析构建BMI、FINS、HOMA-IR、LDL-C和Prx5联合诊断T2DM并发NAFLD的模型(将其命名为模型A)，F=-0.953+0.022×BMI+0.089×FINS+1.502×HOMA-IR+4.978×LDL-C-0.363×Prx5。Prx5诊断T2DM并发NAFLD的效能低于模型A(Z=2.286，P=0.022)。见表3和图1。

表2 影响T2DM并发NAFLD的多因素Logistic回归分析

表3 Prx5和模型A诊断T2DM并发NAFLD的效能比较

图1 Prx5和模型A诊断T2DM并发NAFLD的ROC曲线

3 讨论

NAFLD是中国常见的慢性肝病之一，若病情未能及时控制，易发展为肝硬化、肝细胞癌，甚至导致患者死亡[8-9]。目前关于NAFLD的发病机制尚未阐明，多数学者认为其与“二次打击”学说有关：一方面，由于机体肥胖，存在脂代谢紊乱和胰岛素抵抗，作为初次打击诱发脂肪变性，促进NAFLD形成[10-11]；另一方面，NAFLD形成后，脂质氧化产物增多，氧化应激损伤作为“第二次打击”，可诱发脂肪变性的肝细胞发生炎性反应、坏死、纤维化等，导致形成脂肪性肝炎、肝硬化[12]。T2DM患者伴有肥胖、胰岛素抵抗和糖脂代谢紊乱等，易并发NAFLD[13]。

Prx属于半胱氨酸依赖性过氧化物酶，可清除机体内的过氧化物及过氧化亚硝酸盐[14]。Prx共有6个亚型，Prx5作为其中一员，已成为近年来的研究热点[15]。有报道指出，Prx5可有效去除胞浆及线粒体内活性氧物质[16-17]，可以改善HepG2细胞中游离脂肪酸诱导的活性氧物质的增多及脂质堆积[18]。基于上述研究，推测Prx5可能参与了T2DM并发NAFLD的过程及疾病进展。

本研究通过比较两组患者血浆Prx5的水平，发现A组血浆Prx5水平低于B组，提示Prx5可能与T2DM并发NAFLD有关。本研究结果显示，Prx5与BMI、FINS、HOMA-IR、TG和LDL-C均呈负相关关系，与HDL-C呈正相关关系，提示Prx5可能通过调控FINS、TG和LDL-C参与T2DM并发NAFLD的过程，但其具体病理生理学机制仍有待进一步研究证实。本研究采用多因素Logistic回归方法分析影响T2DM并发NAFLD的相关因素，结果显示BMI、FINS、HOMA-IR、LDL-C和Prx5与T2DM并发NAFLD密切相关。本研究构建了用于诊断T2DM并发NAFLD的模型，结果显示该模型诊断T2DM并发NAFLD的效能高于Prx5单独诊断。

综上所述，T2DM并发NAFLD患者血浆中Prx5的水平低于T2DM患者，检测血浆Prx5水平有助于判断T2DM是否并发NAFLD。此外，本研究尚存在一定不足，研究样本量偏小，且为单中心研究，下一步将开展多中心、大样本研究，验证模型A诊断T2DM并发NAFLD的效能，同时开展基础研究探究Prx5参与T2DM并发NAFLD的病理生理学机制，以期为预防T2DM并发NAFLD提供理论参考。