单宁酸对断奶仔猪生长性能、血液生化指标和粪便菌群的影响

薛瑞婷，李 栋

（吕梁学院，山西吕梁 033000）

单宁是一组多酚类化合物，可分为水解单宁和不水解单宁浓缩单宁。可水解的单宁以碳水化合物为中心的核心，其羟基被酯化为酚羧酸，如没食子酸和六羟基二苯酸（石闪闪和何国庆，2012）。没食子酸酯被称为没食子安宁素，单宁酸是一种五倍子鞣质，每分子葡萄糖中含有8～10个没食子酸分子。浓缩单宁是黄烷-3-醇、黄烷-4-二醇或相关黄烷醇残基的聚合物，通过碳-碳键连接，但浓缩单宁没有碳水化合物核心（Marzo等，2002）。单宁酸广泛分布于植物界，如大麦、高粱、油菜籽、小米和蚕豆的单宁含量特别丰富，主要以浓缩单宁的形式存在。许多抗营养的作用被认为是由于水解和浓缩单宁的缘故。以前的研究表明，单宁对动物生长性能的影响是通过使用从饲料中分离的单宁或与商业单宁类添加剂一起进行的（Marzo等，2002）。单宁酸对非反刍动物饲料的适口性、饲料效率、生长速度、营养物质消化率及内源性矿物质和氨基酸损失增加的影响已由Jansman（1993）进行了广泛的综述。单宁在体外对致病菌具有抑菌和杀菌特性，包括大肠杆菌、沙门氏菌和梭菌。但关于单宁酸对体内肠道菌群数量影响的研究尚不多见。因此，我们推测饲料中添加单宁酸可能会影响断奶仔猪肠道菌群、血液生化指标和生长性能。

1 材料与方法

1.1 试验分组与饲养管理 试验选择360头（21±3）d断奶的杜×长×大公猪，平均体重为（6.48±0.65）kg，随机分为 5组，每组4个重复，每个重复18头猪。对照组饲喂基础日粮，处理组在基础日粮中分别添加120、240、480和960 mg/kg单宁酸，试验为期28 d。断奶后仔猪在试验1～14 d和15～28 d的饲料配方见表1。

1.2 样品采集与分析 试验期间每隔7 d对每个重复的仔猪进行称重，并按周统计饲料用量。根据这些数据，计算1～14 d、15～28 d和1～28 d仔猪的平均日增重、平均日采食量和饲料报酬。每个重复选择2头猪取新鲜粪便样本（14和28 d），称重后用含0.05%半胱氨酸的无菌PBS悬液浸泡，用于好氧微生物种群计数。对于厌氧微生物的计数，粪便样品在CO2流动下转移，在厌氧条件下运输到实验室。另外，在试验最后3 d，每个重复选择2头仔猪粪便，用于分析微量元素含量（原子吸收光谱法）。采用颈静脉穿刺法定期（7、14、21和28 d）从每个重复随机抽取2头猪的血液，其中一部分血液用于血液学指标分析（红细胞、白细胞数量、血红蛋白浓度、平均血红蛋白浓度和血球容积）。另外一部分血液离心后分离血浆，用于测定血浆铁含量（试剂盒法）。

1.3 统计分析 使用SAS软件的一般线性模型程序，通过回归分析比较日粮单宁酸浓度对各指标的影响。以重复为单位，对所有参数进行分析。P＜0.05表示差异显著，0.05＜P＜0.10表示有差异显著趋势。

表1 试验基础日粮原料及营养水平

2 结果与分析

2.1 单宁酸对1～28 d断奶仔猪生长性能的影响 由表2可知，日粮的铁含量从190 mg/kg～205 mg/kg不等。在试验第0～14天内，日粮中单宁酸浓度从0～480 mg/kg增加，导致断奶仔猪平均日增重和平均日采食量呈显著线性降低（P＜0.05），而单宁酸浓度从0升高至240 mg/kg时，断奶仔猪饲料报酬表现为显著线性降低（P＜0.05）。日粮单宁酸浓度对15～28 d断奶仔猪的生长性能无显著影响（P＞0.05）。在整个试验期间（1～28 d），随着日粮单宁酸添加水平的升高，日增重和饲料报酬表现为显著线性降低（P＜0.05），而平均日采食有显著降低的趋势（P=0.09）。

表2 单宁酸对断奶仔猪生长性能的影响

2.2 单宁酸对1～28 d断奶仔猪粪中微量元素及血浆铁水平的影响 日粮单宁酸添加水平对断奶仔猪14和28 d粪中总厌氧菌、双歧杆菌、乳酸菌和梭状芽胞杆菌数量无显著影响（P＞0.05）。但随着日粮单宁酸添加水平的升高，大肠杆菌数量表现为显著线性降低（P＜0.05，数据未列出）。由表3可知，随着日粮单宁酸添加水平的升高，粪中锰、铜和锌的含量无显著差异（P＞0.05），但粪中铁含量随日粮单宁酸添加水平的升高表现为显著线性升高（P＜0.05）。在第7、14和28天，断奶仔猪血浆铁浓度与日粮相当，但第21天，日粮补充单宁酸后血浆铁浓度显著降低（P＜0.05），同时在14 d时，单宁酸组血浆铁浓度有降低趋势（P=0.09）。

表3 单宁酸对断奶仔猪粪中微量元素及血浆铁含量的影响

2.3 单宁酸对1～28 d断奶仔猪血液学状态的影响 由表4可知，在试验的第7和14天，日粮处理对血液学指标（如红细胞和白细胞计数、血红蛋白浓度、平均血红蛋白浓度及血球容积）无显著影响（P＞0.05）。随着日粮单宁酸添加水平的升高，21和28 d血浆血红蛋白和血球容积表现为显著线性降低（P＜0.05）。

3 讨论

本研究中使用的微量矿物预混料是在不含任何铁元素的情况下制备的。尽管如此，所分析的日粮中铁浓度为190～205 mg/kg，这是因为大多数饲料成分（包括磷酸氢钙和石粉）含铁量较高。日粮添加单宁酸使日增重分别降低2%、21%、28%和25%，与对照组相比，其采食量减少0.4%、9%、16%和15%。众所周知，单宁酸有一种苦味或涩味，会降低适口性，从而降低饲料采食量。Monteleone等（2004）在人身上研究了单宁酸的涩味强度评级，报告称，单宁酸浓度从0.32 g/L增加到1.63 g/L，感知到的涩味强度急剧增加。本研究结果表明，单宁酸可能只降低断奶后前期（1～14 d）仔猪的适口性，而在15～28 d猪可能适应了日粮中的单宁酸的存在。

断奶时仔猪受到各种应激，这也是导致肠道微生物波动的原因。Akiyama等（2001）发现，从绿茶中提取的单宁酸可以有效减少有害细菌数量，增加猪乳酸菌数量。单宁酸与铁的结合使铁无法被吸收，这解释了单宁酸日粮组猪粪便中铁排泄量升高的原因。但由于添加了单宁酸，猪日粮中锰、铜锌含量影响不受显著。试验结束时，日粮中添加单宁酸对粪大肠菌群没有显著影响，目前这种作用的原因尚不清楚，但这可能是由于微生物在胃肠道中降解了单宁酸。

表4 单宁酸对断奶仔猪血液生化指标的影响

各项血液学指标均在正常范围内。直到第14天，在猪饲料中添加单宁酸对血液指标和血浆铁值无显著影响。血红蛋白浓度在8.0 g/dL时被认为是边缘性贫血，而7.0 g/dL或更低是贫血的指标。试验第7天血红蛋白水平为13.6 g/dL，而第21天，饲喂960 mg/kg单宁酸组猪的血红蛋白水平低于边缘性贫血的阈值水平，这与Afsana等（2004）的研究结果一致。补充单宁酸组的猪血液指标和血浆铁含量较低，可能与单宁酸与铁的相互作用有关。单宁酸含有8个没食子酸分子，而每个没食子酸分子有1个没食子醇基，这些基团与铁具有高亲和力，从而阻止铁从肠道吸收（Torrallardona等，2003）。

4 结论

日粮中添加单宁酸对猪生产性能、血液学指标和血浆铁状态有一定的负面影响。此外，单宁酸仅在第14天对大肠杆菌有抗菌活性，但在第28天时无抗菌作用，很可能是由于单宁酸被降解。