丙型肝炎患者HCV RNA定量与基因分型的相关性

黄秀明， 利旭辉，肖春花，周伟泽

(广东省惠州市第三人民医院，广东 惠州 516000)

现阶段世界范围内，感染HCV的大约有1.7亿人。HCV感染可能会导致患者发生慢性丙型肝炎、肝癌以及肝硬化[1]。HCV主要有6个基因型以及不同亚型，在美国、欧洲以及亚太地区中，直接抗病毒药物治疗(DAA药物治疗)已经成为丙型肝炎患者的抗病毒治疗首选方案。HCV RNA载量对病毒的复制程度以及患者的疾病变化情况有直接的反应，并且该指标属于诊断丙型肝炎以及对抗病毒疗效进行衡量的一项重要指标[2]。基于此，对HCV基因型以及各型HCV RNA载量之间的相关性进行研究具有重要临床意义。本研究中，针对丙型肝炎患者HCV RNA定量与基因分型的相关性展开了分析。现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料：收集2016年1月～2019年1月我院的300份丙型肝炎患者HCV RNA定量阳性标本，收集标本之后将其放置于-70 ℃进行冷冻储存等待检验。

1.2方法

1.2.1HCV RNA检测：抗-HCV复测结果呈阳性的标本进行HCV RNA检测，采用实时荧光定量PCR法进行检测，试剂盒的检测下限应设置为500 IU/ml，试剂批号为20180711，20180912；20181121，同时对质控品进行检测。

1.2.2丙型肝炎基因型检测：针对检测出HCV RNA高于下限的标本，采用针对HCV5'非编码区的特异性引物实施逆转录以及套式PCR扩增，给予扩增产物进行凝胶电泳检测，溴化乙锭染色之后，将其放置于紫外灯下进行观察，HCV1b型：144bp；HCV2a型：174bp；HCV2b型：123bp。

2 结果

2.1基因分型结果：300份标本中，共检测出三种单基因型，分别是1b、2a、2b，一种混合感染形式为1b/2a，11例未分型。其中174份HCV1b型，占比58%；70份2a型，占比23.33%；8例2b型，占比2.67%；4例1b/2a混合型，占比1.33%；44例6a型，占比14.67%。

2.2不同基因型间HCV RNA载量的分析：对285例HCV单基因型患者的基因型与首次血清病毒RNA定量进行单因素方差分析，最终得出的结果显示基因型与HCV RNA定量之间存在显著统计学差异，1b型的丙型肝炎病毒RNA拷贝数明显高于2a型以及2b型。见表1。

表1 不同基因型的患者抗体浓度对比以及患者HCV RNA载量对比[中位数(95%CI)]

基因型例数HCV RNA(x±s,kIU/L)1b2076.12±0.832a706.14±0.572b85.61±0.971b/2a46.61±0.63F值3.382P值0.001

3 讨论

HCV是一种单股线性正链RNA病毒，该病毒的基因组序列具有高度的变异性[3]。根据数据统计可知，大约有1.7亿人患有慢性丙肝，并且存在继发肝癌的风险[4]。患者对丙型肝性病毒的反应从而产生的抗体，是筛查HCV感染时最主要的一项标志物，但是其中存在一项较为突出的问题—假阳性，因此，需要采用病毒核酸扩增试验或是重组免疫印记实验对抗HCV阳性的标本进行确认，从而使标本检验结果存在假阳性的问题能够减少[5]。

HCV是黄疸病毒科肝炎病毒属的一项主要部分，其基因组主要是单股正链RNA，极易发生突变情况，当长期演变之后，会出现很多基因变异株。近几年来，丙型肝炎抗病毒药物发展迅速，在丙型肝炎的治疗史中，DAA是一项标志性事件，由于DAA药物在实际的应用过程中具有有效性高、便于服用以及全基因型覆盖的优势[6]，因此，已经得到了广泛的应用。丙型肝炎抗病毒治疗的治疗效果与患者的基因型之间存在一定的联系。根据2019年慢性丙型肝炎防治指南中，Ⅲ期临床试验1B型12周SVR为99%，2a型12周SVR为100%，3型为97%。

在本研究中，可以看到，检出HCV基因型主要是1b以及2a型，分别占比58.00%、23.33%。根据最终的分析结果可以得出，1b型的丙型肝炎病毒RNA拷贝数明显高于2a型以及2b型。由此可知，丙型肝炎患者在接受治疗之前，患者的HCV基因型与体内的病毒含量具有紧密联系，而这一因素也有可能对慢性丙型肝炎患者治疗情况以及预后情况产生影响。

综上所述，根据本研究中获得的标本分型结果分析可以得出，丙型肝炎患者抗-HCV水平与病毒基因型具有一定的相关性，但还需进行更多的研究对此结论进行证实。