1500 例婴幼儿先天性耳聋基因检测结果研究
2020-06-13吴慧李春红孟祥吉
吴慧,李春红,孟祥吉
(1.山东卫康医学检验有限公司,淄博市精准基因检测关键技术重点实验室,山东 淄博 255000;2.山东省遗传性疾病基因检测技术应用示范中心,山东 济南 250000)
0 引言
新生儿听力筛查时需采取早发现和早诊断等重要手段,但是目前有资料显示耳聋患者多为迟发性,在出生时并未表现出听力损失,因此单纯进行新生儿听力筛查具有一定局限性,联合耳聋基因分子筛查能够有效降低先天性耳聋发病率[1]。现阶段来看,人类基因组计划已经基本完成,加上日益完善的遗传病检测技术可显著预防先天性耳聋的发生。我国流行病学研究资料显示,聋人群体中的遗传性耳聋比例比较高,其中GJB2 基因、GJB3 基因、SrRNA 基因以及SLC26A4基因等是导致我国人群发生耳聋的重要致病因子[2]。有关研究资料显示,GJB2 基因突变会导致先天中重度感音神经性耳聋发生,SLC26A4 基因突变会导致大前庭水管综合征发生或先天性/后天性中重度感音神经性耳聋发生,GJB3 基因突变会导致后天高频感音神经性耳聋,SrRNA 基因突变会导致药物性耳聋情况发生[3]。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取本院(在2016 年2 月至2019 年2 月)出生的1500 例婴幼儿一般资料。1500 例婴幼儿中有792 例男、708 例女,平均年龄为(2.15±0.98)岁。在患儿家长知情下采集血液标本(1 mL~2 mL),采取本院自制问卷调查表调查患儿的基本资料(姓名、性别、年龄、家族有无耳聋病史等)。
1.2 方法
采用聚合酶链式扩增(扩增仪型号:美国公司生产的CFX96 型)反向点杂交法(采用恒温杂交仪以及遗传性耳聋基因检测试剂盒)检测1500 例婴幼儿的4 个基因。提取DNA 方法 首先裂解红细胞、再收集白细胞,最后通过变性液使得蛋白质变性,释放DNA,在高盐低pH 状态下利用DNA 吸附剂吸附DNA,再在低盐高pH 状态下溶解DNA。聚合酶链式扩增:取出反应液管、低速离心、做好标记,再加入已经提取的2uLDNA 检测标本,再进行聚合酶链式扩增。杂交与显色:在离心管中放置标有编号的膜条,加入杂交液以及聚合酶链式扩增产物;将离心管置入沸水中加热10 min,再放置恒温杂交仪中90 min;将膜条移送到预热后的50 mL 杂交液塑料管中,摇匀洗涤15 min;配置显色液、孵育液、杂交液,弃液体,将膜条置于杂交液中轻摇浸泡0.5 h,弃除孵育液,再用杂交液洗涤两次,每次5 min。
1.3 观察指标
分析聚合酶链式扩增反向点杂交法检测1500 例婴幼儿的4 个基因结果(根据膜条蓝色显色位点加以判断)。
1.4 统计学方法
资料分析采用SPSS 21.0 统计软件进行统计分析。计数资料用率或构成比表示,组间比较采用χ2检验或精确概率法。所有统计检验均为双侧概率检验,检验水准为0.05。
2 结果
1500 例婴幼儿中共检测出36 例基因携带者(占2.4%),其中有18 例GJB2 基因突变(占1.2%,18/1500)、10 例SLC26A4 基因突变(占0.7%,10/1500)、5 例GJB3 基因突变(占0.3%,5/1500)、3 例12SrRNA 基因突变(占0.2%,3/1500)。各组数据比较差异有统计学意义(P<0.05),见表1。
表1 分析1500 例婴幼儿先天性耳聋基因检测结果
3 讨论
有关研究显示,导致先天性耳聋发生的因素有:其一,遗传因素;其二,环境因素[4]。在遗传中,常见的致遗传性耳聋基因有:GJB2 基因、SLC26A4 基因、GJB3 基因、12SrRNA 基因等[5]。本文研究结果显示1500例婴幼儿中共检测出36例基因携带者(占2.4%),其中有18 例GJB2 基因突变(占1.2%,18/1500)、10 例SLC26A4 基因突变(占0.7%,10/1500)、5 例GJB3 基因突变(占0.3%,5/1500)、3 例12SrRNA基因突变(占0.2%,3/1500)。各组数据比较差异有统计学意义(P<0.05)。先天性耳聋是一种常见的出生缺陷,主要是因为母体在妊娠以及分娩过程中因遗传而导致听力受损。为了有效减少先天性耳聋婴幼儿的出生,早期诊断和早期干预是最为重要的方法。目前来看,筛查先天性耳聋手段以听力检查方式为主,根据新生儿的年龄选择合适的方法具有重要意义[6-7]。随着基因分子遗传学的研究日益深入,遗传因素对先天性耳聋的相关影响日益受到医学专家的高度重视,而采用基因检测手段具有重要意义。综上所述,1500 例婴幼儿先天性耳聋基因检测结果发现GJB2 基因突变为主[8-10]。