肺癌患者胸苷激酶1血清水平分析*

唐 鹏 彭定辉 陈 薇 胡汉宁

肺癌发病率逐年升高，对人类生命造成极大威胁[1]，故其早期诊断研究备受关注。胸苷激酶1(Thymidine Kinase1,TK-1)是细胞周期S期的依赖酶，参与DNA的合成，与细胞增殖密切相关[2]。国内外已有研究报道TK-1在多种肿瘤，包括肺癌、食管癌、胃癌、头颈部肿瘤及甲状腺恶性肿瘤中表达升高，且与临床分期、治疗反应及预后有一定相关性[3, 4]。目前，国内有关血清TK-1检测应用于肺癌临床诊断的研究尚处于早期阶段，本文回顾性分析在本院择期手术的肺癌患者血清TK-1表达水平及其临床诊断效能，为研究TK-1辅助诊断肺癌提供参考。

1 对象与方法

1.1 病例和分组

本研究经本院伦理委员会批准。选取2017-01—2018-03在本院心胸外科59例肺癌择期手术患者(肺癌组)。均经影像学诊断，术前未接受放疗、化疗，其中非小细胞肺癌患者57例(其中鳞癌15例，腺癌42例)，小细胞肺癌2例。排除合并肝癌、胃癌等恶性肿瘤及严重肝肾功能异常者。另选同期本院体检健康者30例作为对照组。两组性别、年龄及吸烟史等一般资料分布差异均无统计学意义(均P>0.05)，见表1。

表1 肺癌组和对照组一般资料比较

1.2 TK-1检测方法

肺癌组于入院后第3天，对照组同期，空腹抽取肘静脉血3ml，2 500r/min离心10min，分离血清，置于-20℃保存批检。血清TK-1测定采用ELISA试剂盒(深圳市安群生物工程有限公司)，严格按照说明书操作。用TK-1单克隆抗体包被微孔板制成固相抗体；在包被微孔板中加入含有TK-1的待测样本、TK-1 结合体及TK-1酶结合物，温育后充分洗涤，加入显色剂，终止反应后，在 450nm 处测 OD值(OD值随标本中TK-1浓度增加而升高)；根据校准品绘制的校准曲线计算TK-1含量。

1.3 统计学处理

2 结 果

2.1 肺癌组与对照组血清TK-1水平比较

肺癌组患者血清TK-1水平明显高于对照组(3.01± 2.11pmol/L vs 1.14±1.19pmol/L)，差异有统计学意义(t=4.51，P<0.01)，见图1。

图1 肺癌组与对照组血清TK-1水平散点图(*P<0.05)

2.2 肺鳞癌和肺腺癌患者血清TK-1水平比较

肺鳞癌患者血清TK-1水平明显高于肺腺癌患者(4.05± 2.45pmol/L vs 2.58±1.63pmol/L)，差异有统计学意义(t=-2.61，P<0.05)，见图2。

图2 肺腺癌与肺鳞癌的血清TK-1水平散点图(*P<0.05)

2.3 TK-1对肺癌的诊断效能评价

ROC曲线分析显示，当血清TK-1大于截点值1.86pmol/L时，对诊断肺癌的曲线下面积为0.798，敏感度为71.2%，特异度为83.3%，见图3。

3 讨 论

TK-1已被证实在增殖活跃的不同类型肿瘤患者血清中均有不同程度升高[5]。有关Meta分析表明TK-1水平可能作为肺癌生物学行为及预后的辅

图3 血清TK-1诊断肺癌的ROC曲线

助诊断标记物[6]。本研究中肺癌患者血清TK-1水平明显高于健康对照组，截点值>1.86pmol/L时，可以取得对肺癌最佳诊断效能。而且肺鳞癌患者血清TK-1水平较肺腺癌患者更高，与Shintani等人[4]的研究结果相一致。

有研究表明，血清TK-1对肺癌的诊断效能优于神经元特异烯醇化酶、癌胚抗原(Carcinoembryonic Antigen，CEA)、细胞角蛋白片段等，甚至比CEA、甲胎蛋白更敏感[7, 8]。还有研究认为联合使用TK-1和CEA、细胞角蛋白片段(CYFRA-1)可能提高非小细胞肺癌的早期诊断率[1, 9]。本文未行血清TK-1水平与常规肿瘤标志物水平的对比分析，今后的进一步研究将补齐这一分析结果，并探讨联合检测的最优方案。

但也有研究者提出TK-1不够特异。如但小苹等[10]报道血清TK-1水平在慢阻肺患者急性加重期也出现一定程度升高，原因可能与机体微环境剧烈变化有关。对此，至少需要纳入较多其它肺部良性病变进行观察分析，以进一步验证该指标的特异性。

总之，本文初步显示了血清TK-1作为肺癌的生物标志物，可能为肺癌的术前诊断或鉴别诊断提供参考。但本文作为一个单中心研究，且病例数较少，对照组样本与肺癌组也不一致，故其结果尚需多中心大样本以及高质量对照研究予以验证。

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