ELISA和金标法在新型冠状病毒肺炎诊断中的临床价值

黄圣勇，吴 燕，朱高琴，季佳雯，陆仁飞

（南通大学附属南通第三医院检验科，江苏226006）

新型冠状病毒肺炎（Corona Virus Disease 2019，COVID-19）是以肺部病变为主的新发传染病，可引起消化系统和神经系统的损伤，严重者可导致死亡[1]。对疑似病例的快速筛查以及确诊病例的早隔离、早治疗具有重要意义。本文选取2020 年1 月—2 月我院收治的COVID-19 确诊患者17 例，比较酶联免疫吸附试验（ELISA）和胶体金法检测IgM 和IgG 抗体的敏感度和特异度。

1 资料与方法

1.1 一般资料 COVID-19 感染确诊患者17 例为新冠确诊组，其中男性8 例，女性9 例，平均年龄51.6±13.6 岁。均符合国家卫健委发布的《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案（第六版）》标准，所有患者咽拭子样本经南通市疾病预防控制中心检测新型冠状病毒核酸检测阳性。另选30 例健康体检人群为正常对照组，其中男性12 例，女性18 例，平均年龄30.73±6.42 岁，均无新冠接触史，无发热、咳嗽、呼吸困难等临床症状。本研究经医院伦理委员会批准，所有受试者签署知情同意书。

1.2 检测方法 抽取两组受试者入院时静脉血2 mL，离心分离血清。采用ELISA 试剂盒（珠海丽珠试剂股份有限公司）和金标试剂盒（北京新兴四寰生物技术有限公司），由专业人员严格按照说明书操作，分别采用ELISA 法和胶体金免疫层析法检测血清新型冠状病毒IgG 抗体和IgM 抗体。ELISA 阳性判断标准为样本OD 值≥临界值，金标法阳性判断标准为观察窗口出现两条色带。

1.3 统计学处理 应用SPSS 20.0 统计学软件进行数据分析。计数资料以频数和率表示，组间比较采用χ2检验，一致性分析采用 Kappa 检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两种方法检测灵敏度和特异度 ELISA 法检测17 例COVID-19 患者单独IgG 抗体阳性3 例，单独IgM 抗体阳性3 例，二者共同阳性8 例，同时阴性3 例。ELISA 法检测IgG 抗体的灵敏度和特异度分别为64.7%和90.2%，检测IgM 抗体的灵敏度和特异度分别为64.7%和96.7%。ELISA 法检测IgG 抗体和IgM 抗体的灵敏度、特异度和符合率分别为64.7%、96.7%和85.1%。金标法检测新冠肺炎患者IgG 和IgM 抗体的灵敏度、特异度和符合率分别为58.8%、100%和85.1%。见表1。

表1 两种方法检测结果 例

2.2 两种方法检测一致性分析 ELISA 法检测2019-nCoV IgM 抗体与金标法结果一致的有10 例，不一致7 例，检测IgG 抗体与金标法结果一致的有14 例，不一致3 例。见表2。两种方法检测IgG 抗体和IgM 抗体的阳性率比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；ELISA 法与金标法检测 IgG 抗体的符合率均为82.3%，Kappa 系数为0.627，两者一致性一般；两种方法检测IgM 抗体的符合率为58.8%，Kappa 系数为0.131，两者一致性较差。

表2 两种方法检测2019-nCoV IgM 和IgG 抗体比较 例

3 讨 论

《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第七版）》推荐实时荧光RT-PCR 检测2019-nCoV 核酸阳性是疑似病例确诊的诊断条件之一，但该技术对实验场所及人员要求高，操作繁琐、耗时长，检测人员感染风险高，结果受标本质量、实验条件及人员操作等因素影响较大[2]。病毒感染部位，RNA 提取方法，试剂盒质量问题等也会影响检测结果[3]。单项核酸检测不能满足排查诊断COVID-19 的需求，也难以在各基层医院普遍开展。血清特异性抗体作为机体免疫系统抵抗病毒的重要反应，是另一重要的诊断证据。抗体检测简单便捷，对实验环境及人员要求不苛刻，仅需采集血液标本，很大程度上降低医护人员在标本采集和检测过程中被感染的风险，是快速筛查和核酸辅助诊断的重要手段[4]。

本研究结果显示，ELISA 法检测COVID-19 患者血清IgG 抗体灵敏度和特异度分别为64.7%和90.2%，检测IgM 抗体的灵敏度和特异度分别为64.7%和96.7%，基本能满足基层医院的检测需求。金标法灵敏度、特异度分别为58.8%和100%，其极高的特异度同样能满足基层医院的需求，健康对照组COVID-19 IgM 和IgG 抗体均未检测到阳性，因此金标法检测IgM 和IgG 对正常人群筛查，特别是对企业复工人员和入境人员的快速筛查具有重要意义。本研究中两种方法的灵敏度低于李泉等[5]化学发光法的96%，可能是由于ELISA 包被抗体的纯度不及化学发光法所用抗体，化学发光法检测限比较低，感染初期的低浓度抗体较容易检出。

综上所述，ELISA 和金标法检测新型冠状病毒IgG 抗体和IgM 抗体的特异度高，可用于疑似人群快速筛查，但二者符合率一般，建议联合检测。随着检测技术的不断改进，ELISA 法和金标法检测IgM和IgG 抗体有助于弥补核酸检测的不足，在COVID-19 的诊断和筛查中发挥重要作用[5]。