黄芪免煎颗粒与其传统饮片主要成分含量对比分析

倪晶莹 张慧霖 陈璟巧

福建省厦门市中医院 361000

中药黄芪[Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge]是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的根。其味甘，性微温；归脾、肺经。健脾补中、升阳举陷、益卫固表、利尿、托毒生肌，可谓补气要药。现代研究显示，黄芪化学成分主要含苷类、多糖、黄酮、氨基酸、微量元素等。而2015版《中国药典》规定，对黄芪的含量进行测定，以黄芪甲苷作为主要指标成分。可以说，无论是医生临证遣方抑或日常养生保健，黄芪都非常常用。但传统中药黄芪饮片煎煮时相较耗时费力，远行携带及服用亦有诸多不便。而作为新兴剂型的免煎颗粒，具有用量准确、携带方便、患者用药依从性高等优势，受到医生及患者的青睐。免煎颗粒黄芪能否代替传统饮片发挥疗效呢？本文对比分析黄芪免煎颗粒与其传统饮片，探究其主要成分含量与稳定性，具体如下。

1 材料与方法

1.1 仪器 高效液相色谱仪(型号：LC-2010AHT，厂家：日本岛津公司)，色谱柱(型号：C18，厂家：菲罗门科学仪器有限公司，4.6mm×250mm)。

1.2 药材 黄芪传统饮片(安国宏仁药业有限公司,批号：201905001-3)，黄芪免煎颗粒(江阴天江药业有限公司，批号：19071991)。

1.3 试剂 黄芪甲苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号110781-201616，纯度>97.4%)，色谱纯：乙腈、甲醇，其他试剂均为分析纯。

2 黄芪免煎颗粒与其传统饮片中黄芪甲苷检测方法与结果

2.1 对照品溶液制备 称取适量黄芪甲苷对照品，利用甲醇进行溶解，定容0.27mg/ml。

2.2 色谱条件 C18色谱柱、甲醇水(30∶70)、流动相、流速1.0ml/min、柱温为室温、检测波长设置203nm。

2.3 线性关系分析 分别吸取1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml对照品溶液，并置入100ml容量瓶内，采用甲醇进行稀释后定容，通过微孔滤膜(0.45μm)过滤后，进样测定；将黄芪甲苷进样量作为横坐标，其峰面积作为纵坐标，在坐标上绘制标准曲线图，并计算相关系数与回归方程，r=0.999 8，Y=1 787 338.4X-301.01，显示黄芪甲苷含量在0.028～0.136μg范围内，并与其峰面积呈良好线性关系。

2.4 稳定性试验 室温环境下，黄芪免煎颗粒样品溶液分别在配制后即刻、2h、6h、8h、12h内进行含量检测，在色谱条件下进行6次，计算黄芪甲苷含量RSD=1.89%，结果显示黄芪甲苷含量在12h内处于稳定状态。

2.5 精密度试验 吸取10μl黄芪甲苷对照品溶液，在色谱条件下重复进样共6次，详细记录峰面积，准确计算黄芪甲苷含量RSD=1.32%，结果说明方法符合精密度检测标准。

2.6 供试品溶液制备 称取10g黄芪免煎颗粒、100g黄芪饮片，蒸馏水溶解黄芪免煎颗粒，并进行定容100ml；将传统黄芪饮片粉碎成微小粗粒，过14目筛后，将8倍量蒸馏水加入黄芪饮片粗粒中，煎煮3次，40min/次，煎煮后过滤，将3次煎煮溶液混合均匀过滤，水浴浓缩，溶液恢复至室温后利用蒸馏水进行定容100ml，吸取传统黄芪饮片溶液进行制备，最终定容为100ml供试品溶液；依次吸取20ml供试品溶液，水饱和正丁醇进行4次萃取，分别为20ml、20ml、10ml、10ml，将其混合，并加入氢氧化钠溶液(0.5%)内充分洗涤3次，分别为20ml、20ml、40ml，去除碱液层，促使正丁醇挥干，甲醇溶解剩余残渣，并定容50ml。

2.7 回收率试验 精密称取适量已知黄芪甲苷含量的黄芪免煎颗粒共5份，加入黄芪甲苷对照品溶液，根据试剂制备方法进行制备，并吸取10μl进样检测，结果显示加样回收率=95.96%，RSD=5.4%。

2.8 供试品溶液检测 上述已制备供试品溶液通过微孔滤膜(直径0.45μm)过滤后，10μl进样进行含量测定，记录色谱峰面积，每个供试品溶液进行3次测定，求取黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的平均值，结果见表1。

表1 黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量试验结果

2.9 影响因素试验 将黄芪免煎颗粒、传统饮片置于高湿、高温、强光条件下进行储存，分别于0d及存储7d、14d进行黄芪甲苷含量测定，黄芪免煎颗粒与传统饮片黄芪甲苷含量相比无显著差异(P>0.05)，结果见表2。

表2 黄芪甲苷影响因素试验结果

2.10 加速试验 分别将黄芪免煎颗粒、传统饮片置于加速条件中，即湿度(75±5)%RH、温度(40±5)℃下进行储存，并在储存即刻、第1个月、第3个月、第6个月时分别对黄芪甲苷含量进行考察，黄芪免煎颗粒与传统饮片黄芪甲苷含量相比无显著差异(P>0.05)，结果见表3。

3 讨论

近年来，随着我国中药制剂管理不断科学化、规范化，国家食品药品监督管理局公布了《中药配方颗粒管理暂行规定》，明确规定中药免煎颗粒归类为传统中药饮片管理范围[1]。与传统中药饮片抓药调剂相比，中药免煎颗粒具有取药时间短、干净卫生、配药精准、可随身携带、便于储存、患者用药依从性高等特点，在中医临床应用中具有良好价值[2]。

表3 加速试验黄芪甲苷含量

多方研究发现，中药免煎颗粒受不同原辅料供应商、不同制备工艺、多样化质量标准等因素影响，造成其与传统中药饮片在主要含量、临床疗效、稳定性方面存在一定差异[3-4]。因此，中药免煎颗粒能否完全代替传统饮片仍需进一步印证。经Meta分析可知，在中药免煎颗粒与中药饮片临床疗效对比研究中发现，中药免煎颗粒在疾病治疗中有效率更高，中药免煎颗粒应用于中医临床治疗中，具有一定价值[5]。

中药免煎颗粒是在传统饮片基础上演变而来的新型中药制剂，为中药汤剂剂型改革的创新性尝试。本试验将黄芪免煎颗粒作为研究对象，黄芪免煎颗粒是中草药黄芪研制而成的纯中药颗粒药剂，具有补气固表、增强机体免疫力等作用，主要应用于自汗、气短心悸、体虚浮肿、久泻、痈疽难溃，创口久不愈合等疾病治疗中；同时相比传统中药饮片，具有携带方便、无须长时间煎煮等优势。此外，黄芪主要成分有皂苷、黄酮、多糖等，除皂苷类物质黄芪甲苷外，黄酮类物质毛蕊异黄酮葡萄糖苷也是其活性及含量较高成分，具有降血脂、抗病毒等作用[6-7]。因此，在探究黄芪主要成分黄芪皂苷时，增加对毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量检测，有助于提升黄芪免煎颗粒与其传统饮片主要成分含量对比的准确性。本研究通过紫外光区波长扫描得知，黄芪甲苷在203nm波长时存在较强吸收性，且噪音影响较小；同时利用不同碱性溶液萃取、水饱、大孔树脂柱分离纯化等技术对黄芪免煎颗粒、传统饮片进行处理分析，并采用正丁醇、水饱进行萃取，结果发现，黄芪免煎颗粒中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量略低于传统饮片，其原因可能在于中药饮片煎煮过程中各成分含量间存在增溶效应。但总言之，二者相比，差异无统计学意义(P>0.05)。且中药免煎颗粒在制备过程中经过喷雾干燥、优化低温浓缩等系列中医制药工艺流程，保证了中药成分含量溶出率，减少有效成分流失，确保中药饮片主要成分含量。此外，本研究经稳定性试验、加速试验可知黄芪免煎颗粒样品黄芪甲苷含量在12h内处于稳定状态，并在高温、高湿、强光状态、40℃、75%RH加速条件下较为稳定，可见黄芪免煎颗粒中黄芪甲苷的含量受环境因素影响较小，稳定性良好，临床应用中具有一定价值。

综上所述，黄芪免煎颗粒与其传统饮片主要成分黄芪甲苷含量差异不大，笔者认为黄芪免煎颗粒代替传统饮片具有一定科学依据，并在确保治疗效果的同时，实现良好药学价值。