8876例不同性别患者尖锐湿疣组织HPV基因型对比研究

曾成龙 朱继锋 朱冠男 冯 婷 闫 丹 赵小东 王胜春

第四军医大学西京皮肤医院，陕西西安，710032

人乳头瘤病毒(human papilloma virus，HPV)是一种小分子双链DNA病毒，对人皮肤和黏膜有高度亲嗜性，根据编码衣壳蛋白L1的基因序列不同确立HPV基因型别，目前已发现该病毒有200余种亚型[1]。不同型别的HPV感染可以导致不同的临床病变[2]，其中42种基因型与生殖道疾病有关，HPV不仅是尖锐湿疣(condyloma acuminate，CA)的病原体，而且还与多种恶性肿瘤及癌前病变密切相关，研究显示，女性HPV感染与宫颈癌的发生密切相关[3]，明确HPV16，18，31，33，35及58型等高危亚型的感染是女性宫颈癌的主要病因[4]，男性作为HPV传播的重要“载体”[5]，但男性HPV感染的相关研究目前较少。掌握男女HPV感染状况和基因亚型的分布特征，对CA的流行病学研究及其防治均有重要的临床意义，本文对此进行回顾分析。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2010年9月至2019年9月就诊于我院性病门诊CA患者。入选标准：①参照中国疾病预防控制中心制定的《性传播疾病临床诊疗指南》 中CA的诊断标准；②HPV基因分型检测阳性。排除标准：①临床基本资料缺失；②其它HPV相关感染疾病；③系统免疫性疾病患者。

1.2 标本采集 充分暴露疣体部位，随机选取一处，先用生理盐水清洗，在皮损处消毒，用消毒活检钳夹取疣体组织置于标本保存液，-20℃冰箱保存。

1.3 试剂和仪器 HPV基因分型检测试剂盒由深圳亚能生物技术有限公司提供，可检测包括18种高危型(HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，56，58，59，66，68，73，82，83)及5种低危型(HPV6，11，42，43，81)共23种HPV基因型。TL988实时荧光定量PCR仪由西安天隆科技有限公司提供，FYY-3型分子杂交仪由江苏兴化市分析仪器厂提供。

1.4 实验方法 本研究采用PCR反向分子杂交法进行HPV基因分型检测，实验步骤严格按照试剂盒说明书进行操作，实验全程做好质量控制。

1.5 统计学方法 应用SPSS 19.0软件包进行数据汇总与统计分析，计数资料以率表示，男性和女性患者间HPV多重感染率和高危型感染率的比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 年龄分布 共入选8876例，男5717例(64.41%)，女3159例(35.59%)，年龄8个月～84岁，平均(32.83±11.15)岁。男女患者年龄分布主要集中在20～49岁，以20～29岁最多，各占41.68%和43.40%，见表1。

2.2 HPV基因型别比较 8876例患者共检测出23种基因型，以HPV6、11为主要感染的亚型，其比率分别为61.55%和32.92%。排名前十位的HPV基因型从高到低依次为：HPV6，11，16，43，42，52，59，58，51和18型(男性)；HPV6，11，16，52，43，51，58，56，53和59型(女性)。比较男女各种HPV基因型的检出率，男性HPV11、45和73型这三种检出率高于女性，其它二十种型别则相反，且除HPV6，42，43，45，73，82和83外均有统计学差异(P<0.05)， 见表2。

2.3 HPV基因型多重感染比较 CA患者感染以单一型别感染为主，共5282例(59.51%)，多重型别感染次之为3594例(40.49%)。其中，女性多重(二重及以上)型别的感染率显著高于男性，具有统计学差异(P<0.0001)， 见表3。

表1 5717例男性和3159例女性CA患者年龄分布情况

表2 5717例男性和3159例女性CA患者HPV基因型检出情况

表3 5717例男性和3159例女性CA患者HPV基因型多重感染比较

表4 5717例男性和3159例女性CA患者HPV基因型致癌性比较

2.4 HPV基因型的致癌性比较 CA患者感染以低危型感染为主，共感染5434例(61.22%)，高危型感染次之为3442例(38.78%)。其中，女性高危型的感染率显著高于男性，具有统计学差异(P<0.0001)，见表4。

3 讨论

CA患者感染的HPV亚型较多，且不同基因型可能会影响到CA的发病特点和预后转归[6]，目前大多数研究集中在女性HPV感染及其相关的宫颈病变问题上[7,8]，而对男性HPV感染的相关问题关注较少[9]，缺乏其大样本的HPV感染研究资料，文献显示男性患病率高于女性患者[10]，临床中男性CA患者多于女性，故有必要将男性和女性进行比较分析研究其HPV感染特点。

本研究结果显示男性和女性HPV感染特点不完全相同，主要表现在：①男性和女性均检测出23种HPV基因型，但感染的HPV基因型频数不同，从两者排名前十位频数分布表可以看出，除前三名(均为6、11和16)顺序一致外，从第四名至十名，型别种类、频数和检出率则不相同，男性HPV11、45和73型的检出率要高于女性，这与Komlos等[11]报道一致，其它型别则女性高于男性，且23种型别当中除HPV6，42，43，45，73，82和83外均有统计学差异，此点提示HPV疫苗对男性和女性的覆盖率可能不同[12]。②男性和女性感染的年龄段分布大致相同，均主要集中在20～49岁，以20～29岁最多。③男性和女性HPV基因型多重感染和致癌性不全相同，总体上两者均以单一和低危型感染为主，以多重、低高混合型和高危型感染次之[13]，男女比较显示男性单一和低危型的感染率高于女性，女性多重、高危型的感染率高于男性，这与其它研究的结果基本一致[14,15]。男性和女性HPV感染特点不完全相同的原因可能是由于男女性在HPV感染状态、机体免疫系统等方面存在差异，这是否与女性生殖道特殊的生理结构及生理环境有关尚待进一步研究。

本研究女性多重、高危型的感染率高于男性，有文献报道高危型HPV感染是尖锐湿疣患者复发重要原因[16]，临床上要重视女性CA复发的问题和加强女性的随访管理，正常情况下所有CA患者治疗后的最初3个月，至少每2周随诊1次，随访至末次治疗后6个月[17]。鉴于本研究结果，笔者建议女性的随访期可延长至1～2年，必要时做HPV检测和宫颈细胞学的检查。