热熔压敏胶为基质制备的伤柏贴膏皮肤给药安全性分析

梁秀清， 徐海燕， 刘东文， 何宝凝， 陈韵姿

（佛山市中医院制剂中心，广东佛山 528000）

伤柏贴膏是在佛山市中医院临床验方伤柏散的处方基础上进行研发的新型制剂，具有凉血散瘀、消肿止痛的作用，用于慢性软组织损伤和劳损，症见关节肿胀，筋骨疼痛属瘀血阻络等。该制剂与原散剂相比，具有载药量大、使用方便、透气性好等优点[1-2]。其中，用作基质的热熔压敏胶属于贴膏生产中较前沿的基质，尚未收载于我国药用辅料名录中。作为国内首次由广东省药监局批准以热熔压敏胶为基质的新制剂之一，在研发上处于较领先的地位。为了收集该制剂临床使用前的数据，本试验考察了伤柏贴膏在皮肤上的使用安全性，现将研究结果报道如下。

1 材料

1.1 动物KM小鼠，SPF级，18 ～22 g，雌雄各半，由广州中医药大学实验动物中心提供，动物质量合格证号：0067727。白化豚鼠，普通级，250 ～300 g，雌雄各半，由广州中医药大学实验动物中心提供，动物质量合格证号：0067727。新西兰兔，普通级，1.5 ～2.5 kg，雌雄各半，由广州中医药大学实验动物中心提供，动物质量合格证号：0067727。

1. 2 药物伤柏贴膏[6 g（生药）/贴，117 cm2/贴]（批号：305J8）及赋形剂贴，均由佛山市中医院提供；硫化钠，天津市福晨化学试剂厂生产，批号：20091207；2，4-二硝基氯苯，天津市光复精细化工研究所生产，批号：07713。

2 方法与结果

2.1 急性毒性试验[3-4]

2.1.1 敷贴剂量的选择 取昆明（KM）小鼠15只，随机分成3组，分别为贴敷0.4 cm2/g、贴敷0.5 cm2/g及贴敷0.6 cm2/g组。给药前将小鼠背部及腹部进行脱毛。禁食不禁水12 h 后，按上述剂量各组小鼠接受伤柏贴膏皮肤贴敷给药。在给药24 h 后，各组小鼠均无出现死亡情况，且精神状态良好，饮食、饮水、活动和二便正常，鼻、眼、口腔无异常分泌物。提示0.4 ～0.6 cm2/g敷贴剂量安全。

2.1.2 一般状况观察 取KM 小鼠30 只，雌雄各半，按小鼠最大贴敷剂量（0.6 cm2/g体质量），给予伤柏贴膏贴敷给药，一日2 次，6 h/次，连续给药2 次，药后观察14 d。每天观察小鼠精神状态、活动、毛发光泽度、食欲、进水量、大便、小便、鼻眼、口腔有无异常分泌物、有无死亡。第7、15 天称体质量。第15 天处死及解剖动物，肉眼观察主要脏器。

2.1.3 结果 见表1。所有受试小鼠均精神状态良好，毛色光洁，饮食、饮水、活动和二便正常，鼻、眼、口腔无异常分泌物，体质量变化正常，肉眼观察主要脏器没发现异常，未出现不良情况和死亡动物。伤柏贴膏的小鼠贴敷皮肤给药剂量为61.5 g（生药）·kg-1·d-1。该贴膏剂[6 g（生药）/贴，117 cm2/贴]成人临床每天用量为1 ～2贴，即每天最大用量为12 g（生药）/d，以成人体质量60 kg 计，平均用药剂量为0.2 g（生药）·kg-1·d-1。而本品小鼠的日给药量是成人最大临床用量的308倍，提示本贴膏剂安全性较高。

2.2 皮肤过敏性试验[3-4]

2.2.1 方法 取豚鼠30只，随机分为5组，即赋形剂对照组，阳性对照组，伤柏贴膏高、中、低剂量组，每组6只，给药前背部两侧脱毛，脱毛区为5 cm×5 cm。在第0、7、14 天，赋形剂对照组贴予赋形剂，阳性对照组涂予1%的2，4-二硝基氯苯，伤柏贴膏高、中、低剂量组（剂量分别为78.0、39.0、19.5 cm2·kg-1·d-1），贴敷6 h。末次给予相应的药物致敏后14 h，在激发接触阶段，阳性对照组涂予0.1%的2，4-二硝基氯苯，其余各组再次贴予相应的药物。6 h 后，观察72 h 内皮肤过敏反应情况，并按表2皮肤过敏反应评分标准进行评分，计算致敏发生率，再按表3进行皮肤致敏性评价标准，同时密切观察动物是否有哮喘、站立不稳或休克等严重的全身性过敏反应出现。

2. 2. 2 结果 如表4 所示，豚鼠按伤柏贴膏高、中、低剂量及赋形剂皮肤贴敷均无出现水肿及红斑等过敏反应，并且在观察过程中豚鼠均无出现哮喘、站立不稳或休克等严重的全身性过敏反应。实验结果表明伤柏贴膏对豚鼠无致敏性。

2.3 皮肤刺激性试验[3-4]

2.3.1 方法 取家兔8 只，雌雄各半，随机分为单次给药组和多次给药组，每组4只。试验前24 h对给药区（背部）进行脱毛处理。去毛范围左、右各6 cm×6 cm（给药前检查去毛皮肤是否因去毛而受损伤，有损伤的皮肤不宜进行试验）。

单次给药组：伤柏贴膏，以12 cm2·kg-1·d-1的剂量，直接贴敷于一侧已去毛的皮肤上，然后用无刺激性胶布加以固定，另一侧贴予赋形剂对照，贴敷6 h。贴敷结束后，除去该贴剂并用温水清洁给药部位，在自然光线下，肉眼观察去除药物后1、24、48、72 h的皮肤反应，并记录贴敷部位有无红斑和水肿等情况。按表2皮肤过敏反应程度的评分标准对皮肤红斑和水肿进行评分，计算每一观察时间点各组受试物及赋形剂皮肤反应积分的平均分值，再按表3进行刺激强度评价。多次给药组：取伤柏贴膏，以12 cm2·kg-1·d-1的剂量，直接贴敷于一侧已去毛的皮肤上，然后用无刺激性胶布加以固定，另一侧贴予赋形剂对照，连续1周同一时间给药，每天1次，每次贴敷6 h。贴敷结束后，除去该贴剂并用温水清洁给药部位，在每次去除药物后1 h以及再次贴敷前观察及记录红斑及水肿、贴敷部位是否有色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄情况及其发生时间及消退时间，并对红斑及水肿进行评分。末次贴敷后，在自然光线下，肉眼观察去除药物后1、24、48、72 h的皮肤反应，并记录贴敷部位有无红斑和水肿等情况，按表5皮肤刺激性反应评分标准对皮肤红斑和水肿进行评分，先计算观察时间点各组积分均值，然后计算观察期限内每天每只动物刺激积分均值，再按表6皮肤刺激强度评价标准进行刺激强度评价。

表1 伤柏贴膏小鼠皮肤给药急性毒性试验Table 1 The changes in symptoms of mice in acute toxicity test for Shangbai Plaste

表2 皮肤过敏反应程度的评分标准[5]Table 2 The scoring standard for skin allergic degrees

表3 皮肤致敏性评价标准[5]Table 3 The evaluation standard for skin sensitization

表4 皮肤过敏反应程度的平均分值及致敏发生率Table 4 The average scores and skin sensitization rate for skin allergic degrees （n=6，s/分）

2.3.2 结果 新西兰兔按伤柏贴膏12 cm2·kg-1·d-1剂量贴敷皮肤给药，单次给药组在局部贴敷赋形剂和受试药的1、24、48、72 h后，贴敷部位均无红斑和水肿等情况。多次给药组给药7 d，在末次局部贴敷赋形剂和受试药的1、24、48、72 h 后，赋形剂部位均无红斑和水肿等情况。受试药部位有轻度红斑，平均分值（0.25 分）介于0 ～0.49 分之间。观察期限内，赋形剂组和伤柏贴膏组每天每只动物积分均值分别为0 分及0.1 分，介于0 ～0.49分之间表明伤柏贴膏对新西兰兔局部皮肤无刺激性。

表5 皮肤刺激性反应评分标准[5]Table 5 The scoring standard for skin irritation

表6 皮肤刺激强度评价标准[5]Table 6 The evaluation standard for skin irritation

3 讨论

在新制剂的研发过程中，安全性研究一直是不容忽视的部分。虽有研究[6-7]结果表明，热熔压敏胶贴剂对皮肤无刺激和致敏性，但因热熔压敏胶没有收载于我国的药用辅料名录中，尚无法定标准，国内市面至今没有经药监部门批准正式生产的药品或医疗机构制剂，更未能形成产业化，仅见一些以“医疗器械”名义注册的产品在市面上流通，这些产品也未见相关的有效性或安全性实验资料支持，这也为热熔压敏胶的应用带来了一定的不确定性。

本试验结果表明，伤柏贴膏对小鼠皮肤无全身急性毒性反应，对家兔皮肤无刺激性，对豚鼠皮肤无过敏反应，表明该新制剂是较安全的局部外用药，此为其在临床的推广使用提供了数据基础。伤柏贴膏作为我院骨伤疾病治疗的新剂型补充，既保留了原散剂的疗效，又改进了患者的用药模式，可为医院制剂的临床使用发挥更可靠的作用，进一步推动了医疗机构制剂的发展。