胸苷激酶1对骨髓增生异常综合征的诊断价值

孙永杰

骨髓增生异常综合征（MDS）为临床克隆性造血干细胞疾病，其特征为髓系细胞一系或多系病态造血或无效造血、血细胞减少以及高风险向白血病转化［1］。该病是临床常见血液系统疾病，好发于老年群体，病因尚不清晰，部分人群因长期接触电离辐射、强电磁场、有机溶剂等导致 MDS［2］。 MDS 患者的临床表现主要取决于血细胞异常，通常以贫血为临床征象，但不少其他疾病如巨幼细胞贫血（MA）、再生障碍性贫血（AA）、溶血性贫血等均患有相似征象。血清胸苷激酶1（TK1）与细胞增殖密切相关，其浓度可反映正常细胞和肿瘤细胞的增殖特性［3-4］。乳酸脱氢酶（LDH）为造血细胞中的重要糖酵解酶，正常人群机体内仅含有少量的LDH，当人体细胞受到破坏时，LDH含量增加，临床可见于急性心肌梗、急性白血病、恶性肿瘤、溶血性贫血等疾病中［5］。该研究选取MDS患者52例和AA患者60例，旨在探讨TK1对骨髓增生异常综合征的诊断与鉴别价值。现内容报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料通过伦理委员会审批，选取2018年2月—2019年7月笔者所在医院收治的MDS患者52例（MSD组）、再生障碍性贫血（AA）患者 60例（MA组）。其MDS组中男42例，女10例；年龄18～72 岁，平均（43.21±4.52）岁；MDS 分型：难治性贫血 （RA）19例，难治性贫血伴多系统病态造血（RCDM）10例，难治性贫血伴原始细胞增多-1（RAEB-1）12例，难治性贫血伴原始细胞增多-2（RAEB-2）11例。AA组中男32例，女28例；年龄18～70 岁，平均（43.12±4.34）岁。对比两组性别、年龄资料，差异无统计学意义（P＞0.05），可对比分析。

1.2 MDS诊断标准参照 《骨髓增生异常综合征（MDS）最低诊断标准》［6］。 （1）必要条件（两者均满足）：一系或多系血细胞如红细胞、粒细胞、血小板，持续减少至少4月或存在原始细胞增多及MDS相关的细胞遗传学异常，可直接诊断；排除其他类似血液病。（2）主要标准：一系或多系如红细胞、粒细胞、巨核细胞，骨髓细胞≥10%发育异常，环形铁粒幼细胞≥15%突变或环形铁粒幼细胞≥5%伴SF3B1突变；骨髓涂片显示骨髓原始细胞5%～19%或外周血涂片原始细胞2%-19%，排除存在急性白血病特异性基因重排；典型染色体异常。（3）辅助标准：骨髓病理/和免疫组化支持MDS，如幼稚前体细胞异常定位 （ALIP）、CD34原始细胞成簇分布和采用免疫组化方法监检测微小巨核细胞≥10%发育异常；骨髓细胞免疫表型存在多个MDS相关异常，支持单克隆髓系细胞；分子学方法（测序）发现髓系细胞存在MDS相关突变，支持克隆造血。

1.3入选标准（1）纳入标准：①贫血患者在检查前均未经过输血或服用影响造血功能药物；②MDS患者经骨髓活检病理和骨髓涂片检查确诊；③所有患者对研究知情同意，配合研究内容。（2）排除标准：①合并脏器功能障碍或感染者；②合并其他恶性肿瘤者；③存在精神疾病或认知障碍者。

1.4方法采集两组患者清晨空腹静脉血4 ml，静置30 min后于3000 r/min离心处理5 min，取上层清液备用。采用酶免疫点印迹化学发光法，并利用LAS4000型化学发光成像分析仪（美国GE公司）检测胸苷激酶1（TK1）水平。采用ARCHITECT i2000型自动化学发光免疫检测仪（美国雅培公司）检测血清乳酸脱氢酶（LDH）水平。

1.5观察指标对比两组患者TK1、LDH水平，并以骨髓活检病理结果为“金标准”判断血清TK1与LDH 检测 MDS 的诊断价值。TK1 参考值［7］：＜2 pmol/L为阴性，＞2 pmol/L为阳性；LDH正常值为109～245 U/L。

1.6统计学方法采用SPSS 20.0分析软件进行数据处理，计量资料以（x±s）表示，组间用独立样本t检验，组内用配对样本t检验，计数资料用（%）表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1两组TK1和LDH水平比较MDS组血清TK1、LDH水平高于AA组，差异有统计学意义（P＜0.05）。 见表 1。

表1 两组TK1和 LDH水平对比（x±s，mmol/L）

2.2 TK1与LDH诊断结果TK1诊断MDS 49例，AA50例，与骨髓活检病理结果相符率为88.39%；LDH诊断MDS 42例，AA37例，与骨髓活检病理结果相符率为70.54%；组间对比，差异有统计学意义（P＜0.05）。 见表 2。

2.3 TK1和LDH的诊断价值TK1诊断灵敏度为94.23%，特异度为83.33%；LDH诊断灵敏度为80.77%，特异度为61.67%；组间对比，差异有统计学意义（P＜0.05）。 见表 3。

表2 TK1、LDH的诊断结果对比（例）

表3 TK1和LDH的诊断价值对比［%（n/n）］

3 讨论

MDS和AA均属于骨髓衰竭性疾病，患者临床表现缺乏特异性，一般均患有长期贫血症状，药物治疗不明显，其1～2系血细胞或3系血细胞减少，网织红细胞计数降低，使其鉴别诊断具有一定难度［8］。

LDH在正常人体中含量较低，当机体细胞遭受破坏时可迅速增高。有研究报道，LDH有助于诊断和鉴别诊断贫血性疾病，MDS主要是因基因突变、酶蛋白基因表达紊乱引发血细胞生化代谢改变，从而引起幼红细胞原位溶血、骨髓病态造血，导致患者生存周期缩短，血清LDH浓度升高［9］。而AA患者主要是因造血干细胞或微环境受损，体内红髓被脂肪髓所代替，造成全血细胞减少，与MDS发病机制完全不同，血清LDH浓度与正常人群无明显差异，因此，血清LDH可作为鉴别诊断贫血性疾病的指标之一。胸腺嘧啶核苷激酶（TK）主要分为2种不同的TK同工酶：TK1、TK2，其中TK1主要在人体增殖细胞中出现，如骨髓、脾脏、胸前积液以及脂肪组织等，主要由细胞质表达，其浓度可表现细胞的增殖状态，同时TK1与细胞内DNA的作用机制有关。有研究发现，TK1作为异常增殖动力学标志物，在恶性肿瘤患者体内的浓度是健康者的2倍，其阳性表达与消化道肿瘤与肺癌细胞增殖能力以及恶性淋巴瘤对化疗不敏感有关［10］。随着恶性肿瘤中DNA的合成，肿瘤细胞大量分化、增殖，导致TK1水平也随之增高，因此可将TK1作为监测肿瘤疾病的发生、发展及预后的重要指标。同时相关研究表明，肿瘤患者血清TK1浓度随着患者病情的缓解而降低，故可将其作为肿瘤患者临床疗效的监视指标［11］。近期研究发现，在血液系统恶性肿瘤中，血清TK1浓度检测可作为判断淋巴瘤和白血病的预后因子，MDS为造血干细胞恶性克隆性疾病，患有该疾病的患者的骨髓和其他造血组织大量恶性增生骨髓造血干细胞，导致TK1浓度升高，因此可将血清TK1用于MDS的鉴别诊断［12］。该研究发现，血清TK1检测在MDS诊断中的灵敏度、特异度及准确度均高于LDH，表明血清TK1在MDS中诊断价值比血清LDH更高，可将血清TK1作为鉴别诊断MDS的重要观察指标，与LDH联合用共同鉴别诊断贫血性疾病。

综上所述，MDS患者血清TK1浓度较高，相较于LDH鉴别诊断其灵敏度和特异度更高，可作为MDS的筛选、辅助诊断以及疾病进展的监测，与LDH联合用共同鉴别诊断贫血性疾病。