血清可溶性CXCL16在子痫前期患者中的表达变化及其临床意义

陈 瑞

河南大学附属郑州颐和医院检验科，郑州 450047

子痫前期是一类妊娠性高血压疾病，其在所有妊娠妇女中发病率约为5%～10%，是母体和胎儿死亡的主要原因之一［1］。子痫前期临床定义为新发高血压（收缩压高于140 mmHg或者舒张压高于90 mmHg）和新发蛋白尿。研究表明子痫前期的发生始于妊娠中期，早于临床症状出现前［2-3］。早期诊断并预测子痫前期的严重程度可通过严格的监测和及时有效的干预可减轻或避免母亲和胎儿严重的并发症。因此弄清子痫前期的发病机制并发觉有效的生物标志物预测子痫前期的发生对于优生优育尤为关键。近期研究证实母胎免疫以及母体免疫平衡紊乱在子痫前期中扮演重要角色，趋化因子是一类参与炎症反应的细胞因子，可调控炎症白细胞募集过程［4］。CXCL16是趋化因子超家族新成员，其在炎症性疾病中显著上调，且有助于内皮细胞功能紊乱和肝脏损伤［5］。而内皮细胞功能紊乱和过度炎症在子痫前期病因学中扮演重要作用，因此推测CXCL16 可能参与了其发生发展过程。据此本研究将探究血清可溶性CXCL16在子痫前期患者中的变化及其与疾病严重程度的关系。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2017年3月—2019年3月于河南大学附属郑州颐和医院妇产科就诊且明确诊断为子痫前期的妊娠孕妇58例作为研究组，同期健康体检妊娠孕妇30例为对照组。并依据疾病严重程度将研究组分为轻度子痫前期组（30例）和重度子痫前期组（28例）。排除合并慢性疾病史、肥胖史、吸烟史、合并感染以及自身免疫性疾病的孕妇。子痫前期诊断及分级依据第七版《妇产科学》中的标准［6］：（1）轻度子痫前期：妊娠20周后出现4 h内连续测定两次BP≥140/90 mmHg；尿蛋白≥300 mg/24 h或随机尿蛋白(+)；可存在上腹不适以及头痛等临床症状。（2）重度子痫前期：BP≥160/110 mmHg；尿蛋白≥2.0 g/24 h或随机尿蛋白≥(++)；血清肌酐＞106μmol/L，血小板＜100×109/L；LDH升高；ALT或AST升高；持续性头痛或其它脑神经或视觉障碍，持续性上腹不适。

1.2 标本采集及处理

采集所有子痫前期患者治疗前、体检孕妇体检当日清晨空腹静脉血6 ml于干燥管中，室温放置20 min后，于中低速离心机中3 500 rpm 离心15 min 后，分离血清于冻存EP 管中，放入-80℃冰箱中保存，用于血清CXCL16 浓度的测定。 人CXCL16 测定 ELISA 试剂盒购自美国Cloud-Clone Corp 公司，所有测定步骤严格按照试剂盒说明书操作。同时记录研究对象血液生化和血液常规指标。

1.3 统计学方法

数据采用SPSS 20.0 软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（)表示，组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析；计数资料用例数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验，Spearman 分析指标间的相关性，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 研究组和对照组一般资料比较

子痫前期患者和健康对照组间年龄、BMI和孕周等一般资料比较差异无统计学意义，但子痫前期患者收缩压和舒张压均高于健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 研究组和对照组一般资料情况

2.2 研究组和对照组CXCL16及血液学指标比较

与对照组相比，子痫前期患者白细胞计数(WBC)并未出现显著变化，而PLT则显著下降。此外，血清肝脏损伤相关酶类ALT和AST则均显著升高，血清肾脏损伤标志物肌酐亦显著增加。CXCL16 浓度在子痫前期患者中显著高于健康孕妇，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

2.3 轻度子痫前期组和重度子痫前期组患者CXCL16水平间的差异

分析发现轻度子痫前期患者血清CXCL16 浓度(1.53±1.25) pg/ml 显著低于重度子痫前期患者(2.67±1.46) pg/ml，但高于健康对照组(0.53±0.35) pg/ml，（P＜0.05）。此外，重度子痫前期患者亦显著高于健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见图1。

表2 研究组和对照组血清CXCL16和血液学指标的比较

图1 轻度子痫前期组、重度子痫前期组和健康对照组间血清CXCL16浓度比较

2.4 子痫前期患者血清CXCL16水平与临床指标间的关系

Spearman 相关性结果表明，子痫前期患者血清CXCL16浓度与ALT、AST和血肌酐均呈显著正相关性，而与收缩压、舒张压和PLT间并无显著相关性，见表3。

表3 子痫前期患者血清CXCL16水平与临床指标间的相关性

2.5 CXCL16的受试者诊断曲线

受试者诊断曲线分析发现CXCL16 区分子痫前期患者和正常孕妇时曲线下面积高达0.895 1（95% CI 为0.831 8 to 0.958 5），最佳界值为0.85 pg/ml，其灵敏度为77.59%，特异度为86.67%，见图2。

图2 CXCL16的受试者诊断曲线

3 讨论

本研究通过检测子痫前期患者和健康孕妇血清CXCL16 浓度，分析发现CXCL16 在子痫前期孕妇中异常上调，此外血清CXCL16 的浓度还与疾病严重程度密切相关，即重度子痫前期患者显著高于轻度子痫前期患者，且在轻度子痫前期患者中相较对照组已经出现了异常高水平变化。CXCL16 具有多重生物学功能，主要以膜结合或可溶性的方式分泌表达，表达CXCL16 的细胞主要有巨噬细胞、T 细胞、B 细胞、树状细胞、上皮细胞、纤维细胞、血小板、血管平滑肌细胞以及内皮细胞等多种细胞［7］。研究发现CXCL16 可参与调控炎症反应、组织损伤和纤维化过程，异常上调的CXCL16 可通过刺激IFN-α和TNF-α等细胞因子参与炎症反应［8］。而与健康孕妇Th2细胞免疫占主导地位不同的是，子痫前期孕妇则是Th1细胞免疫占据优势，因此该类人群常对胎儿表现出过度的系统性炎症反应［9］。有研究表明子痫前期孕妇细胞滋养层微粒体中多形核白细胞可分泌大量促炎细胞因子，并出现在母体外周血循环中，与胎盘凋亡和坏死密切相关，而内皮细胞功能紊乱正是以这种方式被诱导发生的。

既往研究已经报道了在包括炎症性肠病和动脉粥样硬化等多种炎症性疾病患者中CXCL16 循环水平显著高于健康对照组［10］。因此本研究中发现的子痫前期患者中异常高水平CXCL16 可能与在其病因学机理中扮演重要作用的系统性炎症存在关联。子痫前期患者存在广泛的血管痉挛现象，而这与血流灌注不足相关。既往已证实CXCL16/ROCK1信号通路可加速肾脏组织中缺血性损伤，基于此表明CXCL16 可能有助于子痫前期中组织低氧损伤加剧［11］。此外，Marques 等［5］还发现上调的CXCL16 会造成内皮损伤，而本研究中发现的异常高水平CXCL16 可能亦会对子痫前期病因学中重要机理之一的内皮细胞功能障碍发挥促进作用。进一步分析发现CXCL16 与ALT 和AST 存在显著正相关关系，先前研究证实CXCL16 在肝脏内皮细胞中表达且在肝炎细胞损伤中发挥一定的作用［12］，提示其可能在子痫前期患者肝脏损伤中也发挥一定的效应。在动物实验中发现激活的CXCL16通路可增加肾小管间质损伤，而CXCL16与血肌酐间的正相关性提示其可能参与了子痫前期肾损伤过程［13］。Lekva等［14］也发现血清CXCL16在子痫前期孕妇中异常上调，但该研究并未分析不同严重程度子痫前期孕妇间的差异。另ROC曲线发现了0.85pg/ml的最佳诊断界值，敏感性和特异度均较高。在20% 左右的HELLP 综合征或子痫患者中并未出现蛋白尿或高血压，在这些病例中血清CXCL16则有希望作为子痫前期诊断的生物标志物。

综上所述，本研究初步发现子痫前期患者存在异常高表达的CXCL16，并与疾病严重程度以及肝脏或肾脏损伤存在关联，且诊断性能较好，或有希望成为潜在生物标志物。