微柱凝胶技术对于新生儿溶血病患儿输血前的检验效果

李 慧，张 田

南阳市骨科医院，河南 南阳 473000

新生儿溶血病指的是母婴之间血型不合，母亲体内产生与新生儿血型抗原不配的血型抗体，抗体经胎盘进入到新生儿体内，发生同族免疫性溶血。溶血患儿的血清胆红素水平会在短时间内上升，伴随不同程度的黄疸、贫血、水肿症状，若是得不到及时的输血治疗，患儿可能会发生心力衰竭、呼吸窘迫等严重病症［1］。为了防止患儿输血时因血型排斥加重溶血症状，在输血前进行配血检测十分重要。微柱凝胶技术是新发展起来的血型血清学检查方法，为了探究其在新生儿溶血病患儿输血前的价值，南阳市骨科医院进行了对比研究，发生其检验价值高于试管法，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取南阳市骨科医院2017年3月—2018年9月收治的60例新生儿溶血病患儿为研究对象，均采用输血治疗。其中，男 28 例，女 32 例；日龄 1～29（8.44±2.25）d；体重2.4～4.6（3.26±0.25）kg；患儿血型：A 型 14 例，B 型 13例，O型26例，AB型7例；母亲血型：A型13例，B型13例，O型28例，AB型6例。本次研究在医院伦理委员会的批准下进行。

纳入标准：（1）家属知情本次研究并同意参与；（2）患儿无药物过敏史；（3）患儿血液系统无其他疾病。

排除标准：（1）有精神病家族史患儿或者意识障碍患儿；（2）先天性心脏病患儿；（3）心肝肺肾等器官功能不全患儿；（4）传染性疾病患儿；（5）循环、免疫系统有严重疾病患儿。

1.2 检验方法

所有患儿血标本分别使用试管法、微柱凝胶技术进行血型鉴定；分别通过聚凝胺法、微柱凝胶技术进行交叉配血。仪器包括长春博讯生物技术有限责任公司的TD-A 型血清学用离心机（包括试剂）、长春博研科学仪器有限公司的FYQ型免疫微柱孵育器等。

1.2.1 血型鉴定：（1）试管法。参考《全国临床检验操作流程》，对所有患儿的血标本进行离心处理，观察反定结果，做阴性对照管排除冷凝集。（2）微柱凝胶技术。离心处理所有的血标本，取6 支凝胶微管，分别记为A、B、C、D、E、F，在A、B、C、D 管中分别滴入0.5%红细胞悬液，并在E、F管中分别将血清、已知A型及B型红细胞0.5%悬液滴入，接着进行离心处理，转速3 000 r/min，时间为5 min，结束后肉眼判定结果。

1.2.2 交叉配血：（1）凝聚胺法。离心所有患儿及供血者的血清，取2 支凝胶微管，分别记为主侧、次侧，配置3%～5%红细胞悬液，将2滴输血标本、1滴供血标本红细胞悬液滴加入主侧，将2 滴供血标本、1 滴输血标本红细胞悬液滴加入次侧，接着分别滴入0.6 ml 低离子介质溶液，混合均匀，静置1 min，分别滴加2滴凝聚胺溶液，静置15 s，再以3 000 r/min 进行离心处理，时间为1 min，取管底0.1 ml 凝集液体，向其中滴入2 滴重悬液，肉眼判定结果。（2）微柱凝胶技术。离心所有患儿及供血者的血清，取2支凝胶微管，分别记为主侧、次侧，制作0.5%～1%红细胞悬液，将50 μL供血者标本及50 μL输血者标本红细胞悬液加入至主侧，将50 μL供血者标本红细胞悬液标本及50 μL输血加入至次侧，在37 ℃下孵育15 min，以3 000 r/min 进行离心处理，时间为5 min，完毕后肉眼判定结果。

1.3 观察指标

统计并比较微柱凝胶技术、试管法的正反定型不符率；微柱凝胶技术、聚凝胺法交叉配血不合率。微柱凝胶技术交叉配血不合判定标准：匹配为红细胞沉积在凝胶管底部，不匹配为凝胶上或凝胶中有红细胞聚集［2］。聚凝胺法交叉配血不合判定标准：匹配为1 min 内散开的属于凝聚胺引起的非免疫性凝集，不匹配为不散开的属于异体抗体所引起的免疫性凝集，试验结果需要在3 min 进行判读［3］。

1.4 统计学方法

数据采用SPSS 20.0 软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（）表示，组间比较采用t 检验；计数资料以例数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 试管法、微柱凝胶技术的血型鉴定情况

微柱凝胶技术、试管法的正反定型不符率均较低，相差不大，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 试管法、微柱凝胶技术的血型鉴定情况比较 例（%）

2.2 聚凝胺法、微柱凝胶技术交叉配血结果

微柱凝胶技术、聚凝胺法交叉配血不合率分别为3.33%、13.33%，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 聚凝胺法、微柱凝胶技术交叉配血结果比较 例（%）

3 讨论

据相关统计，每140 例新生儿中就有1 例存在溶血病，此病的发病率极高。新生儿溶血病的发病原因是母亲体内的IgG抗体从胎盘进入胎儿血液，使胎儿的红细胞破坏，使胎儿出现高胆红素血症、溶血、贫血等病症［4］。输血是治疗ABO新生儿溶血病的主要方法，能快速帮助患儿补充血容量，纠正休克等症状，为患儿的机体维持正常的供养能力。输血应用广泛，若存在血型不合、血液制品质量差等问题，容易使不良的输血反应被诱发，输血治疗的安全性被大大降低，因此，在新生儿溶血患儿接受输血治疗前，要加强检验工作。

传统的试管法因离心作用可以加速凝集反应，反应时间较短，可以有效测定红细胞上是否有无A 抗原或B 抗原，利用红细胞凝集试验，通过正反定型对输血者及供血者的血型进行鉴定。微柱凝胶技术即将红细胞和血清加入充有凝胶的微柱内腔中，如果血清中有该红细胞的特异性抗体，会形成红细胞免疫复合物，经过离心处理后，复合物会悬于凝胶中或者浮于凝胶表面（阳性）；如果血清中没有该红细胞的特异性抗体，不会形成红细胞复合物，离心后分散的红细胞会沉在微柱内腔的尖底部（阴性）［5］。同时，微柱凝胶技术还可以防止抗体蛋白在蛋白质中残留，或者避免出现抗球蛋白被残留盐分稀释的情况，导致结果呈现为假阴性，能降低漏诊率。在本次研究中，微柱凝胶技术、试管法的正反定型不符率均较低，分别为1.67%、3.33%，相差不大，差异无统计学意义。与张瑜［6］的研究结果一致，在其研究报道中，微柱凝胶技术、试管法的正反定型不符率均分别为1.29%、1.07%。上述结果表明，在输血前使用微柱凝胶技术进行血型鉴定检验，能有效鉴定出输血者和供血者的血型。

在交叉配血中，聚凝胺法中的聚凝胺被溶解后，会产生大量的正电荷，降低红细胞电位，导致非特异凝集出现可逆性，要中和凝聚胺的凝集，可以在其中加入枸橼酸钠，因此临床可以通过观察凝集红细胞的散开情况进行判定。但是，在药物、肝素、低浓度抗体等的影响下，凝集的红细胞也会散开，因此，使用聚凝胺法进行交叉配血，配血不合的概率较高。微柱凝胶技术进行交叉配血的原理是生物凝胶过滤，红细胞表面有抗体球蛋白，其会与抗球蛋白试剂中的抗体产生特异性反应，当红细胞凝集后，体积会增大，凝胶通道仅能通过单个红细胞，已经凝集的红细胞即便分开，也无法通过通道，因此匹配血型的红细胞会在凝胶的上部或中部凝集，不匹配血型的红细胞会沉积在凝胶管的底部。因此，在本次研究中，微柱凝胶技术、聚凝胺法交叉配血不合率分别为3.33%、13.33%。这与刘金荣［7］的研究结果一致，其研究报道中，微柱凝胶技术、聚凝胺法交叉配血不合率分别为1.64%、2.93%。上述结果说明，相比于聚凝胺法，在交叉配血中使用微柱凝胶技术，能提高交叉配血成功率。

综上所述，微柱凝胶技术在新生儿溶血病患儿输血前检验中有良好的价值，能准确鉴定患儿及供血者的血型，降低交叉配血不合率，能提高临床输血的安全性，值得临床广泛推广。