一例猪圆环病毒病继发链球菌的诊治

王佳茵，李 波，吉尚雷，*

（1.辽宁农业职业技术学院，辽宁 营口 115009；2.盘锦市现代农业发展中心，辽宁 盘锦 124000）

猪圆环病毒病是由猪圆环病毒引起猪的一种免疫抑制疾病，表现为猪断奶后多系统衰竭综合征（PMWS）和皮炎肾病综合征（PDNS），引起母猪繁殖障碍[1]。圆环病毒会破坏机体的免疫系统，出现严重的消化系统、呼吸系统症状，病猪腹泻、呼吸困难、逐渐消瘦，因免疫抑制而导致疫苗接种失败进而继发细菌感染。链球菌是一种有35种血清型能够引起人畜共患的致病菌，如果猪圆环病毒病继发感染链球菌，将给养猪业带来巨大的经济损失，影响养猪业的健康发展[2]。

1 发病情况

辽宁地区某中等规模猪场，7～8日龄仔猪有咳嗽症状，断奶仔猪逐渐消瘦。母猪有咳嗽病史，但已好转，受胎率100%，产仔率较好，保育发病10%。免疫情况：14日龄免疫猪繁殖与呼吸综合征疫苗，21日龄免疫猪瘟疫苗，25日龄免疫猪伪狂犬病疫苗，30日龄免疫猪圆环病疫苗。2019年4月到辽宁农业职业技术学院辽宁动物健康养殖研究中心就诊。

2 临床症状

保育猪会出精神沉郁、食欲下降、体温升高、呼吸困难。一般双侧震颤，睡眠时症状缓解，部分严重者会引起死亡，母猪无明显症状。

3 剖检及病理变化

剖检送检50 d左右病死猪2头，肺组织呈弥漫性间质性肺炎，肺肿胀、变硬，肺边缘出现弥漫性出血，腹股沟淋巴结肿大，眼睑水肿。剖检可见淋巴结肿大，观察到肠系膜淋巴结水肿，见图1。

图1 剖检病变

4 诊断

4.1 临床诊断

通过对猪场生产情况、免疫程序、发病情况、临床症状和剖检变化的分析，初步判断该猪场感染圆环病毒并激发感染沙门氏菌。

4.2 实验室诊断

4.2.1 病原检测

无菌采取患病仔猪病变明显的淋巴结，肾、肺，扁桃体和脾等组织进行低温研磨，将上述病料采用OMEGA试剂盒提取总DNA，根据GenBank数据库已经发表的圆环病毒基因保守序列设计引物，进行RT-PCR扩增。将获得样品按照电压120 v、100mA条件电泳30min。

在紫外灯下观察电泳结果，结果显示样品在750 bp位置处有明显条带，与圆环病毒阳性对照孔位置一致（见图2），所以初步判定为圆环Ⅱ型病毒阳性，说明发病猪体内存在圆环病毒。

图2 猪圆环病毒PCR检测结果

4.2.2 链球菌分离培养

无菌操作采取未被污染的病料组织，在麦康凯琼脂、普通营养琼脂、血琼脂和HE琼脂平板上进行划线分离，在37℃恒温培培养箱中培养24h[3]。培养后在血琼脂培养基可见大量溶血环的菌落。涂片染色镜检可见球形或卵圆形，多数呈链状排列的革兰氏阳性菌，初步判定为链球菌，见图3。

图3 细菌分离培养

4.2.3 药物敏感试验

用30种标准抗生素对分离的链球菌进行药敏试验，按照抑菌圈直径＜10 mm为耐药，抑菌圈直径10～15 mm为中度敏感，抑菌圈＞15 mm为高度敏感。结果显示该菌株对头孢他啶、头孢曲松钠和哌拉西林高度敏感，对青霉素、阿莫西林、红霉素、庆大霉素和土霉素等6种抗生素产生耐药性。

5 结论

综上所述，本案例根据临床症状、剖检变化和实验室诊断，可以诊断为猪圆环病毒与链球菌并发感染。

6 小结

目前，圆环病毒病尚无特效的治疗药物，通常采取综合治疗方法[3]。且往往容易继发链球菌等细菌性疾病加重病情，因此，预防是关键，做好免疫接种，健康猪要接种PCV2灭活疫苗，要定期进行抗体水平监测，保证免疫效果[4]。针对本次疫情，建议发病严重的仔猪要进行扑杀焚烧深埋处理，切断传染源，防止疫情继续传播。治疗可采用黄芪多糖注射液和猪白细胞干扰素进行肌注，连续注射3 d。链球菌能够引起多种动物感染发病，尤其是II型链球菌毒性最强，自然界分布广泛。研究表明[5]，链球菌感染成年猪发病后出现典型的临床症状不明显，造成的危害较小，新生仔猪和断奶仔猪感染后危害最大，发病率和死亡率最高。发病猪主要常见症状为败血症、脑膜炎和淋巴结肿胀，该病对我国生猪养殖业危害十分严重。链球菌属于革兰氏阳性菌，在药理学上，β-内酰胺类、大环内酯类和喹诺酮类等药物具有明显的杀菌作用，但药敏试验显示，青霉素、阿莫西林、红霉素、庆大霉素和土霉素等6种抗生素分离的链球菌无杀菌作用。调查猪场发现，该猪场在生产中主要使用青霉素、四环素类药物进行疾病的治疗和预防，造成耐药菌株的产生。建议猪场使用头孢曲松钠和哌拉西林交替用药进行链球菌的治疗。在今后的生产中，要合理使用抗生素，采取多种抗生素联合使用的措施，避免单一抗生素重复使用催生耐药菌株。猪场按照上述方案治疗后疫情得到控制，整群状态转好。