理气散结颗粒理气调血、散结止痛的药效学作用

周殿儒，周 游，魏谭军，肖 成，梁 源，王 毅∗，王 张∗，田 媛，胡凤娇

（1.达州市中西医结合医院，四川 达州 635000；2.成都中医药大学，四川 成都 611137）

中药复方制剂理气散结颗粒由柴胡、香附、延胡索、青皮、川芎、当归和白芍组成，具有理气调血、散结止痛的功效，主治肝气郁结、气滞血瘀、乳癖结块、乳腺增生、乳痈初起、乳房胀痛。肝五行属木，主疏泄、藏血，体阴而用阳使其能正常发挥其疏泄功能，使肝脏柔和而不上亢。乳房为肝经循行之所、冲任之脉相连之处、若肝气郁结、气血运行不畅，不通则痛乳房就会产生胀痛。可见肝脏功能正常是维持乳房生理功能正常的基本条件，肝郁气滞血瘀是乳腺疾病病机之本［1］。

理气散结颗粒是20 余年的临床使用证实理气散结丸改剂型所得。通过临床验证理气散结丸疗效显著、安全性好。但由于先前制剂的制剂技术水平、制剂辅料有限，导致该制剂存在着服用量大（规格100 丸，9 g/盒，2～3 丸/次，3 次/d，54～81 g/d）、口感差、携带不便、起效缓慢等缺点，限制了该药的推广。因此，在保持理气散结丸物质基础不变的情况下，根据方中药材的有效成分及理化性质，运用现代科学技术和设备，将理气散结丸改进，制成生物利用度高、服用量小、顺应性好、携带方便的颗粒剂。前期魏谭军等［2］已通过正交设计优选其提取工艺，王育［3］、李霞等［4］使用HPLC 测定了理气散结颗粒中9 种主要成分。本研究利用肾上腺素联合冰水致大鼠寒凝气滞血瘀、棉球致小鼠肉芽组织增生、热板致小鼠足部疼痛、醋酸致小鼠扭体反应4 个模型实验，探讨理气散结颗粒对气滞血瘀、乳房胀痛等症状的治疗作用。

1 材料

1.1 试剂与药物 肾上腺素联合冰水致大鼠寒凝气滞血瘀模型 理气散结颗粒（达州市中西医结合医院，批号151125）；理气散结丸（达州市中西医结合医院，批号160812）；复方丹参片（广州白云山和记黄埔中药有限公司，批号A6A036）；醋酸地塞米松片［遂成药业股份有限公司（原天津药业集团新郑股份有限公司），批号 160117］；布洛芬片（吉林万通药业集团郑州万通复升药业股份有限公司，批号160218）；阿司匹林肠溶片（拜耳医药保健有限公司，批号160218）；小金丸（九寨沟天然药业集团有限责任公司，批号160114）；氯化钠注射液（四川科伦药业股份有限公司，批号B16040811）；盐酸肾上腺素注射液［远大医药（中国）有限公司生产，批号 160502］；庆大霉素（宜昌人福药业有限责任公司生产，批号5140726E）；冰醋酸（重庆茂业化学试剂有限公司生产，批号2011082）水合氯醛（成都市科龙化工试剂厂生产，批号20100614）。

1.2 仪器 电子天平（赛多利斯仪器有限公司）；SA-5600型全自动血液流变测试仪（赛科西德）；电子称（上海有声衡器有限公司）；12×100 肝素管（江苏宇力医疗器械有限公司生产）；恒温干燥箱；眼科剪；眼科直镊；脱脂棉花（均由一人制作棉球，每次称量20 mg，加庆大霉素浸泡，60 ℃烘箱烤干）；RB-200 型智能热板仪（成都泰盟软件有限公司生产）；水盆；秒表。

1.3 动物 SPF 级SD 雌性大鼠80 只，体质量（200±20）g，四川省实验动物质量合格证号51203500000823，购自成都达硕验动物有限公司，生产许可证号 SCXK（川）2015-030。KM 种小鼠，SPF 级，全 雌，230 只，体质量（20±2）g，由成都达硕实验动物有限公司提供，实验动物生产许可证号SCXK（川）2015-030，四川省实验动物质量合格证号51203500000722、51203500000721。

2 方法

2.1 肾上腺素联合冰水致大鼠寒凝气滞血瘀模型 大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组（复方丹参片组0.45 g/kg、小金丸组 0.20 g/kg）、理气散 结丸组（1.957 0 g 生药/kg）、理气散结颗粒低、中、高剂量组［0.978 5、1.957 0、3.914 0 g 生药/kg）。大鼠灌胃给药，1 次/d，连续7 d，空白组和模型组灌胃生理盐水。给药体积为20 mL/kg。末次给药后1 h 进行第1 次射盐酸肾上腺素溶液皮下注射［5］。2 h 后，将空白对照组动物置于常温水（20 ℃），其余7 个组别大鼠置于冰水（0 ℃）中浸泡5 min［6］。在第1 次皮下注射后4 h，进行，第2 次皮下注射（方法同第1 次皮下注射），后禁食不禁水，18 h 左右。次晨，动物腹主动脉采血5 mL，全血抗凝。应用全自动血液黏度仪测定相关指标，所有采血及测试操作均在4 h 内完成［7-8］。

2.2 棉球致小鼠肉芽组织增生模型 小鼠分组同“2.1”项下分组。从小鼠剑突处将棉球植入小鼠左侧腹股沟皮下。第2 天开始灌胃给药，给药体积为20 mL/kg，给药1 次/d，连续7 d。结束后麻醉脱颈椎处死。取出棉球肉芽组织，剔除周围脂肪组织。于60 ℃烘箱内干燥4 h 后称定质量，计算每只动物的肉芽肿质量=棉球肉芽组织质量-20 mg［9-11］。

2.3 热板致小鼠足部疼痛模型 小鼠分组同“2.1”项下分组。筛选痛阈值在5～30 s 的小鼠，待所有动物测试完1 h 后，再测试1 次痛阈值。2 次值取平均值后为动物给药前的痛阈值。痛阈值测定完毕后小鼠灌胃给药，给药1 次/d，连续7 d。分别在末次给药第15、30、45、60、90、120 分钟时，取小鼠放入恒温的热板仪中。测定自放入至出现舔后足的潜伏时间作为该鼠的痛阈值，痛阈值超过60 s 以60 s 计。计算每只小鼠在每个时间点时的痛阈提高百分率［12-14］。痛阈提高百分率=［（给药后某个时间点的痛阈值-给药前痛阈值）/给药前痛阈值］×100%。

2.4 醋酸致小鼠扭体反应模型 小鼠分组同“2.1”项下分组。小鼠灌胃给药，给药1 次/d，连续7 d。动物末次给药后30 min，各鼠分别按10 mL/kg 的体积给予标准注射0.6%醋酸；然后观察首次出现扭体反应的时间（扭体潜伏期，15 min 内未出现扭体反应者，其潜伏期计为900 s）和15 min 内出现的扭体反应次数（15 min 内未出现扭体反应者，其扭体反应次数计为0 次），统计15 min 内各组出现扭体反应的动物数，并计算药物对扭体反应的抑制率［12-14］。抑制率=［（空白组扭体反应均数-给药组扭体反应均数）/空白组扭体反应均数］×100%

2.5 统计学分析 采用SPSS 17.0 统计软件进行分析，计量资料数据以（）表示，采用方差分析；等级资料非参数检验。以P＜0.05 表示差异有统计学意义。

3 结果

3.1 肾上腺素联合冰水致大鼠寒凝气滞血瘀模型 与模型组比较，理气散结颗粒低剂量组大鼠的全血黏度、全血相对指数（高切、低切）、全血还原黏度（低切、高切）、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数、红细胞变形指数和卡松黏度均明显降低（P＜0.05，P＜0.01），而血浆黏度明显升高（P＜0.01），红细胞压积和血沉指标的变化不明显（P＞0.05）；理气散结颗粒中剂量组大鼠的全血相对指数（高切）、全血还原黏度（高切）、红细胞刚性指数、红细胞变形指数和卡松黏度均明显升高（P＜0.05，P＜0.01），而其它指标差异无统计学意义（P＞0.05）。理气散结颗粒高剂量组大鼠的血液流变学指标差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1～2。

表1 理气散结颗粒对肾上腺素联合冰水致大鼠寒凝气滞血瘀模型的影响（）

表1 理气散结颗粒对肾上腺素联合冰水致大鼠寒凝气滞血瘀模型的影响（）

注：与模型组比较，∗P＜0.05，∗∗P＜0.01；与理气散结丸组比较，＾P＜0.05，＾＾P＜0.01。

表2 理气散结颗粒对肾上腺素联合冰水致大鼠寒凝气滞血瘀模型的影响（）

表2 理气散结颗粒对肾上腺素联合冰水致大鼠寒凝气滞血瘀模型的影响（）

注：与模型对照组比较，∗P＜0.05，∗∗P＜0.01；与理气散结丸组比较，＾P＜0.05，＾＾P＜0.01。

3.2 棉球致小鼠肉芽组织增生模型 与模型组比较，理气散结颗粒低、中剂量组肉芽肿质量均明显减轻（P＜0.05）。见表3。

3.3 热板致小鼠足部疼痛模型 与给药前痛阈值比较，中剂量组小鼠的痛阈值在第15 分钟时降低（P＜0.05）。与模型组比较，中剂量组小鼠的痛阈值在第90、120 分钟时升高（P＜0.05）；高剂量组小鼠的痛阈值在第45、90 分钟时均升高（P＜0.05）。见表4。

3.4 醋酸致小鼠扭体反应模型 与模型组比较，理气散结颗粒 低、中、高剂量 组小鼠 的扭体 次数减 少（P＜0.01）；中剂量组和高剂量组小鼠的扭体潜伏期明显延长（P＜0.05，P＜0.01）。见表5。

表3 理气散结颗粒对棉球致小鼠肉芽组织增生模型的影响（，n＝10）

表3 理气散结颗粒对棉球致小鼠肉芽组织增生模型的影响（，n＝10）

注：与模型组比较，∗P＜0.05，∗∗P＜0.01。

表4 理气散结颗粒对热板致小鼠足部疼痛模型的影响（，n＝10）

表4 理气散结颗粒对热板致小鼠足部疼痛模型的影响（，n＝10）

注：与给药前痛阈值比较，#P＜0.05，##P＜0.01；与模型组比较，∗P ＜0.05，∗∗P＜0.01；与理气散结丸组比较，＾P＜0.05。

4 讨论

中医中有“女子以肝为先天”《临证指南医案·卷九》之说。肝之经脉循股阴，入毛中，过阴器，抵小腹，上贯膈，布胸胁，绕乳头而行，与冲、任两脉相通，冲脉有血海之称，任脉为阴脉之海，与胞宫互相联系，故对女子行经、胎产及乳汁排泄起至关重要的作用［15］。肝气郁结疏泄失司、气机不畅，依据气血津精液之间的相互关系“气为血之帅，血为气之母”，故气滞可导致血瘀，而血瘀也可引起气滞，造成气滞血瘀且气滞于乳络，不通则痛，引起乳房胀痛、乳癖结块等诸多症状。通过对前人认识的总结和长期的临床观察，得出乳腺增生病既存在肝郁血虚，又存在气滞血瘀的病机特点，病位之本在肝，标在乳房。而传统的治法欠于全面，多重在消除肿痛、结块等局部病灶，忽视了脏腑气机的总体功能。因而根据仲景遵从“但见一证便是，不必悉具”的原则，提出了养肝调肝之治疗大法，以理气散结丸对肝气郁结、气滞血瘀、乳腺增生等症进行治疗。中医理论认为寒为阴邪，主收引，性凝滞，寒邪作用于血脉，血脉收引挛缩，血行缓慢而化生瘀血；另一方面，肝主疏泄和藏血，依据七情理论中提到“肝在志为怒，过怒伤肝”，使血行受到影响，是导致血瘀证的主要原因之一。依据上述论述，课题组以中医理论为指导，结合现代医学病理生理学基础从“寒凝”“气滞”方面入手建立动物模型，大鼠皮下注射大剂量肾上腺素注射液模拟“暴怒”时机体分泌大量肾腺素的特点，以冰水浸泡及持续低温冷冰模拟“寒邪”侵袭，二者综合作用模拟“寒凝气滞血瘀证”模型［16］。现代医学研究血瘀证可具体表现为“浓、黏、凝、聚”等血液流变学异常，这会导致血管壁增厚、血液变得黏稠、管腔狭窄，由于这些因素在局部血管中形成了血栓，阻断了血液正常的流通［17］。在肾上腺素联合冰水致大鼠寒凝气滞血瘀模型实验中，理气散结颗粒低剂量能降低模型大鼠的全血黏度、血液浓度、红细胞聚集性，并增加红细胞的变形能力，有利于改善血液流变学异常，其作用优于理气散结丸。理气散结颗粒对炎症后期肉芽增生病理变化具有抑制作用，作用强度与理气散结丸相当，量效关系由强至弱依次为低剂量、中剂量、高剂量。其镇痛作用均以中、高剂量的作用最明显，低剂量次之。

表5 理气散结颗粒对醋酸致小鼠扭体反应模型的影响（，n＝10）

表5 理气散结颗粒对醋酸致小鼠扭体反应模型的影响（，n＝10）

注：与模型对照组比较，∗P＜0.05，∗∗P＜0.01；与理气散结丸组比较，＾P＜0.05，＾＾P＜0.01。

理气散结颗粒柴胡疏肝解郁为君、香附理气疏肝、以顺肝性，青皮增强疏肝破气之。柴胡、香附等疏肝解郁药物可促进雌激素在肝脏的代谢，减轻雌激素对乳房的不良刺激［18］。芍药敛养肝血、缓急止痛。据文献报道，芍药苷有一定的保肝作用［19］。川芎辛散善行，有血中气药之称，气入血分，使血脉通畅，瘀滞消散，活血兼行气，有良好的活血祛瘀之功，活血化瘀药物可改善机体血液循环，降低血液黏稠度，抑制胶原纤维合成，从而促使增生肿块消失［20］。当归长于补血，有补血之圣药之称，助芍药补养肝血，避免川芎行散力过强，耗血动血三药共以养肝血、柔肝体、调肝而恢复肝正常的顺达之性。李伟霞等［21］通过实验亦证明当归、川芎配伍后对血瘀大鼠的血液流变学和凝血功能指标的改善作用优于单味药。延胡索具活血化瘀、行气止痛功效，既能行气解郁之力，又助活血止痛之功［22］。蜂房以增止痛之功，佐以山慈菇消痈散结；甘草为使，缓急止痛，调和诸药。

总之，理气散结颗粒能改善血液流变学异常，抑制炎症后期肉芽增生，以低剂量效果为佳。其在镇痛作用方面亦有明显的作用，高剂量效果较好。