青蒿素与二甲氧苄啶联合抗鸡球虫的试验研究

2020-05-09陈永亮刘丹丹汪飞燕

家畜生态学报 2020年4期

陈永亮，刘丹丹，汪飞燕

(1.徐州生物工程职业技术学院，江苏徐州 221006；2．扬州大学兽医学院，江苏扬州 225009；3.江苏省高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，江苏扬州，225009)

球虫病作为鸡养殖尤其是平养或散养模式下一种常见的疾病，往往严重影响鸡的生长发育，并对养殖效益造成重大损失，需要在鸡生产中予以重点防治。目前防治鸡球虫病的主要药物还是盐霉素、马杜霉菌、地克珠利等抗球药，球虫已经产生了一定的耐药性，防治效果越来越差，而药物残留问题则越来越受到人们的关注。

有研究发现，植物提取物——青蒿素(ART)能减少感染鸡的粪便卵囊数，减轻肠道病变，且无明显的残留和毒副作用[1]，是一种可能替代抗球药的绿色兽药，而将抗菌增效剂三甲氧苄啶(TMP)与ART联合使用，还具有良好的抗球虫感染增效作用[2]。

本试验以柔嫩艾美耳球虫(Eimeriatenella)感染导致盲肠性球虫病为模型，观察鸡群发病和死亡情况，记录相对增重率、存活率、卵囊值、病变记分、血便数，计算抗球虫指数(ACI)，研究ART与另一种常见抗菌增效剂二甲氧苄啶(DVD)联合应用在抗球虫方面的协同效应，以达到鸡生产中防治球虫病时减少抗菌增效剂使用及其残留的目的。

1 材料与方法

1.1 材料

青蒿素购于梯希爱(上海)化成工业发展有限公司，纯度97%以上；二甲氧苄啶购于武汉远成共创科技有限公司，医药级。

1.2 试验动物

1日龄健康黄羽肉鸡，购自中国农业科学院家禽研究所，饲养于经严格消毒且无球虫污染的动物房，同时饲喂无抗球虫药的全价饲料，自由采食和饮水。

1.3 试验虫种

柔嫩艾美耳球虫(Eimeriatenella)扬州株孢子化卵囊为扬州大学兽医学院寄生虫学教研室经单卵囊分离建株，经无球虫污染鸡传代保存。

1.4 试验方法

13日龄称重分组，共分为5个组，每组15只鸡，分组当天即用药，直至试验结束，具体分组情况和用药程序见表1。14日龄，各试验组每只鸡经嗉囊接种8×104个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊。感染期间观察各组鸡群发病情况，包括饮食、饮水、精神以及粪便性状等。感染84 h后，开始观察和记录血便情况、鸡只死亡情况，直至试验结束；感染114 h后，定时采集阳性对照组粪样检查卵囊，有卵囊排出时收集各试验组粪便，采用麦克马斯特法记录卵囊排出量；感染后192 h，所有试验组鸡只称重，剖杀，盲肠病变记分。试验期间，记录鸡只死亡情况，剖检观察病变。

表1 试验动物分组及用药程序Table 1 Experiment design and drug usage

1.5 数据统计分析

应用统计学分析软件SPSS 18中的Duncan新复极差法对各试验组鸡的平均增重与平均病变记分进行显著性分析。

1.6 判定标准

给药、攻虫期间，记录各试验组的相对增重率、存活率、卵囊值、病变记分、血便数，计算抗球虫指数(ACI)。

ACI在180以上时为高效，在160～180之间为中效范围，在120～160之间为低效。ACI=(存活率+相对增重率)-(病变值+卵囊值)。其中：

存活率(%)=存活鸡数÷开始鸡数×100%。

相对增重率(%)=用药组或感染不用药组鸡的平均增重÷不感染不用药组鸡的平均增重×100%。

血便记分：参照Morehouse和Baron(1970)[3]标准，自血便排出之日起，记录各组的血便总数。

病变记分：按Johson和Reid(1970)[4]标准，记录每组每只鸡的盲肠病变得分，进行SPSS分析，获得组平均病变记分。

病变值：每组的平均病变记分×10。

每鸡平均卵囊数：盲肠卵囊数按蒋金书等(1992)[5]的方法计算，根据每组的卵囊总数获得每组每只鸡的平均卵囊数。

卵囊值：按角田清(1983)[6]的方法计算，根据平均卵囊数获得。

2 试验结果

2.1 血便计分

各组血便排出情况与血便记分见表2。阳性对照组于感染后84 h开始出现血便，此时开始记录各试验组的血便数，直至感染后168 h各组停排血便。ART+DVD组血便数多于DVD组，少于ART组和阳性对照组。其中，DVD组血便数最少，其次为ART+DVD组、ART组、阳性对照组。

表2 各组血便情况Table 2 Record of bloody feces in each group

2.2 存活率、平均增重与相对增重率

各组的成活率、平均增重与相对增重率见表3。在存活率方面，ART+DVD组的存活率均为93.3%，ART组的存活率86.7%，阳性对照组的存活率为80%，DVD组和阴性对照组的存活率为100%。在平均增重方面，各用药组与感染不给药组相比均有差异；ART+DVD组的平均增重高于ART组，但差异不显著(P>0.05)；ART+DVD组低于DVD组，差异不显著(P>0.05)；ART组的平均增重低于DVD组，且差异显著(P<0.05)，低于感染不给药组，差异不显著(P>0.05)。其中，DVD组的平均增重率最高。在相对增重率方面，感染不给药组为81.41%，ART组、DVD组、ART+DVD组分别为72.41%、92.29%和77.87%。

2.3 病变记分与病变值

各组的平均病变记分与病变值见表4。ART组的平均病变记分与阳性对照组的相近，约为3.2，病变值约为32；ART+DVD组的平均病变记分略高于DVD组，但差异不显著(P>0.05)，低于ART组和阳性对照组，差异不显著(P>0.05)。

表3 各组存活率、平均增重与相对增重率Table 3 Mortality rate,average weight gain and relative weight gain of each group

注：同列数据上标不同小写字母者表示差异显著(P<0.05)。下同。

Note:Different lowercase letter superscripts in the same column mean significant difference (P<0.05).The same below.

表4 试验各组平均病变记分与病变值Table 4 Pathological score and pathological value of each group

2.4 卵囊产量与卵囊值

各组每只鸡的平均卵囊产量与卵囊值见表5。阳性对照组每只鸡的平均卵囊产量最高，为0.78×108个卵囊，卵囊值为40。其次为ART+DVD组、ART组和DVD组，平均卵囊产量分别为0.57×108，0.55×108，0.46×108，对应卵囊值均为20。

2.5 抗球虫指数(ACI)

各组的抗球虫指数见表6。DVD组的抗球虫指数为145.99，属抗球虫低效。ART+DVD组和ART组的抗球虫指数分别为122.47和107.1。阳性对照组的抗球虫指数仅为89.71。

3 讨论与结论

本试验结果显示，在感染球虫84 h后，阳性组开始出现血便，感染168 h以后各试验组血便消失，在此期间，ART组和阳性对照组的食欲减退、精神萎靡，而其他组正常。其中ART+DVD组血便数高于DVD组，低于ART组和阳性对照组。存活率、病变记分、平均增重等结果显示，ART+DVD组低于DVD组，高于ART组。用药组卵囊产量与卵囊值均低于阳性对照组，但各用药组之间的卵囊产量与卵囊值比较接近。

从抗球虫指数看出，DVD以300 mg/kg饲料拌料，用药至试验结束，其抗球虫指数为145.99，具有低效抗球虫水平。而ART组(以300 mg/kg饲料拌料)和ART+DVD组(ART 150 mg/kg+DVD 150 mg/kg饲料拌料)的抗球虫指数分别为107.1和122.47，抗球虫效果较小。但较ART组，ART+DVD组在病变值、卵囊值、血便值等指标效果较好，且更接近于DVD组。

研究结果表明，ART+DVD组的抗球虫效果高于ART组，低于DVD组；ART单独使用时抗球虫效果一般，ART与DVD混用时，不仅增强了抗球虫效果，更可以降低DVD的用药量，降低了药物残留的可能性。但ART无论是单独使用或是与DVD联合应用，抗球虫指数均未达到高效作用，与有关研究有差异[7-8]，这可能与鸡拌料中ART的添加比例有关。另外，为了切实发挥并进一步增强ART联合DVD在抗鸡球虫病的效果，还需要在两者配伍比例、使用方法等方面作深入研究。