雄激素受体在浸润性乳腺癌基于免疫组织化学的分子亚型中的表达及意义

2020-05-03陈艳宇周扬帆李亦明钟碧玲王贵明

中国医学创新 2020年6期

陈艳宇周扬帆李亦明钟碧玲王贵明

【摘要】目的：探讨雄激素受体在浸润性乳腺癌基于免疫组织化学的分子亚型中的表达及意义。方法：选取2017年1月-2018年12月在广东省第二人民医院手术切除的浸润性乳腺癌标本123例，运用免疫组织化学方法对雄激素受体（AR）的表达情况进行检测，观察AR、ER、PR、Ki-67、HER-2的阳性表达情况、AR与乳腺癌患者临床病理特征的关系、AR与乳腺癌分子亚型的关系，并分析其临床意义。结果：经过免疫组织化学检测后可知，AR的阳性表达率为82.93%;AR与淋巴结转移、ER、PR、Ki-67均有密切关联（P<0.05），AR与年龄、肿瘤大小、临床分期、组织分级、HER-2均无关联（P>0.05）;AR与Luminal A型、Luminal B型、HER-2过表达型、三阴性型均有密切关联（P<0.05）。结论：AR在乳腺癌组织中具有较高的表达率，在不同的分子亚型中AR的阳性表达率具有较大差异;AR阳性表达与ER、PR、Ki-67及腋淋巴结转移均有密切关联;同时AR可能将成为治疗乳腺癌的新一代靶向药物。

【关键词】雄激素受体浸润性乳腺癌免疫组织化学分子亚型表达意义

[Abstract] Objective： To investigate the expression and significance of androgen receptor in immunohistochemical molecular subtypes of invasive breast cancer. Method： A total of 123 invasive breast cancer specimens were obtained from Guangdong Second Provincial General Hospital from January 2017 to December 2018. The expression of androgen receptor （AR） was measured by immunohistochemistry. The positive expression of AR， ER， PR， Ki-67， HER-2， the relationship between AR and clinicopathological features of breast cancer patients， and the relationship between AR and molecular typing of breast cancer were observed， and its clinical significance was analyzed. Result： After immunohistochemical examination， the positive expression rate of AR was 82.93%. AR were closely related to lymph node metastasis， ER， PR and Ki-67 （P<0.05）， there were no correlation between AR and age， tumor size， clinical stage， tissue grade， HER-2 （P>0.05）. AR were closely associated with Luminal A， Luminal B， HER-2 overexpression and triple negative （P<0.05）. Conclusion： AR has a high expression level in breast cancer tissues， and the positive expression rate of AR is different in different molecular subtypes. AR positive expression are closely related to ER， PR， Ki-67 and axillary lymph node metastasis. At the same time， AR may become a new generation of targeted drugs for the treatment of breast cancer.

乳腺癌是一種十分常见的妇科疾病，并且也是一类具有高度异质性的激素依赖性肿瘤疾病，在病理组织学形态、分子遗传学改变、临床生物学行为等方面均有所不同[1]。2013年St Gallen指南将基于免疫组织化学的乳腺癌分子分型用于指导临床决策，具体如下：ER阳性，PR阳性≥20%，HER-2阴性且Ki-67阳性指数<20%定义为Luminal A型;Luminal B型在临床中包括两种类型，即ER阴性与ER阳性[2];HER-2过表达型定义为ER及PR阴性，HER-2阳性;ER、PR及HER-2均阴性定义为三阴性型[3]。雄激素受体（AR）属于核甾体激素受体家族，是信号通路的重要组成部分，同时作为重要的转录因子参与基因表达调控，其成员包括雌激素受体（ER）与孕激素受体（PR）[4]。目前诸多研究显示，ER与PR的表达与乳腺癌较好的预后相关，但关于AR在乳腺癌不同分子亚型中的表达目前国内研究较少，因此尚未能明确AR与乳腺癌患者临床病理特征、乳腺癌分子亚型的关系[5-6]。本文将探讨雄激素受体在浸润性乳腺癌基于免疫组织化学的分子亚型中的表达及其意义，以期分析AR与乳腺癌发生、发展及预后的关系，为乳腺癌个体化治疗寻找潜在有效的治疗靶点。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2017年1月-2018年12月在广东省第二人民医院手术切除的浸润性乳腺癌标本123例。（1）纳入标准：①均符合《乳腺肿瘤组织学分类》第四版中关于乳腺癌的临床诊断标准[7];②入院前未接受过其他方式的治疗。（2）排除标准：①无法配合完成研究;②患有其他恶性肿瘤疾病。该研究已经伦理学委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 试剂选择 AR（EP120，北京中杉金桥生物技术有限公司），ER（SP1，福州迈新生物技术开发有限公司），PR（PgR636，DAKO公司），HER-2（4B5，Roche Ventana公司），Ki-67（MIB1，DAKO公司）;DAB检测试剂盒、苏木素及返蓝液均购自Roche公司。

1.2.2 免疫组织化学染色检测收集所有组织标本均经10%中性甲醛溶液固定，常规脱水、浸蜡及包埋，3 μm厚连续切片，常规苏木精-伊红染色后光镜下观察肿瘤组织学类型、分级等。免疫组织化学染色使用Ventana Benchmark XT全自动免疫组化机（Roche公司）进行检测，所有的免疫组化玻片右侧均贴有组织芯片，用已知阳性/阴性组织设立阳性/阴性对照。

1.2.3 结果判定经过检测可知，共检测出四个分子亚型，主要包括Luminal A型、Luminal B型、HER-2过表达型与三阴性型。ER与PR阳性标准为≥1%的肿瘤细胞核阳性染色。AR阳性标准为≥10%的肿瘤细胞核阳性染色。HER-2阳性定义为IHC3+或FISH+。

1.3 观察指标观察AR、ER、PR、Ki-67、HER-2的阳性表达情况，AR与乳腺癌患者临床病理特征的关系，AR与乳腺癌分子亚型的关系。

1.4 统计学处理采用SPSS 20.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验及Fisher确切概率法。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 123例患者基本情况 123例患者，年龄30～78岁，平均（54.1±4.9）岁;>50岁78例，≤50岁45例;组织学类型：浸润性导管癌115例，浸润性小叶癌2例，髓样癌2例，筛状癌2例，黏液癌2例;分子分型：Luminal A型15例，Luminal B型68例，HER-2过表达型22例，三阴性型18例;组织分级：Ⅰ级27例，Ⅱ级67例，Ⅲ级29例;临床分期：Ⅰ期20例，Ⅱ期75例，Ⅲ期28例;肿瘤大小：T1 18例，T2 54例，T3 30例，T4 21例。

2.2 AR、ER、PR、Ki-67、HER-2的阳性表达情况在123例患者中，AR阳性患者共102例，占82.93%;ER阳性患者共84例，占68.29%;PR阳性患者共59例，占47.97%;Ki-67阳性患者共99例，占80.49%;HER-2阳性患者共32例，占26.02%。

2.3 AR与乳腺癌患者临床病理特征的关系经过临床分析可知，AR与淋巴结转移、ER、PR、Ki-67均有密切關联（P<0.05），与年龄、肿瘤大小、临床分期、组织分级、HER-2均无关联（P>0.05），见表1。

2.4 AR与乳腺癌分子分型的关系情况 AR与乳腺癌分子亚型有密切关联（字2=82.361，P=0.000），见表2。

3 讨论

浸润性乳腺癌起源于乳腺实质上皮细胞，是严重危害女性健康的最常见恶性肿瘤之一[8];由于个体化精准医疗模式需要，仅评估乳腺癌传统指标，已不能全面充分地反映乳腺癌的生物学特征及预后转归[9]。随着研究的不断深入与检测技术的不断发展，目前临床已开始对浸润性乳腺癌的分子分型进行研究，以便对乳腺癌的发病机制进行有效的明确，从而能够予以良好的治疗[10]。

依据国外学者的一项研究表明，乳腺癌的基因表达谱在同一肿瘤中具有稳定的表达特点，而在不同肿瘤之间则具有不同的表达特点，从而得出在不同肿瘤之间具有明显差异表达的“固有基因亚群”的结论[11]。因此，临床中将乳腺癌分为ER阳性组与ER阴性组，对于ER表达阳性乳腺癌，其基因表达具有与乳腺腔上皮细胞较为相似的表达特点，此种类型被称为腔上皮型乳腺癌（Luminal型），并且随着研究的不断深入，Luminal型又被细化为Luminal A型（ER阳性/HER-2阴性）与Luminal B型（ER阳性/HER-2阳性）[12];对于ER表达阴性乳腺癌，则主要分为HER-2阳性型与三阴性型[13]，这成为乳腺癌分子分型的基础。近年来，采用2013年St Gallen国际共识推荐的免疫组织化学替代分型，令临床研究工作更加实用、经济。

乳腺癌是一种激素依赖性肿瘤，其发病机制中多种激素共同参与，并且各因素之间具有紧密关联[14]。ER与PR表达已成为乳腺癌患者的常规检测项目，而雄激素与AR在乳腺癌中的生物学作用尚未明确。近几年相关报道显示，伴随着雄激素水平的增高，乳腺癌的发病率不断增加，两者之间具有显著的关联[15]。在乳腺癌的发生与发展过程中，雄激素不仅具有协同作用，同时还能间接转化为雌激素，从而参与疾病的发展[16]。除此之外，相关研究显示，AR在ER阳性乳腺癌中的表达可能是另外一种激素反应标志物，而在ER阴性乳腺癌中的表达则可能是一种治疗靶分子[17]。

本研究结果显示，HER-2在乳腺癌组织中的阳性率达26.02%，HER-2阴性与阳性乳腺癌中，AR的阳性率无差异（P>0.05），与目前的临床研究结果相似[18]。国外学者的研究表明，在ER阴性乳腺癌中AR表达与HER-2过表达密切关联，而在ER阳性乳腺癌中AR表达并未与HER-2具有关联性。基于此，AR是否为预后因素或治疗的分子靶点，以及AR与HER-2在这些特殊亚群信号通路的相关性尚未有统一的定论[19]。

本研究结果显示，AR的阳性表达率在三阴性型最低。众所周知，三阴性乳腺癌患者复发率和病死率较高，目前尚无有效的内分泌、靶向治疗药物，仍以化疗为主要的辅助治疗方法。依据相关的临床研究显示，与AR阴性相比，AR阳性的三阴性乳腺癌患者复发、转移、死亡率均较低，有相对更好的预后[20]。因此，AR在三阴性乳腺癌中的表达，提示AR可能作为乳腺癌新的治疗靶点，也可能是患者预后与转归的良好判断指标。但也有国外学者研究显示，AR的表达率与患者的生存无显著关系。故AR在三阴性乳腺癌中的作用尚未有统一定论，仍然需要进行更加深入与前瞻性的研究，以进一步明确雄激素与AR在三阴性乳腺癌发病机制中所扮演的角色。

本研究结果显示，AR与年龄、肿瘤大小、临床分期与组织分级均无显著关联（P>0.05），与相关学者的研究结果相近，但由于样本容量的局限，使得检测结果仍然存在较大的差异。

综上所述，AR在乳腺癌患者的阳性表达率较高，且AR与ER、PR、Ki-67、淋巴结的转移均有密切关联，而与年龄、肿瘤大小、临床分期与组织分级均无显著关联，但AR在乳腺癌发生发展中的作用机制尚未完全阐明，AR能否成为新一代的靶向治疗药物，但有待于进一步的深入研究。

参考文献

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