血清VEGF、CYFRA21-1水平变化与浸润性膀胱癌患者临床分期的关联性分析

王利霞

（河南省安阳市人民医院检验科，河南 安阳 455000）

膀胱癌为泌尿系统多发恶性肿瘤疾病,且具备多发性、易复发及预后差等特征，研究指出，膀胱癌病灶处于膀胱黏膜，致病因素较复杂，且受生活方式、遗传及环境等诸多因素影响，其发病率不断增高，患者多伴有不同程度无痛性肉眼血尿、尿失禁、尿频尿急等，对患者身心健康及生活质量造成了巨大威胁[1,2]。参照膀胱癌浸润程度不同，临床将其分为浅表性及浸润性膀胱癌类型,其中浸润性膀胱癌恶性程度较高，且手术治疗难度较大，术后疾病复发率较高，预后不佳，故如何对疾病予以早期诊断成为研究热点,且对改善疾病整体治疗效果与预后具有积极意义。血清指标检测为浸润性膀胱癌重要诊断措施,其中细胞角蛋白片段19抗原21-1（Cytokeratin fragment 19 antigen 21-1,CYFRA 21-1）较常用，其主要分布于上皮细胞，而膀胱癌发病后，CYFRA21-1表达水平增高，并持续释放至外周血内，故可用于疾病诊断[3]。此外，相关研究指出，血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）可增加血管通透性，加速新生血管生长，于多种恶性肿瘤中均呈高表达状态，且和肿瘤生物学行为具有密切相关性,故在膀胱癌诊断中也具有一定诊断价值[4-6]。本研究选取我院83例不同临床分期浸润性膀胱癌患者,探讨CYFRA21-1、VEGF含量与临床分期关联性。报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016年11月-2018年9月我院83例不同临床分期浸润性膀胱癌患者设为恶性组，另选取同期收治的83例膀胱良性肿瘤疾病患者设为良性组、83例健康体检者设为健康组。恶性组男 51 例,女 32 例；年龄 43～81 岁,平均（62.18±10.09）岁；临床分期：Ⅰ期11例、Ⅱ期28例、Ⅲ期31例、Ⅳ期13例；远处转移情况：转移26例，未转移57例；组织分化程度：高中分化44例，低分化39例。良性组男49例，女34例；年龄41～83岁，平均（61.86±9.89）岁。 健康组男 47例，女 36例；年龄39～82 岁，平均（61.75±10.32）岁。 三组基线资料无显著差异（P＞0.05），且本研究经我院伦理协会审批通过。

1.2 方法

1.2.1 纳入标准 ⑴恶性组经病理检查确诊为浸润性膀胱癌；⑵既往均无膀胱手术治疗史者；⑶所有受检者均知晓本研究，签署同意书。

1.2.2 排除标准 ⑴纳入研究前3个月内采取放化疗治疗者；⑵合并其他泌尿系统病变者；⑶合并全身性重度感染性疾病者；⑷合并肝肾功能重度障碍者；⑸合并血液系统、免疫系统重度病变者；⑹合并其他恶性肿瘤者；⑺长期采取免疫抑制剂、激素药物治疗者。

1.3 方法 入院后第2d晨起时抽取各组空腹静脉血 4 ml，离心（3000 r/min，10 min）处理，取上清液，置于-80℃环境中储存待检；以美国Bio-RAD公司Bio-RAD550型酶标仪与配套试剂盒经酶联免疫吸附法测定血清VEGF水平；以美国雅培公司生产的AXSYM全自动化学发光免疫分析仪与配套试剂盒以化学发光免疫法测定血清CYFRA21-1水平。

1.4 观察指标 ⑴统计分析三组血清CYFRA21-1及VEGF水平。⑵统计分析恶性组不同远处转移浸润性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平。⑶统计分析恶性组不同分化程度浸润性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平。⑷统计分析恶性组不同临床分期患者血清CYFRA21-1及VEGF水平。⑸统计分析血清CYFRA21-1及VE GF水平与浸润性膀胱癌临床分期间相关性。

1.5 统计学方法 通过SPSS18.0对数据进行分析，计量资料采用(x±s)表示，偏态分布采取秩和检验，正态分布采取t检验，多组间比较采用单因素方差分析，多重比较采用LSD-t检验,计数资料n（%）表示,χ2检验,血清CYFRA21-1及VEGF水平与浸润性膀胱癌临床分期间相关性以Pearson予以分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组血清CYFRA21-1及VEGF水平 单因素方差检验可知，三组血清CYFRA21-1及VEGF水平间存在显著差异（P＜0.05）；多重比较，良性组血清CYFRA21-1及VEGF水平高于健康组（P＜0.05）；恶性组血清CYFRA21-1及VEGF水平高于良性组（P＜0.05）。 见表 1。

表1 三组血清CYFRA21-1及VEGF水平比较(x±s)

2.2 不同远处转移浸润性膀胱癌血清指标水平发生远处转移的浸润性膀胱癌患者血清CYFRA2 1-1及VEGF水平高于未发生远处转移的浸润性膀胱癌患者（P＜0.05）。 见表 2。

表2 不同远处转移浸润性膀胱癌血清指标水平比较(x±s)

2.3 不同分化程度浸润性膀胱癌血清指标水平低分化浸润性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平高于高中分化浸润性膀胱癌患者 （P＜0.05）。 见表 3。

表3 不同分化程度浸润性膀胱癌血清指标水平比较(x±s)

2.4 不同临床分期浸润性膀胱癌患者血清指标水平 单因素方差检验可知，不同临床分期浸润性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平间存在显著差异（P＜0.05）；多重比较，Ⅳ期浸润性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平高于Ⅲ期患者 （P＜0.05）；Ⅲ期浸润性膀胱癌患者血清CYFR A21-1及 VEGF 水平高于Ⅰ+Ⅱ期者（P＜0.05）。 见表4。

表4 不同临床分期浸润性膀胱癌患者血清指标水平比较(x±s)

2.5 血清指标水平与浸润性膀胱癌临床分期间相关性 经Pearson检验可知,血清CYFRA21-1及VEGF水平与浸润性膀胱癌临床分期间存在显著正相关关系（P＜0.05）。 见表 5。

表5 血清指标水平与浸润性膀胱癌临床分期间相关性分析（n=83）

3 讨论

膀胱癌为泌尿系统多发恶性肿瘤,其中浸润性膀胱癌恶性程度较高，生物学特性较复杂，当前临床多采取组织活检病理检查及膀胱镜检对浸润性膀胱癌予以诊断，虽具有一定应用价值，但其属侵袭性检查，且费用较高，诊断过程中易增加患者不适感[7,8]。CT及超声等影像学检查措施在浸润性膀胱癌临床诊断中也较常用，但针对早期患者，其敏感度及准确度较低，漏诊率与误诊率较高，易致使患者错失最佳治疗时机,而尿液内脱落细胞学检查敏感性也较低，假阴性率与假阳性率较高[9]。同时，若浸润性膀胱癌患者未及时得到有效干预,则易对疾病整体疗效与预后效果产生不利影响,故如何对疾病及临床分期予以准确诊断、评估仍是研究热点。

CYFRA21-1为新型上皮来源性质肿瘤标志物，其是CK-19全长片段，为CK家族重要成员，CK为分布于所有上皮细胞内的细胞结构蛋白类型,角蛋白水平能敏感反映细胞分化及肿瘤发生等[10,11]。相关研究表明,正常生理状态下，CYFRA21-1主要以寡聚物形式存在，表达水平较低，而发生浸润性膀胱癌后，细胞死亡后，活化的蛋白酶可加快细胞降解，使可溶性CK-19片段大量释放，进而增加血液CYFRA21-1血清水平[12,13]。CK-19属角蛋白亚基，其分子量约40 KD，CK-19可溶性片段上两个抗原决定簇能特异性结合于两个单克隆抗体KS19-1及BM19-21，即CYFRA21-1，并主要分布于单层上皮细胞及鳞状上皮细胞。国外相关研究证实，肺癌、卵巢癌及膀胱癌等诸多恶性肿瘤患者血清CYFRA21-1表达水平均异常增高，故可用于浸润性膀胱癌临床诊断，且在疾病发生及进展、疗效与预后评估中也具有一定应用价值[14]。 本研究中,恶性组血清CYFRA21-1水平高于良性组及健康组,且发生远处转移者及低分化浸润性膀胱癌患者血清CYFRA21-1水平增高幅度更加显著 （P＜0.05），与上述学者观点具有一致性。

浸润性膀胱癌肿瘤病灶血管生成在肿瘤发生、进展过程中极为重要，若无新生血管形成，则单个肿瘤克隆灶体积通常≤2 mm3，而VEGF为当前临床所发现的最重要血管生成因子,多将其作为肿瘤转移、代谢等标志物[15,16]。此外，微血管生成和肿瘤持续生长及转移、侵袭关系密切，受部分基质水解酶影响,肿瘤细胞自身既可降解基底膜MMPs,还可活化VEGF等，间接促进血管内皮细胞产生MMPs，并降解细胞外基质、基底膜等，以此加快肿瘤新生血管形成。由本研究结果可知，恶性组血清VEGF水平高于良性组及健康组，且发生远处转移者及低分化浸润性膀胱癌患者血清VEGF水平高于未转移及高中分化者（P＜0.05）。VEGF可结合于受体后特异性作用于血管内皮，增加血管通透性，促进血管内皮细胞增殖，加快新生血管形成，研究指出,VEGF为功能较强,同时能造成多种生物学效应的一种细胞因子，为PDGF（血小板衍生生长因子）家族重要成员，在肿瘤发生及转移等中均具有重要作用[17,18]。此外，VEGF为二硫键交联产生的一种同源二聚体糖蛋白，肺泡及气道上皮细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、巨噬细胞、血管及气道平滑肌细胞、间叶细胞样细胞等均可生成VEGF，其具备多种生物学功能,如促进血管生成及内皮细胞增殖、血管维持、提高血管通透性等。另有相关研究指出,VEGF为多功能细胞因子,可诱导内皮细胞增生，促进肿瘤内新生血管生成，提高肿瘤血管通透性及癌细胞浸润能力,加速恶性肿瘤进展与转移[19,20]。郑元振学者[21]研究结果表明，血清CYFRA21-1及VEGF水平动态监测在浸润性膀胱癌病理特征与预后评估中具有重要作用。本研究结果显示，不同临床分期浸润性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平间存在显著差异，且增高幅度随临床分期增高而增高,其血清含量与疾病临床分期间存在明显负相关系（P＜0.05），提示临床可通过测定血清CYFRA21-1及VEGF水平评估浸润性膀胱癌临床分期情况，以此为临床制定、调整治疗方案提供一定参考依据,对改善疾病整体治疗效果与预后具有重要作用。

综上所述,浸润性膀胱癌患者VEGF及CYFR A21-1血清含量显著增高,于发生远处转移及低分化者中增高幅度更加显著,且其表达水平随浸润性膀胱癌临床分期增高而增高,两者间存在显著正相关系。