小儿氨酚黄那敏颗粒溶出度的研究及评价

★ 宋晓园 赖佐发 廖婷 吴晓勇（赣州市食品药品检验检测中心 江西 赣州 341000）

小儿氨酚黄那敏颗粒收载于《国家药品标准》化学药品地方标准上升国家标准第三册［1］，其处方为对乙酰氨基酚125g，人工牛黄5g，马来酸氯苯那敏0.5g，辅料适量制成1000袋，为抗感冒药［1］。感冒是儿童的四季常见病多发病，因此抗感冒咳嗽药物是目前儿童药品市场的当家品种，而小儿氨酚黄那敏是国内重点城市药店零售市场居第一位的小儿感冒用药［2］。现行标准［1］及征求意见稿［3］无溶出度检查，目前报道多关于含量测定［4-6］，未见溶出度，本文参考标准［7-8］、文献［9-10］及普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则［11］建立高效液相色谱法测定小儿氨酚黄那敏颗粒中主要成分对乙酰氨基酚的溶出度，并对市场上10个不同厂家的13批次样品进行溶出度测定，为今后该品种标准提高提供一定的依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Waterse2695高效液相色谱仪［2998 PDA Detector、Empower工作站，沃特世科技（上海）有限公司］；T9CS双光束紫外可见分光光度仪（北京普折通用仪器有限责任公司）；XSE205DU型电子天平［梅特勒-托利多（瑞士）］；RC8MD智能溶出试验仪（天津市天大天发科技有限公司）；KQ600KDB超声波清洗器（昆山市超声仪有限公司）；Agilent1260高效液相色谱仪（DAD检测器，安捷伦科技公司）。

1.2 试药 对乙酰氨基酚（中国食品药品检定研究院，批号：100018-201610，供HPLC法测定，按C8H9NO2计，含量为99.9%）；甲醇为色谱纯，水为纯化水，其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性 色谱柱：Welch Ultimate®XB-C18（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：0.05mol/L乙酸铵∶甲醇（80∶20）；流速：1.0mL/min；检测波长：244nm；柱温：35℃；进样量：10μL。理论板数按对乙酰氨基酚峰计算不低于5000，对乙酰氨基酚峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取对乙酰氨基酚对照品0.02531g，置100mL量瓶中，加溶出介质（以稀盐酸24mL加水至1000mL）超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对乙酰氨基酚对照品储备液。

2.3 供试品溶液的制备 照溶出度与释放度测定法（通则0931第二法桨法）［12］，以稀盐酸24mL加水至1000mL为溶出介质，转速为50r/min，测定温度为37℃±0.5℃，依法操作，经20min时，取溶出液10mL，滤过，作为供试品溶液。

2.4 阴性样品溶液的制备 按照药品说明书称取辅料适量，配制不含对乙酰氨基酚的阴性样品溶液，按2.1测定方法测定，结果阴性样品在对乙酰氨基酚的峰位上未出现色谱峰，说明阴性样品无干扰，见图1。

图1 HPLC高效液相图谱

2.5 线性关系考察 精密量取对2.1项下的乙酰氨基酚对照品储备液适量，用溶出介质分别稀释成0.2278、0.1772、0.1266、0.07593、0.02531mg/mL 的对乙酰氨基酚对照品溶液，分别进样10μL，测定。以进样量（mg）为横坐标，对乙酰氨基酚的峰面积为纵坐标绘制标准曲线，计算对乙酰氨基峰的回归方程及相关系数r，为Y=38794799X+5487，r=1.0000。结果表明对乙酰氨基酚在0.02531～0.2278mg/mL范围内线性关系良好。

2.6 精密度试验 取2.5项下的0.1266mg/mL的对乙酰氨基酚对照品溶液，精密量取10μL注入液相色谱仪，连续进样6次，测得对乙酰氨基酚的峰面积RSD为0.033%， 表明精密度良好。

2.7 重复性试验 取供试品（批号18042902）进行六次溶出度试验，测得六次的平均溶出量分别为96%、96%、97%、98%、97%、96%，RSD为0.84%，表明方法重复性良好。

2.8 稳定性试验 取供试品（批号18042902）一袋，按2.3项下供试品溶液的制备同法制备溶液，按2.1项下的色谱条件，分别于制备后0、1、2、3、4、5、6、7、8h测定，记录对乙酰氨基酚峰面积并计算其RSD为0.19%，结果显示供试品溶液在溶出取样后8h内具有良好的稳定性。

2.9 回收率试验 按供试品（批号18042902）说明书处方称取空白辅料，精密加入相当于标示量（125mg）80%，100%，120%的对乙酰氨基酚对照品，各制备3份，按2.3供试品溶液的制备制成供试品溶液，按2.1项下的色谱条件测定峰面积，结果对乙酰氨基酚的回收率为96.81%～99.80%，平均回收率为98.62%，RSD=1.0%，表明该方法回收率良好。见表1。

表1 对乙酰氨基酚回收率试验结果

2.10 中间精密度试验 分别于不同日期，不同检验人员，不同高效液相色谱仪（Waters及Agilent）对批号18042902的样品进行溶出度测定，平均溶出量的RSD分别为0.85%，0.82%，0.59%，表明方法中间精密度良好。

2.11 溶出条件的选择

2.1 1.1 溶出介质及时间的选择 参照《中国药典》标准［8］对乙酰氨基酚片、胶囊、颗粒均采用盐酸溶液（取稀盐酸24mL，加水稀释至1000mL）为溶出介质，再参照《普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则》［11］，选用以下四种溶出介质进行考察：纯化水；pH4.5的醋酸盐缓冲液；pH6.8的磷酸盐缓冲液；盐酸溶液（取稀盐酸24mL，加水稀释至1000mL）。取供试品（批号18042902）按通则0931第二法桨法［12］，溶出介质1000mL，转速50r/min，测定温度37℃±0.5℃，依法操作，分别经5、10、15、20、30、45、60min时，取溶出液10mL，滤过，作为供试品溶液。以时间为横坐标，以取样时间点的平均溶出量（%）为纵坐标绘制溶出曲线。见图2。

结果表明小儿氨酚黄那敏颗粒在以上四种溶出介质中溶出曲线很相似，说明溶出介质的pH值对其无显著影响，所以选择与药典［8］相同的溶出介质，即盐酸溶液（取稀盐酸24mL，加水稀释至1000mL）；供试品在20min时到达平稳期，20min和30min连续两个时间点的溶出量达到90%以上，且差值在5%以内，选择溶出时间为20min。

图2 溶出曲线

2.1 1.2 转速的选择 采用桨法，分别选择50r/min及75r/min两种转速，分别经5、10、15、20、30、45、60min时，取溶出液10mL，滤过，作为供试品溶液。以时间为横坐标，以取样时间点的平均溶出量（%）为纵坐标绘制溶出曲线。见图3。结果表明增加转速能使供试品在5min时的溶出量提高，但是样品在20min时无论选择50r/min或75r/min溶出量均能达到标示量的90%以上，根据普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则［11］，50r/min可以满足方法的要求，选择转速为50r/min。

图3 溶出曲线

2.12 样品测定 按正文测定方法分别对2018年所抽检的10个厂家的13批样品进行溶出度的测定，测定结果见表2。结果表明各厂家的平均溶出量均大于标示量的85%。

表2 13批供试品测定结果

3 讨论

3.1 波长选择 精密称取对乙酰氨基酚适量，加溶剂（以稀盐酸24mL加水至1000mL）制成浓度为6.25μg/mL的溶液，以溶剂（以稀盐酸24mL加水至1000mL）为空白，在200nm～400nm波长范围内进行光谱扫描，结果在244 nm波长处有最大吸收；同时取2.6项下的对照品溶液用二极管阵列检测器在200～400nm范围内进行光谱扫描，结果在244nm波长处有最大吸收；结果与文献［9］相同。选择检测波长为244nm。

3.2 流动相的选择 参考文献［9-10］的流动相选择及征求意见稿［3］中检查项下的流动相选择，采用甲醇-水（80∶20）为流动相时，溶出介质峰过大，采用0.05mol/L乙酸铵：甲醇（80∶20）为流动相，溶出介质峰基本无影响，与其他的杂质组分分离完全，理论板数大于5000，拖尾因子在0.95-1.05之间，峰形良好。

3.3 耐用性试验 改变柱温、改变流速、改变流动相比例，使用不同品牌色谱柱分别对样品（批号18042902）的平均溶出量进行测定，并对主成分色谱峰情况进行观察，结果如下：柱温在±5℃范围内（30～40℃）峰形均良好，平均溶出量的RSD%=0.23%；流速在±0.1mL/min范围内（0.9～1.1mL/min），峰形均良好，平均溶出量的RSD%=0.42%；改变流动相比例，使甲醇比例为14%，20%，26%，峰形均良好，平均溶出量的RSD%=0.98%；不同品牌C18柱（①Welch Ultimate®XB-C18；②Thermo BDS HYPERSIL C18；③DiKMA Platisil 5μm ODS；④ SHIMADZU-GL Inertsil ODS-3）峰形均良好，平均溶出量的RSD%=0.51%。结果表明该方法耐用性良好。

3.4 方法讨论 由于标准［1］规定本品含对乙酰氨基酚（C8H9NO2）应为标示量的95.0%～105.0%，所以各厂家的溶出度普遍接近含量，但是通过样品测定结果可以看出，同厂家的溶出度批间差异不大，但是各个厂家之间的溶出度差异比较明显，这是由于不同的处方量及其生产工艺造成的，因此本方法具有一定的区分能力。可以为完善小儿氨酚黄那敏颗粒的质量标准提供依据。