化瘀调脂方对高脂血症大鼠降脂作用的实验研究*

安建峰，孙 烨，刘季元

1.西安交通大学附属西安市儿童医院中西医结合科(西安710002)； 2.西安交通大学第一附属医院中医科(西安710061)；3.陕西省中医医院老年病科(西安710003)

高脂血症是以血清总胆固醇 (Total cholesterol，TC)和低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoprotein-C，LDL-C)升高为特点的脂类代谢异常性疾病[1]，是严重心脑血管疾病的独立危险因素。高脂血症可以引起血液流变学异常，动脉内皮功能损害，从而引起NO释放减少，产生超氧阴离子自由基，促使缺血性脑血管病发生。临床常用治疗高脂血症的西药主要有他汀类、贝特类等，虽然降脂效果明显，但是近年研究发现他汀类药物可能引发肝损伤、横纹肌溶解、肌肉痉挛、新发肿瘤和糖尿病等不良反应[2-4]。近年来中药治疗高脂血症因其标本同治、规避肝损伤等优势越来越受到重视，目前已知约 130 多种中草药有降脂的作用[5]。本研究旨在观察化瘀调脂方对高脂血症大鼠脂质、血清NO和SOD水平的影响。

材料与方法

1 实验材料

1.1 实验动物：SD健康雄性大鼠60只，体重(190±10) g。

1.2 化瘀调脂方水煎剂的制备：化瘀调脂方由用黄芪、红花、茯苓、丹参、山楂、薏苡仁、西洋参、白术、泽泻、何首乌组成(药材均购自西安市药材公司)。水煎,过滤,浓缩,配制成浓度为400%、200%、100%的药液，分装加盖密封，灭菌后，4 ℃贮存备用。

1.3 药品和试剂：TC、TG检测试剂盒及NO、SOD检测试剂盒，分别购自中生北控生物科技股份有限公司及南京建成生物工程研究所。非诺贝特片购自上海衡山药业有限公司。

2 实验方法

2.1 实验分组：SD健康雄性大鼠按体重随机分为六组：化瘀调脂方高、中、低剂量组、空白组对照、高脂血症模型组、非诺贝特组，每组各10只。

2.2 造模及处理方法：60只SD大鼠常规饲养1周，禁食12 h，剪尾采血，检测基础血脂，组间无统计学差异，开始动物造模。空白对照组给予10 ml/(kg·d)生理盐水灌胃，其余各组大鼠每天一次给予高脂乳剂10 ml/(kg·d)灌胃，饮水不限，共计38 d。造模第11天开始，按药理实验方法学[5]计算，化瘀调脂方高、中、低剂量组分别按1 ml/100 g体重给予化瘀调脂方400%、200%、100%药液灌胃。非诺贝特配成1.4 mg/ml浓度，按1 ml/100 g体重剂量每天一次灌胃[6]。高脂血症模型组、空白对照组按1 ml/100 g体重剂量给予生理盐水每天一次灌胃。连续给药28 d，各组均自由饮水和进食。

3 标本采集 末次给药后禁食12 h以上，麻醉后从腹主动脉取血，放置2 h左右，待凝后经转速为3000转/分离心15 min，取血清置-20℃冻存备检。

结 果

1 各组对血脂水平的影响 见表1。高脂血症模型组大鼠血清TG、TC水平明显高于空白组，表明动物模型复制成功。化瘀调脂方各剂量组及非诺贝特组血清TG、TC水平均明显低于模型组。高剂量组TG、TC与中、低剂量组差异有统计学意义(P<0.05)。高剂量组TC与非诺贝特组差异有统计学意义(P<0.05)，TG与非诺贝特组差异无统计学意义(P>0.05)。中剂量组TC水平与低剂量组差异有统计学意义(P<0.05)，TG水平与低剂量组、非诺贝特组差异均无统计学意义(P>0.05)。低剂量组TG与非诺贝特组差异有统计学意义(P<0.05)。结果表明化瘀调脂方有明显的降脂作用并有一定的量效关系。

注:与模型组相比,*P<0.05，#P<0.01

2 各组对NO、SOD的影响 见表2。高脂血症模型组大鼠血清NO、SOD水平显著低于空白组(P<0.01)，化瘀调脂方高、中、低剂量组及非诺贝特组血清NO、SOD水平明显高于模型组(P<0.05)。高剂量组NO水平高于中、低剂量组及非诺贝特组(P<0.05)。中剂量组NO水平高于低剂量组(P<0.05)。中、低剂量组NO水平与非诺贝特组差异无统计学意义(P>0.05)。高剂量组SOD水平高于低剂量组及非诺贝特组(P<0.05)。中剂量组SOD水平高于低剂量组(P<0.05)。高、中剂量组之间，中、低剂量组与非诺贝特组SOD水平差异无统计学意义(P>0.05)。表明化瘀调脂方可以提高高脂血症动物血清NO、SOD水平。

表2 各组对血清NO、SOD的影响(mmol/L)

注：与模型组相比，*P<0.05，#P<0.01

讨 论

高脂血症属中医学“痰湿”、“血瘀”范畴。它的主要危害是导致动脉粥样硬化，进而导致众多的相关疾病。高脂血症能使大鼠血清中SOD、NO降低，导致血管内皮损伤，使内皮 NOS(eNOS)储量和活性发生改变从而导致早期的动脉粥样硬化病变[6]。

化瘀调脂方由丹参、红花、山楂、黄芪、西洋参、白术、茯苓、薏苡仁、泽泻、何首乌为主组成。其中黄芪、丹参配伍提取物可显著上调大鼠CRP、PPARα、P38MAPK、NF-κB 基因和蛋白的表达，增强 TNF-α-TNFR-PI3K信号转导通路表达从而有效降低高脂饲料诱导的高脂血症模型大鼠 TC、TG、LDL 水平，提高 HDL 水平，具有明显的降脂作用[7-8]。红花的药理研究及动物实验均表明红花具有保护血管内皮、抗氧化损伤及降低血清胆固醇的作用[9-10]。山楂能阻断并减少自由基的生成，可通过降血脂、抗氧化、抑制炎症因子和活化调节因子的生成、抗血小板凝集等多种作用抗动脉粥样硬化[11-12]。西洋参可纠正血脂代谢紊乱，具有明显改善胰岛素抵抗大鼠脂代谢异常的作用[13]。白术精提物通过抑制肝脏中 HMG-Co A 还原酶来减少胆固醇合成，调节体内 LCAT，ACAT 水平来增加脂质代谢转运，能有效调节高脂大鼠血脂紊乱，尤其对升高 HDL-C 有显著疗效[14]。茯苓可以抑制高脂血症大鼠从对脂类物质的吸收，β-茯苓聚糖可加速机体脂类物质尤其是胆固醇的分解，从而促进机体体内的脂质代谢水平，阻止了脂类物质向动脉血管内膜的渗透，保护动脉血管的内皮细胞使其免受脂质氧化导致的损伤，从而减轻了动脉粥样硬化发展[15]。薏苡仁含有多种酯类及多糖，具有降压扩张血管等作用。泽泻醇提取物可以通过改变肠道菌群的丰度、多样性和功能类群等靶标有效降低高脂高糖饮食大鼠进行脂质代谢调节[16]。泽泻水煎液能显著降低高脂血症大 鼠血清中TC、LDL-C水平[17]。何首乌有效成分能够提高NO含量和SOD活性，能减轻高脂血症引发的脂质过氧化反应而具有明显的抗氧化作用[18]。综上，化瘀调脂方的基本组成成分可从多个途径调节脂质代谢。

高脂血症的中医病机，多数学者认为以肝、脾、肾等器官的脏腑功能失调为本，以痰瘀痹涩为标，瘀则生痰，痰则致瘀，互结于血脉之中发为本病。本虚标实是导致血脂异常的根本病机。化瘀调脂方中以丹参、红花为君药以化瘀通络，以黄芪、西洋参为臣药以益气，辅以薏苡仁、茯苓、白术、山楂健脾化湿祛浊，以何首乌补益气血，泽泻利湿泄浊，辅佐君臣共同发挥益气活血化痰之效。本实验研究结果显示化瘀调脂方具有调节脂类代谢的作用，且存在一定的量效关系。其机理可能在于化瘀调脂方可以提高SOD活性和NO的合成，从而维护体内自由基稳态与平衡，减少脂质过氧化物的产生，改善血管内皮细胞功能，阻止动脉管壁血栓及粥样斑块的形成。因此，在高脂血症及动脉粥样硬化症治疗以及对于脑血管的保护等方面均有重要意义。