小分子团磁化水提取金花茶活性成分

蔡豪斌，黄丽华，覃丽清，蒋丽香，黄喜善

（1.桂林师范高等专科学校化学与药学系，广西桂林541199；2.桂林普元生物技术有限公司，广西桂林541001）

金花茶（Camellia nitidissima C．W．Chi）为山茶科山茶属金花茶组植物，是我国广西特有珍稀古老茶树品种[1]。现代医药学研究发现金花茶含有茶多酚类、黄酮类、微量元素以及氨基酸等多种生物活性物质，其化学成分和药用价值的相关研究在诸多领域取得进展[2]。近年来，生物活性成分提取溶剂的研究发现一种新型非有机溶剂——小分子团磁化水[3]。这种溶剂具有进出细胞能力强、提取物溶出量大的特性。本文基于这一理论首次将小分子团磁化水引入金花茶叶活性成分提取的研究中，以探索其作为高效提取溶剂的实际意义。

一、实验方法

（一）试剂

小分子团磁化水由佛山市富鑫科技实业有限公司公司提供，超纯水、蒸馏水均为桂林师范高等专科学校化学药学系实验室制备。

95%乙醇、甲醇、聚酰胺粉、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、硫酸亚铁、酒石酸钾钠以及苯等，均为市售分析纯（AR）化学试剂。

（二）仪器

可见紫外分光光度计，型号：specord 200 plus，德国耶拿公司；超声波仪，型号：kQ5200Dv，昆山市超声仪器有限公司；电子天平（0.0001）；抽滤器；烘箱；2000mL圆底烧瓶。

（三）实验样品

广西中港高科金花茶产业集团提供金花茶样品。该样品采集于广西防城港十万大山大禄金花茶种植基地，为人工种植的防城港普通种金花茶，摘取二年生鲜叶供测试。

二、样品提取和测定

（一）样品预处理

金花茶鲜叶经蒸馏水洗净、晾干、去除叶梗，使用高速粉碎机粉碎，过筛，制成均匀干粉，然后置烘箱反复烘烤至恒重。每一个测试样品质量100 g干粉，分别置于2000 mL圆底烧瓶中，备用。

（二）两种溶剂的提取方法

1.浓缩液提取方法

称取同一干样粉料100g分别置于两个圆底烧瓶中，各加入1500mL溶剂（料液比1：15），其一为超纯水对照溶剂，另一为小分子团磁化水测试溶剂。在常温浸泡半个小时后转至90℃水浴锅提取2 h；室温下冷却后真空抽滤，测定滤液pH值。继而收集滤渣加溶剂定容到1200 mL（料液比1：12），如上法进行二次提取1.5 h，测定滤液pH。将两次滤液合并即得浓缩提取液。

2.浓缩固体物提取方法

将两次提取收集混合的滤液置水浴锅中加热蒸发浓缩，至一定体积后混合成一个样品，测定pH，继续在水浴锅上蒸发至干。此后，将干样转至烘箱分次缓慢烘干，温度为60℃，第1次3 h，第2次0.5 h，第3次0.5 h，以此类推，直至恒重为止，即为最终固态浓缩物，迅速放置于干燥器内保存，备用。

（三）总黄酮含量测定

取适当体积二次提取的样液采用芦丁比色法测定提取液总黄酮含量[4]。

（四）茶多酚含量测定

取4 mL二次提取合并的样液，使用分光光度法在540 nm波长测定吸光度，以每克干粉所含茶多酚重量表示（mg／g）[5]。

（五）固体物含量测定

使用感量0.0001电子天平称量经过烘干恒重的固体物，质量单位为mg。

三、结果与分析

（一）总黄酮和茶多酚提取率

总黄酮提取率以小分子团磁化水为高。而茶多酚的结果则以超纯水提取率为高。见表1。

表1 两种提取溶剂提取总黄酮和茶多酚结果比较

（二）浓缩固体物含量

在相同实验条件下比较两种溶剂的浓缩固体物提取率，结果见表2。对100 g干粉的提取效果分别为：超纯水3次提取的浓缩固体物重量分别为（g）14.17、14.36、14.17，期望值为 14.23，得率 14.23%（g／100 g）；小分子团磁化水为（g）22.48、21.38、20.88，期望值21.58，得率 21.58%（g／100g）。表明小分子团磁化水的固体物提取率高于超纯水。超纯水提取的方差为0.241，小分子团磁化水为0.490，两种提取方法的可信度均在允许范围之内，说明小分子团磁化水作为提取溶剂与超纯水比较具有相对稳定性。

表2 两种溶剂提取固态物结果比较

四、讨 论

普通天然水的结构是由100-200个水分子缔合成的大分子簇团，经过充分磁处理裂解分离成许多小分子团，富含小分子团的离子水被称为小分子团磁化水。这种小分子团磁化水的渗透性、溶解力和扩散力均强于大分子团水[6]。目前，小分子团磁化水已被应用于食品加工工艺，例如，在啤酒、豆乳、鱼贝类等加工过程引入小分子团磁化水替代普通天然水，以提升产品内在品质[7]；卷烟加工使用小分子团磁化水进行浸梗处理，发现在未经蒸梗工艺处理的条件下，烟梗回透率便可提升到99.3%[8]。小分子磁化水应用于提取芸豆清蛋白的比较研究是将60目粉料按22：1液料比在温度30℃下浸提2h，结果显示小分子团磁化水组提取率最高（48.96%），而自来水组为42.79%、纯净水组为40.87%[9]。本研究使用小分子团磁化水作为溶剂提取金花茶叶活性物质，在60℃水浴进行二次蒸馏，先后对3组样品分别提取出现相同的趋势：固体物和总黄酮得率均大于超纯水所得，如固体物依次为（超纯水／小分子 团 磁 化水，mg）14.17／22.48、14.36／21.38、14.17／20.88；总黄酮 1.49／1.95、1.89／2.60、1.48／2.36。但茶多酚得率则以超纯水为高，依次为 23.92／19.58、26.73／21.21、27.06／23.96。其机制有待研究。实验结果提示，小分子团磁化水应用于金花茶叶活性物质提取具有进一步研究的价值。