原子荧光光谱法测定川芎中硒的含量

曾晓丹，马明硕，金 星

(吉林化工学院 分析测试中心，吉林 吉林 132022)

硒(Se)是人体必需的微量元素之一，可以增强人体免疫力，预防癌症[1-4].硒是动物和人体中抗氧化酶和硒-P蛋白的重要组成部分[5]，对于体内氧化还原状态起着平衡的作用.同时，硒还参与许多生理活动，防止细胞膜受氧化损伤、参与甲状腺激素的代谢、DNA的合成以及可以抵抗感染等[6].

中药川芎是伞形科植物川芎的根茎，性温，味辛，微苦，具有活血行气祛风止痛的功效[7].目前对于川芎的研究主要集中在生物碱、含酚酸类及苯酞类等成分上[8-10]，但对于川芎中微量元素研究的比较少.通过对川芎微量元素的分析，可以对药材中的微量元素的含量进行准确地测定，同时也可以提高中药质量.本文应用原子荧光光谱测定了川芎中硒的含量，以期为研究川芎的药理药效提供更合理有效的数据.

1 实验部分

1.1 试剂与仪器

原子荧光分析仪(SK2003北京金索坤技术开发有限公司)，电子天平(AEG-220岛津制作所).硝酸、盐酸、氢氧化钾、硼氢化钾、过氧化氢、硫脲和抗坏血酸(天津永大化学试剂有限公司)等都为优级纯.实验用水为娃哈哈纯净水.

1.2 实验过程

1.2.1 仪器工作条件

表1为最优的仪器工作条件.

表1 仪器工作条件

1.2.2 样品前处理

准确称取三份0.500 0 g川芎样品，置于50 mL烧杯中，加入硝酸与过氧化氢混合液(5：1)10 mL，保鲜膜密封烧杯口，盖上表面皿，放置阴暗处12 h以上，冷消解过夜，同时做空白.次日在电炉上缓慢加热，此过程不断加入硝酸与过氧化氢混合物，直至溶液澄清透明，取下冷却，加入6 mol/L盐酸2 mL，加热煮沸5 min，冷却后移入20 mL比色管中，3 mol/L盐酸稀释至刻度，摇匀，静置备用.

1.2.3 标准曲线配制及绘制

吸取1.00 mL浓度为1 000 μg/mL的标准储备液移入100 mL容量瓶中，加入5 mLHCl，用去离子水定容至100 mL，此时的浓度为10.0 μg/mL.吸取1.00 mL浓度为10.0 μg/mL的标准储备液移入100 mL容量瓶中，加入5 mLHCl，用去离子水定容至100 mL，此时的浓度为100 ng/mL.

分别准确吸取0.00，1.50，2.50，5.00，7.50 mL浓度为100 ng/mL 硒标准溶液于50 mL容量瓶中，分别加入10 mL HCl，用去离子水定容，混匀，标准溶液中硒的浓度为0.00，3.00，5.00，10.00，15.00 ng/mL，放置30 min后，进行荧光强度测定，绘制标准曲线.

1.2.4 样品溶液配制

从20 mL比色管中分别吸取16 mL硒样品溶液到50 mL容量瓶，加盐酸(36%)10 mL，最后用去离子水定容至刻度，放置备用.

2 结果与讨论

2.1 仪器工作条件的选择

讨论了光电倍增管负高压和灯电流的选择对测试结果的影响.随着负高压的增加，硒的荧光强度也会增加，但同时噪声也会增加.因此在满足灵敏度的情况下应该尽量选用较低的负高压.

灯电流较低时荧光强度低且不稳定，随着灯电流增大，荧光强度也增大.本实验确定硒负高压为280 V，硒灯电流为80 mA时所得结果最好.

2.2 化学反应体系的选定

2.2.1 硼氢化钾浓度的选择

硒化氢生成速度主要受硼氢化钾浓度的影响.用量小时，由于还原能力弱，气态物难以形成，灵敏度低.用量过多时，由于发生大量氢气，产生稀释作用稀释了氢化物浓度，灵敏度也降低.实验表明，2.0%硼氢化钾溶液和0.5%氢氧化钾混合液为硒还原剂时效果最好.

2.2.2 预还原剂影响

硒主要有0价、4价、6价等三种价态，但是只有Se(Ⅳ)能够与硼氢化钾反应，被还原为氢化物，并且硒荧光强度较高.加热条件下，浓盐酸可以对硒有还原作用，能把6价硒还原为4价硒.本实验选择盐酸为预还原剂.

2.3 测定结果

2.3.1 回归方程、相关系数、检出限、精密度实验

实验结果表明，在0～15 ng/mL浓度范围内与荧光强度呈良好的线性关系.得到硒回归方程为y=0.78x+31.35，相关系数为0.990 2.测量10次空白溶液的荧光强度，计算标准偏差(σ)为0.25，根据检出限的计算公式(3 σ/L，L为标准曲线的斜率)，得到检出限为0.96 ng/mL.

2.3.2 测定结果

在最优化的实验条件与仪器工作条件下，测得三份川芎中硒含量分别为1.368 ng/g，1.452 ng/g，1.242 ng/g，求得平均值为1.354 ng/g.

2.4 加标回收实验

为了确定本方法的可行性，进行了加标回收实验，根据回收率测定公式(测定值/(含量值+加标量))，得到回收率，结果列于表2.从表2可见加标回收率在83.33%～125.00%之间，说明本文建立的川芎中硒的测定方法达到令人满意的结果.

表2 硒回收率测定结果(n=3)

3 结 论

采用氢化物发生-原子荧光光谱法测定了中药材川芎中硒的含量.实验结果表明，硒含量为1.345 ng/g，检出限为0.96 ng/mL，加标回收率在83.33%～125.00%之间.证明氢化物发生-原子荧光光谱法测硒含量具有灵敏度高、检出限低等优点,为川芎的质量评估以及药理研究提供了合理的科学数据.