实验室环境对石墨炉原子吸收分光光度法检测人血白蛋白铝残留量的影响分析

王轶峰 祁军 赵小洁 张齐明 朱兴业 王娟

兰州兰生血液制品有限公司，甘肃 兰州730046

人血白蛋白是一种大规模生产应用的血液制品，最早从人血浆中提取得到，是经分离纯化健康人血浆后，巴氏消毒法灭活病毒制成。临床上主要应用于多种原因造成的低蛋白血症、肝硬化或肾病引起的腹水或水肿、失血创伤或烧伤引起的休克以及成人呼吸窘迫综合征等，一般采用静脉滴注以及推注的方式［1］。对于健康人，95%铝与血管内转铁蛋白和白蛋白结合后，从肾脏排除，但在某些病理状态下，会造成铝在人体内的滞留。铝相关疾病的主要特征是由于在类骨质矿化位铝过度沉积造成有缺陷的矿位和骨质软化［1］。Al3+是一种对机体有害的金属离子，可能具有引发骨软化病，低血色素性贫血，老年性痴呆和慢性肾功能损害的潜在危险性，引起国际血液制品界的高度重视。因此2005年版《中国药典》首次对人血白蛋白中铝残留量做出了限量要求，即不得超过200μg/L，并在之后的2010版和2015版中延续了该要求［2-3］。已有不少研究者作过研究，相关文献报道也比较多［4］，在新版《中国药典》三部（2020版）［5］中在原有原子吸收分光光度法检测的基础上，进一步通过增加电感耦合等离子体质谱法加强对人血白蛋白制剂中铝元素的分析，弥补原有方法的不足。并提出尽量减少环境中带入铝污染。为了保证分析结果的准确、可靠、精密，在测量过程中需要注意实验室环境的影响。控制实验室环境对测量过程造成的影响，有利于保证分析结果的准确、可靠、精密。由于铝大量存在于周围环境中，所以应保持干净无尘、净化的实验室环境，尽可能降低实验环境对检测结果的影响。本文考察实验室环境对人血白蛋白铝残留量检测结果的影响，为实验室环境控制提供依据。

1 材料和方法

1.1 材料 人血白蛋白铝残留量参考品为兰州兰生血液制品有限公司自行制备，批号20170516，聚四氟乙烯材质离心管分装，-20℃冻存；PE AA 900T原子吸收光谱仪购自美国珀金埃尔默公司；铝单元素溶液标准物质购自中国计量科学院。

1.2 试验方法

1.2.1 原子吸收分光光度法。按照原子吸收分光光度法测定，选择铝灯并打开（测定波长自动设定为309.3nm，狭缝0.7nm），预热大约30分钟。在此期间，检查石墨管，石墨管应完好、无破损、内壁无麻点。若不符合，更换新的石墨管。检查完毕，调整进样针的位置。选择优化好的干燥、灰化、原子化和清除等炉温控制程序，炉温控制程序根据仪器性能调整为表1。分别量取适量空白对照溶液，供试品溶液和标准铝加供试品的混合溶液于进样杯，取20μL测定，读数。

表1 PE900T工作炉温控制程序

1.2.2 计算公式 供试品铝含量（μg/L）=20×（S0-B）×12.5/（S-S0），B为空白对照溶液的读数；S0为供试品溶液的读数；S为标准铝加供试品的混合溶液的读数；20为标准铝加供试品混合溶液中标准铝的含量（μg/L）；12.5为供试品稀释倍数。

1.3 实验室环境改造 原子吸收光谱仪实验室改造前窗框为推拉式加厚塑钢双层保温材质，为开放环境，窗口可开启，日常情况下能满足防噪音，保暖和基本的防尘的要求，排风系统使用无调节功能的大功率电机，试验中外界空气持续沿窗缝门缝吸入室内循环后，再通过排风扇排出室外，房间气流压力为负压状态；原子吸收光谱仪实验室改造后窗户为封闭不可开启，实验室内接入初效通风系统，实验中房间气流压力为正压。

1.4 考察方法 分别对实验室改造前和后同一批号的人血白蛋白铝残留量参考品分别检定20次，分析改造前后的检测结果。

1.5 统计方法 采用SPPSS统计软件，数据Mean±SD表示，两组数据比较采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 实验室改造前后铝残留量检测结果 改造前后铝残留量记录如表2。

表2 实验室改造前后铝残留量检测结果记录表（μg/L）

图1 实验室改造前后20份人血白蛋白样品铝残留量对比图

2.2 实验室改造前后铝残留量检测结果分析 实验室改造后铝残留量低于改造前，差异有统计学（P<0.01）。见表3。

表3 实验室改造前后铝残留量比较（Mean±SD，n=20）

3 讨论

铝元素作为地壳中含量最丰富的金属元素，广泛分布于自然界土壤，尘埃颗粒中，在普通开放原子吸收光谱仪试验室环境中，实验室环境中大量尘埃粒子对人血白蛋白铝残留量检测结果有显著性影响。本文通过对原子吸收光谱仪实验室改造前后铝残留量的检测结果进行了对比分析，实验室改造前铝残留量平均值为54.60μg/L，实验室改造后铝残留量平均值为39.21μg/L，结果显示，改造后铝残留量明显低于改造前（P<0.05）。因此控制原子吸收光谱仪试验室或电感耦合等离子体质谱仪实验室环境对检测结果的稳定性具有重要意义。

本研究只探讨原子吸收分光光度计所在的实验室改造前后检测的同一批质控品的铝残留量情况，实验室环境对检测结果的干扰波动范围符合法规对方法学的要求，对所检测样品的结果的误差均在可控范围内。对于实验过程中其他影响因素，比如石墨管的型号和批次间差异等其他影响因素对铝残留量检测数据的影响还有待进一步研究。