P16/ki67双染在宫颈病变中应用的研究进展

邵娜娜，杨勇莉*

（1.青海大学研究生院，青海 西宁 810000；2.青海大学附属医院，青海 西宁 810000）

子宫颈癌是威胁女性健康最常见的恶性肿瘤之一，且呈年轻化趋势，该病主要由高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)持续感染所致。本综述在以往研究的基础上，全面分析了常规检查技术及细胞免疫化学染色技术在宫颈病变中的应用，总结了常规检查的优势和局限性，并重点讨论肿瘤生物标记物p16/ki67双染在宫颈病变中的作用机制及表达意义，为临床的个体化诊治提供了清晰的诊治思路。

1 p16、Ki67的功能

1.1 p16基因的功能：

p16是一种抑癌基因[1]，通过抑制细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4/CDK6，来阻止视网膜母细胞瘤蛋白pRb的磷酸化。生理上，非磷酸化的pRb结合转录因子E2F，拦截细胞进入S期，从而抑制细胞增殖。在此通路中, pRb负反馈抑制p16的表达。所以，p16的高表达，可被认为是HPV感染和病毒致癌基因的激活以及病毒诱导的细胞周期失调的标志。

1.2 ki67基因的功能：

Ki67是细胞增殖核抗原[2]，除了G0阶段，其在细胞周期G1，S，G2和M期表达，有丝分裂后，大量的表位被降解或丢失，因此Ki67只在有丝分裂和增殖阶段表达。因免疫组织化学P16/ Ki67双染是基于抗体、抗原特异性结合的原理，主观因素相对较少，具有重复性，所以诊断结果更加客观。当出现双染阳性，则提示细胞周期紊乱或存在宫颈高级别病变。

2 p16/Ki67双染在早期筛查中的应用

2.1 p16/Ki67在TCT检测中的应用

在全球范围内，宫颈癌筛查基于宫颈液基薄层细胞学检查（TCT）和HPV的共同检测。细胞学是筛查宫颈病变的主要方式，然而，由于观察人员医疗水平不同, 具有主观性，存在一定的假阳性率。

2.2 p16/Ki67在HPV检测中的应用

目前，HPV检测已用于宫颈癌的常规筛查。然而，HPV感染与大多数病菌的感染不同，大多数HPV感染是短暂的，它们能自发消退而不发展宫颈癌。虽然HPV检测的灵敏度高，但只能表明病毒在体内，无法区分感染是一过性还是持续性，因此特异性上存在一定的限制。

2.3 p16/Ki67在阴道镜检查中的应用：

通过阴道镜放大的作用，可以直接观察阴道和宫颈上皮结构。因观察者在解释镜下特点的可变性相对较高，有一定的主观性，另外，不能直接看到宫颈管中的病变。当出现高危型HPV感染、细胞学异常时，患者容易有过多的诊治，从而增加了的阴道镜检查和侵入性的操作。基于现有的研究[3]，p16/ Ki67共同表达，表明转化细胞，提示存在子宫颈上皮的病变。

3 p16/Ki67双染在宫颈病变中ASC-US、LSIL的应用

3.1 根据最新研究

CIN2可用P16免疫组化进行分流，若阳性者按HSIL处理，阴性者按LSIL处理。然而，细胞学产生许多模棱两可的结果，如ASCUS、LSIL，其组织病理学具有多样性，可以是炎症到浸润癌各个阶段的病变，且重复性较差, 是临床诊治的难题。

3.2 对于ASCUS和LSIL的患者

临床上推荐行HR-HPV检测对其分流, 若为阳性则行阴道镜, 若为阴性则加强随访。p16/Ki67阳性表达水平随宫颈级别病变的加重而升高，可以提升HSIL+检测的特异性，又具有和HPV检测相似的敏感性，可成为分流ASCUS、LSHL的有效检测手段。

随着我们对HPV引起的生物分子变化，免疫细胞化学p16/Ki67双染在早期宫颈癌筛查中表现出巨大的潜力。当然，为了更好的评估这些生物标志物的应用，还应考虑其他相关因素，比如年龄、病毒载量、病毒基因分型、免疫微环境等对病变发展的影响，还需要大数据进行全面的分析。