血清HMGB1、sTLT-1 水平与急性心肌梗死患者经皮冠状动脉介入术后不良心血管事件的关系

梁春芳 陈子辉 董艳章

1.河北省廊坊市第四人民医院急诊科，河北廊坊 065700；2.河北省廊坊市第四人民医院普通外科，河北廊坊 065700

炎性反应在急性心肌梗死（AMI）后的心脏修复中起重要作用，肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）等多种因子参与AMI 等心血管病的发展[1-2]。明确相关炎性因子在AMI 发病和进展中的作用有助于指导治疗方案并改善预后[3]。高迁移率组蛋白Box1（HMGB1）是重要的非组蛋白核蛋白，分布在心脏等重要脏器中，参与炎性反应并与AMI 等疾病关系密切，但其对心血管疾病的利弊仍有争议[4-5]。可溶性髓样细胞触发受体样转录因子-1（sTLT-1）是由血小板表面的TLT-1 裂解产生的蛋白质，当机体出现炎性反应时，其水平可显著增加[6]。研究显示[7-8]，sTLT-1 与AMI 患者的不良预后有关。经皮冠状动脉介入治疗（PCI）后可引起炎性反应，加重心肌损伤，导致预后不良[9]。鉴于此，本研究旨在探讨HMGB1 及sTLT-1 水平对AMI 患者PCI 后主要不良心血管事件（MACE）发生的预测价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016 年3 月～2018 年3 月河北省廊坊市第四人民医院（以下简称“我院”）收治的因AMI 行PCI治疗的患者198 例为研究对象，依据是否发生MACE将其分为MACE 组（n=57）和非MACE 组（n=141）；另选取同期于我院检查并确认无AMI 及急慢性感染病史的体检者50 例为对照组。三组一般资料比较，差异无统计学意义（P ＞0.05），具有可比性，见表1。本研究经我院医学伦理委员会批准。

表1 三组一般资料比较

纳入标准：①符合《急性心肌梗死诊断和治疗指南》[10]的诊断标准及有PCI 治疗适应证；②AMI 发病12 h内入院；③年龄18～80 岁，患者术后均接受随访12 个月；④受试者或家属自愿签署知情同意书。排除标准：①合并严重心律失常、急慢性心衰、近期感染等其他严重疾病者；②陈旧心肌梗死或既往PCI 治疗史；③近期应用糖皮质激素或免疫抑制剂。

1.2 方法

采集对照组空腹血液样本10 mL、MACE 组及非MACE 组PCI 后次日的空腹血液样本10 mL，4℃低温离心，1500 r/min 离心5min，离心半径8 cm，取血清存于-80℃冰箱。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清HMGB1、sTLT-1 及心肌肌钙蛋白I（cTnI）水平，试剂盒由优尔生科技公司提供（批号：20151204）；颗粒增强免疫透射比浊法测定血清超敏C 反应蛋白（hs-CRP）水平，试剂购自Orion 公司（法国）（批号：201601 22）。

1.3 观察指标

记录三组心率（HR）、Killip 心功能分级、手术时间，实验室检测指标包括胆固醇、糖化血红蛋白（HbA1c）等；检测三组血清HMGB1、sTLT-1 及cTnI、hs-CRP水平；AMI 患者PCI 术后发生MACE 的危险因素及HMGB1、sTLT-1 水平与hs-CRP 和cTnI 水平的相关性分析；ROC 曲线评价血清HMGB1、sTLT-1 对患者术后发生MACE 的预测价值。

1.4 随访及预后评估

三组进行为期12 个月的随访，随访方式为门诊复查，记录12 个月内再次心肌梗死、恶性心律失常、心源性死亡、严重心衰、缺血性心绞痛发作、脑梗死等新发MACE，并以此作为预后评估指标。

1.5 统计学方法

采用SPSS 22.0 统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（）表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t 检验；计数资料用百分率表示，组间比较采用χ2检验。采用多因素logistic 回归分析AMI 患者行PCI 后发生MACE 的危险因素；相关分析采用Pearson 相关分析；ROC曲线分析HMGB1、sTLT-1 对AMI 患者行PCI后发生MACE 的预测价值，敏感度=阳性例数/真阳性例数，特异度=阴性例数/真阴性例数。以P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组临床特征比较

三组HR、Killip 心功能分级、手术时间、HbA1c、胆固醇比较，差异均无统计学意义（均P ＞0.05）。MACE组和非MACE 组HMGB1、sTLT-1 与hs-CRP、cTnI 水平高于对照组；MACE 组HMGB1、sTLT-1 与hs-CRP、cTnI 水平高于非MACE 组，差异均有统计学意义（均P ＜0.05）。见表2。

2.2 logistic 回归分析结果

logistic 回归分析显示，HMGB1、sTLT-1、hs-CRP、cTnI 水平是AMI 患者PCI 术后发生MACE 的独立危险因素。见表3。

表2 三组临床特征比较（）

表2 三组临床特征比较（）

注：“-”表示无数据。与对照组比较，aP ＜0.05；与非MACE 组比较，bP ＜0.05。HR：心率；HbA1c：糖化血红蛋白；HMGB1：高迁移率组蛋白Box1；sTLT-1：可溶性髓样细胞触发受体样转录因子-1；hs-CRP：超敏C 反应蛋白；cTnI：心肌肌钙蛋白I

2.3 Pearson 相关分析结果

AMI 患者行PCI 后血清HMGB1 水平与hs-CRP和cTnI 水平呈正相关（r=0.422、0.491，P ＜0.05），sTLT-1 水平与hs-CRP 和cTnI 水平呈正相关（r=0.404、0.520，P ＜0.05）。

2.4 ROC 曲线结果

ROC 曲线结果显示，HMGB1 的诊断阈值为79.75 μg/L 时，敏感度为0.719、特异度为0.759；sTLT-1的诊断阈值为595.72 pg/mL 时，敏感度为0.544，特异度为0.794。两指标联合，灵敏度为0.842、特异度为0.858。见图1。

表3 logistic 回归分析结果

3 讨论

随着饮食的变化、老龄化社会的发展，我国AMI的发病率呈上升趋势[11-12]。PCI 手术是AMI 急性期的有效治疗手段，早期解除血管阻塞、挽救濒危心肌，可显著改善预后[13-18]。但支架置入产生的局部刺激、手术并发症等可导致炎性反应，而炎症进一步增加冠状动脉粥样硬化斑块的不稳定性、激活内皮细胞，导致斑块破裂、形成血栓等，增加MACE 发生[19]。HMGB1 为一种高度保守的核蛋白，主要分布在心脏、肾脏等其他重要器官和淋巴组织中，在细胞内外都具有生物活性。在细胞核内HMGB1 与DNA 和组蛋白相互作用，以确定染色质结构并调节转录等关键过程，通过与各种细胞因子相互作用，参与炎性反应[20]。sTLT-1 是由TLT-1 在血小板表面裂解产生的蛋白质。有研显示[21]，sTLT-1 在炎性反应后升高，并在血小板、白细胞和内皮细胞中起着调控作用，调节血小板的活化及炎性反应，还通过促进肌动蛋白聚合黏附血管内皮细胞，诱导动脉粥样硬化的发生，促进冠心病的发展。

图1 HMGB1、sTLT-1 的ROC 曲线

本研究发现，AMI 患者行PCI 后HMGB1 和sTLT-1水平升高，且MACE 组HMGB1 和sTLT-1 水平高于非MACE 组（P ＜0.05），这可能与PCI 后心肌缺血再灌注损伤诱导心肌死亡，HMGB1 从坏死心肌细胞向胞外转移有关[22]。此外，AMI 患者PCI 术后因支架置入产生的局部刺激、手术并发症等导致的炎性反应也可诱导HMGB1 和sTLT-1 水平增加。多因素logistic回归分析发现，HMGB1、sTLT-1、hs-CRP、cTnI 水平是AMI 患者PCI 术后发生MACE 的独立危险因素，HMGB1 水平升高激活炎性细胞因子IL-6 和TNF-α等，而炎性反应又可诱导sTLT-1 调节血小板的聚集，这一协同效应可能导致冠脉斑块不稳定性增加、斑块破裂、血小板聚集和血栓形成，最终导致MACE 的发生[22]。有研究发现[21]，冠心病患者即使未行PCI，其体内仍然存在一定程度的炎性反应，AMI、稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛患者血清HMGB1 水平升高，心肌梗死后HMGB1 可从坏死心肌细胞的细胞核释放至胞浆中，提示血清HMGB1 水平可能是冠状动脉疾病严重程度的替代预测指标。

本研究发现，AMI 患者PCI 术后血清HMGB1 水平与hs-CRP 和cTnI 水平呈正相关，sTLT-1 水平与hs-CRP 和cTnI 水平呈正相关。hs-CRP 水平升高进一步证实PCI 术后AMI 患者体内存在一定程度的炎性反应，研究认为[23]，hs-CRP 水平与受损心肌炎症的严重程度有关，而cTnI 水平在一定程度上提示AMI患者心肌梗死坏死区面积的大小。故HMGB1 和sTLT-1 水平还可作为AMI 患者PCI 术后炎性反应及AMI 严重程度的评估指标。

ROC 曲线显示HMGB1 水平对MACE 发生的预测价值有着一定的敏感度和特异度，且两者联合可提高对MACE 发生的预测价值。提示AMI 患者PCI 术后HMGB1 和sTLT-1 水平增加对不良预后有着较高预测价值。可能是因为HMGB1 在坏死或受损心肌细胞中释放，单核细胞的黏附和促炎症介质及细胞因子的分泌增加，炎性反应增强，导致心功能恶化和心室重构的发生，继而导致MACE 增加，预后不良[24-25]。另一方面，sTLT-1 是动脉粥样硬化形成过程中的一个重要促炎因子，也是血小板活化的指标之一，其在急性冠脉综合征患者体内表达升高。sTLT-1 可通过Rac1/p38 信号通路介导肌动蛋白聚合，参与斑块生成和动脉粥样硬化发展，而在AMI 发生后sTLT-1诱导可溶性p-选择素表达增加，增加血小板的黏附作用，导致AMI 患者预后不良[6]。

综上所述，AMI 患者PCI 术后血清HMGB1 和sTLT-1 水平升高，同时也是PCI 术后近期发生MACE的危险因素，早期联合检测可有效预测AMI 患者PCI术后MACE 的发生。