带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群的表达及其与病情严重程度的相关性

靳艳茹，杨 帆，刘孝兵，李雅琴，宋印娥，李 锋，冯 倩，惠海英

带状疱疹是由带状疱疹病毒引起的感染性皮肤疾病，初次感染多在少儿时代，可引起水痘，之后长期潜伏于人体脊髓神经后根神经节的神经细胞内，若成年后病毒被再次激活，将侵犯患者皮肤和外周神经使其产生炎症反应，导致带状疱疹发生，部分患者可伴有持续数月甚至数年的后遗神经痛，严重影响日常生活质量[1-3]。目前，有学者认为机体免疫功能下降，与T淋巴细胞亚群数量异常尤其是CD4+T淋巴细胞数目减少密切相关[4]。为进一步了解带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群的表达及其与病情严重程度的关系，本研究对带状疱疹100例外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+及CD8+水平进行了检测，现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2014年7月—2016年2月安康市中心医院皮肤科收治的符合纳入及排除标准的带状疱疹100例作为带状疱疹组。100例中男54例，女46例；年龄25～64(46.23±7.74)岁。病程2～6(3.67±0.73)d。根据水疱簇数、水疱数目、红斑面积、瘙痒疼痛、水疱变化及烧灼感这6个因子将带状疱疹100例进行病情严重程度评分，分数越高，病情越严重[2]。100例中总分≤6分(轻度带状疱疹)30例，总分6～12分(中度带状疱疹)44例，总分>12分(重度带状疱疹)26例。另选取同期在该院门诊进行健康体检的健康体检者70例作为健康组，其中男36例，女34例；年龄27～63(45.11±7.84)岁。带状疱疹组和健康组性别及年龄比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会批准同意执行。

1.2纳入及排除标准 纳入标准：①患者临床症状和体征符合带状疱疹诊断标准[5]；②患者均于发病7 d内就诊；③患者和(或)其家属对本研究知情同意并自愿参与本研究、签署知情同意书。排除标准：①伴有严重器质性疾病及免疫系统、血液系统疾病者；②合并恶性肿瘤者；③服用免疫抑制剂者；④妊娠或哺乳期妇女。

1.3治疗方法 带状疱疹组均采用相同措施治疗，静脉滴注阿昔洛韦(丽珠集团丽珠制药厂生产，国药准字：H10960079)每日600 mg，持续滴注7 d，后改为口服阿昔洛韦每日300 mg，持续口服7 d，治疗期间不服用其他糖皮质激素类药物。

1.4观察指标及方法 比较带状疱疹组和健康组外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+及CD8+水平，不同病情程度带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+及CD8+水平，以及带状疱疹患者治疗前后病情程度评分及外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平变化；采用Spearman相关分析对带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平与病情程度的相关性进行分析。所有带状疱疹患者于入院第2天和治疗结束后1 d抽取静脉血5 ml，对照组于体检时抽取静脉血5 ml，加入100 μl肝素抗凝，6 h内检测T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+及CD8+水平。标本检测，采用单克隆抗体三色荧光标记法，取抗凝细胞混悬液100 μl，加入10 μl标记的荧光单克隆抗体(Tritest CD3+、CD4+、CD8+，赛默飞有限公司)，室温避光反应15 min，溶血后采用流式细胞仪(美国Beckman-Coulter公司，型号：EPICS-XL Ⅱ型)分析，流式细胞仪每次采集细胞数10 000个以上，采用Listmode系统软件分析数据，分析T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+及CD8+水平，即T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+及CD8+占淋巴细胞的百分比。

2 结果

2.1带状疱疹组和健康组外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+及CD8+水平比较 带状疱疹组外周血T淋巴细胞亚群CD3+及CD4+水平低于健康组，CD8+水平高于健康组，差异具有统计学意义(P<0.01)，见表1。

2.2不同病情程度带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+及CD8+水平比较 带状疱疹患者随着病情程度增加，外周血T淋巴细胞亚群CD3+及CD4+水平逐渐降低，CD8+水平逐渐升高，不同病情程度带状疱疹患者总体比较差异有统计学意义(P<0.01)。重度带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+水平低于轻、中度带状疱疹患者(重度vs轻度：t=3.889、P<0.001,t=5.797、P<0.001;重度vs中度：t=2.393、P=0.020,t=2.839、P=0.006)，CD8+水平高于轻、中度带状疱疹患者(重度vs轻度：t=4.457、P<0.001;重度 vs 中度：t=3.421、P=0.001)，差异有统计学意义。中度带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+水平低于轻度带状疱疹患者，CD8+水平高于轻度带状疱疹患者，差异有统计学意义(t=2.047、P=0.044，t=3.022、P=0.004，t=4.398、P<0.001)。见表2。

表1 带状疱疹组和健康组外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+及CD8+水平比较

表2 不同病情程度带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+及CD8+水平比较

注：与轻度带状疱疹患者同一指标比较，aP<0.05，bP<0.01；与中度带状疱疹患者同一指标比较，cP<0.05，dP<0.01

2.3带状疱疹患者治疗前后病情程度评分及外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平比较 治疗后，带状疱疹患者病情程度评分及外周血T淋巴细胞亚群CD8+水平与治疗前比较降低，外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+水平与治疗前比较升高，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 带状疱疹患者治疗前后病情程度评分及外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平比较

2.4外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平与带状疱疹患者病情程度相关分析 Spearman相关分析结果显示，外周血T淋巴细胞亚群CD8+水平与带状疱疹患者病情严重程度呈正相关(r=0.475，P<0.001)，外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+水平与带状疱疹患者病情严重程度呈负相关(r=-0.432，P<0.001；r=-0.364，P<0.001)。

3 讨论

带状疱疹为一种病毒感染性疾病，在机体细胞免疫力下降时易因过度饮酒、劳累、呼吸道感染及月经来潮等原因导致病毒在成年后再次被激活，使皮肤和周围神经出现炎症反应[6-11]。因此，带状疱疹的发病与机体的免疫力有密切关系。B淋巴细胞和T淋巴细胞在机体免疫调节中分别介导体液免疫和细胞免疫，已有研究表明在带状疱疹发病过程中机体防御以细胞免疫应答为主[12]，机体内T淋巴细胞亚群功能和数量在维持机体正常免疫功能中发挥着重要的作用，故本研究将T淋巴细胞亚群水平作为免疫功能的重要指标[13]。

正常机体内各T淋巴细胞亚群互相作用，并维持一定动态平衡，共同发挥免疫调节作用，当不同T淋巴细胞亚群的数量异常时，可导致机体免疫功能紊乱，并发生病理改变，机体被病毒感染的风险增加[14-15]。CD3+ T淋巴细胞是外周血中成熟T淋巴细胞的标志，CD4+ T淋巴细胞可辅助活化B细胞和细胞毒性T淋巴细胞产生抗体，激活巨噬细胞，已有研究表明带状疱疹患者在细胞免疫应答方面有一定异常现象[16-17]。周海林和蒋法兴[12]研究认为CD3+和CD4+T淋巴细胞在病毒性疾病发病中有重要意义，特别是CD4+ T淋巴细胞数量下降可能是带状疱疹患者免疫功能受损的主要原因。许芸等[18]研究认为CD8+T淋巴细胞数量增加表示机体内抑制性T淋巴细胞增多，CD8+T淋巴细胞可作为判断机体免疫状态的客观指标之一。

本研究结果显示，带状疱疹组外周血T淋巴细胞亚群CD3+及CD4+水平低于健康组，CD8+水平高于健康组，差异具有统计学意义。提示带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群受到明显抑制，与刘军超等[19]研究相符，该研究结果显示带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群CD3+及CD4+处于低水平，经治疗后带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群CD3+和CD4+上升至正常。本研究结果还显示，带状疱疹患者随着病情程度增加，外周血T淋巴细胞亚群CD3+及CD4+水平逐渐降低，CD8+水平逐渐升高，不同病情程度带状疱疹患者总体比较差异有统计学意义；重度带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+水平低于轻、中度带状疱疹患者，CD8+水平高于轻、中度带状疱疹患者，差异有统计学意义；中度带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+水平低于轻度带状疱疹患者，CD8+水平高于轻度带状疱疹患者，差异有统计学意义；治疗后，带状疱疹患者病情程度评分及外周血T淋巴细胞亚群CD8+水平与治疗前比较降低，外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+水平与治疗前比较升高，差异具有统计学意义。说明带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+及CD8+水平与病情严重程度相关，经治疗后病情趋于好转，外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+及CD8+指标也趋于恢复正常。Laing等[20]研究表示，经过相应治疗后带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群CD4+水平可较治疗前升高，与本研究结果相符。本研究Spearman相关分析结果显示，外周血T淋巴细胞亚群CD8+水平与带状疱疹患者病情严重程度呈正相关，外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+水平与带状疱疹患者病情严重程度呈负相关，这与Vukmanovic Stejic等[21]研究报道相符。

总之，带状疱疹患者外周血T淋巴细胞亚群CD3+及CD4+水平低于健康人群，CD8+水平高于健康人群；外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+及CD8+水平与带状疱疹患者病情严重程度存在相关性。因此，早期监测外周血T淋巴细胞亚群水平变化，有助于尽快对带状疱疹患者病情发展做出合理判断，并及时给出相应治疗方案，利于疾病治疗。