清热解毒中成药中常见8种化学添加药物的薄层鉴定*

宁素云 孙笑宇 杜建红

山西药科职业学院，山西 太原 030031

清热解毒类中成药所占市场份额较大。而在生产的过程中，部分药物厂家为了提升药物的临床治疗效果，向制得的中成药内添加化学成分。由于在添加的过程中并不遵从药典，向配方内添加其他化学成分，最终患者在进行药物治疗的过程中，难免摄入其他化学药物成分，对患者的身体带来不可预知的危害。虽然随着HPLC及GC-MS等分析方法的大量应用，临床对于上述成分的分析已趋简便。但是，应用简便、快捷及有效的方法，对上述的成分进行鉴定，不论是在临床还是生成中，都有着巨大的潜力。基于此，本研究应用薄层法建立了中成药中，快速鉴定8种化学成分的方法。经过20种(批)中成药的使用，获得较好的效果，现报道如下：

1 实验部分

1.1仪器 快速混匀器(XK96-B，上海垒固)、离心机(80-1，郑州亚荣)；暗箱式三用紫外分析仪(WFH-203B，上海驰唐)、电热恒温鼓风干燥箱(101-A1，上海捷呈)、电子精密天平(BJ1200C，瑞士Precisa)、数控超声波清洗机(KQ-50DB昆山昆超)；

1.2试药 硅胶GF254、羧甲基纤维素钠、甲醇、无水乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、丙酮、氨水等试剂，均为分析纯，采购自国药集团。清热中成药为市售，共计20种(批)。包含：×颗粒剂、感冒清热颗粒(3批次/厂家)、抗病毒颗粒、羚羊感冒胶囊(2批次/厂家)、清热消炎宁胶囊、三黄片、牛黄解毒片(2批次/厂家)、黄连上清丸、羚翘解毒丸、清咽片(2批次/厂家)、清热解毒口服液、银黄口服液、穿心莲片、板蓝根颗粒(2批次/厂家)。选定8种常见的化学药作为检验对象，分别为乙酰氨基酚、磺胺甲噁唑、甲氧苄啶、氨基比林、头孢氨苄、芬布芬、双氯芬酸钠和布洛芬，上述化学药物成分标准品购自中国食品药品检定研究院。

1.3试样制备

1.3.1对照品溶液的制备 根据文献报道的情况[2]，本研究将标准品应用甲醇溶解，对精密称取的8种对照品进行稀释，并制备成两种对照品溶液体系。具体如表1所示。

表1 8种化学药物成分对照品构成情况(mg/ml)

1.3.2供试品溶液的制备 将收集的药物胶囊剂及片剂分别进行研磨处理(胶囊剂带壳研，片剂带糖衣研)，溶液直接使用；依据药品说明书称取单次使用的剂量，将上述的药物分别置于100 ml小烧杯中。①系列1中，加甲醇少量，搅拌均匀，超声10min。将获得的甲醇溶液定容至25 ml量瓶中，离心10 min(4000转/min)，取上清液，备用；②系列2中，则直接向小烧杯中准确加入20 ml甲醇，搅拌均匀，超声10min，滤过，取滤液蒸干溶剂，残渣加1 ml甲醇，涡旋混合，备用。

1.4薄层板的制备 硅胶GF254和0.4%CMC-Na按1∶3的比例制成面积为10 cm×20 cm薄层板。待薄层板晾干之后放入110 ℃烘箱活化30 min备用。

1.5鉴别方法

全部两个系列方法均依据(《中国药典》2015年版(四部)0502[1])进行。 将5μl标准品及供试品分别点于同一薄层板上，每板8个点。其中，4个点为标准品，4个点为供试品。重复制备2个系列共计10块待测薄层板。其中，系列1以乙酸乙酯-无水乙醇-氨水(15:1.5:0.2)为展开剂，系列2以正丁醇-丙酮-无水乙醇-氨水(8∶3∶1∶1.5)为展开剂。两块板分别展开后，晾干，在254nm紫外灯下检视各组成分的斑点情况。

2 结 果

2.1供试样品的薄层色谱

应用薄层色谱分别检测了上述20批次药物。具体结果如图1(系列1)及图2(系列2)所示。

图1 对乙酰氨基酚、磺胺甲噁唑、甲氧苄啶、氨基比林的薄层色谱图注：1.对乙酰氨基酚；2. 磺胺甲噁唑；3. 甲氧苄啶；4. 氨基比林；5～8供试品

图2 头孢氨苄、芬布芬、双氯芬酸钠、布洛芬的薄层色谱图注：1. 头孢氨苄；2. 芬布芬；3. 双氯芬酸钠；4. 布洛芬；5～8供试品

2.2不同批次中成药的化学成分添加情况

根据结果可知，×颗粒剂中出现了与对乙酰氨基酚Rf值相同的斑点(见图1)，结果提示，该药物内未严格按照药典标准，向其中添加了对乙酰氨基酚。而在其他19种(批)中成药内，则无上述8种化学药物成分检出。

3 讨 论

根据日常的检测经验可知，中成药内化学药物成分添加量过小时，经过薄层色谱无法有效检出。如前文所述，由于不同的化学药成分的常用添加剂量不同[2]，以相同浓度设计实验，则会大幅降低检测结果的敏感度，因此，需要依据不同药物常见添加情况，设定检测范围。为了满足需要，本研究则设计了一次剂量中成药添加十分之一剂量化学药品的检测方法。

在实际操作中，由于双氯芬酸钠和布洛芬的实际添加浓度往往较小，因此，需要在检测完其他6种成分后，再仔细检查上述两个标准品Rf值位置上的斑点情况。必要时可用电吹风吹干或在105 ℃烘箱中快速烘干，否则会使上述两个斑点显示不清。而根据本研究的经验可知，在系列1及系列2的色谱条件下展开，与对照品比较，在图1相同的Rf值的位置上，显示清晰的斑点。表明该方法可以灵敏地检出中成药中掺入的上述化学药品，而中成药中的其它成分则不会影响待测成分的分离。本研究的结果显示，应用薄层色谱法可快速的分析出清热解毒中成药内其他化学成分的添加，且不受药物本身有效成分的干扰，可广泛的应用于中成药实际生产中的分析与品控。