子宫内膜癌组织中DNA错配修复基因表达及意义

徐秀梅 米贤军 代新珍 陈志强

广东省中山市博爱医院病理科 524800

子宫内膜癌是妇科中较为常见的一种恶性肿瘤，近年来在我国的发生率不断上升[1-2]。Lynch综合征是一种由于碱基错配修复基因缺失导致的一种遗传病，患者很有可能出现结肠癌和子宫内膜癌[3]。错配修复基因(MMR)的表达缺失会使DNA和遗传信息的正常运行及传递受到影响，从而引起肿瘤的出现和发展[4]。为探究在子宫内膜癌组织中MMR的表达情况及其意义，本文进行研究如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年1月—2018年12月本院收治的子宫内膜癌患者50例作为内膜癌组，以同期20例内膜癌非典型增生患者作为增生组和子宫内膜正常患者20例作为正常组。内膜癌组包括疑似Lynch 内膜癌患者8例；病理分级：高分化14例，中、低分化36例；≤45岁、45～60岁、≥60岁患者分别为21例、13例、16例。上述患者均知晓本研究，且自愿参与本研究并签署知情同意书，同时本研究获得伦理委员会批准。对各组患者的基本资料相应的进行统计学分析发现差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 首先对标本使用10%的甲醛进行固定，常规进行石蜡包埋工作后将标本做切片处理，厚度为3μm。通过免疫组化SP法对MMR蛋白中常见的突变基因，包括hMLH1、hMSH2、hPMS2以及hMSH6等基因进行检测，按照1∶100的比例对抗体进行稀释，进行DBA染色，以正常的间质细胞、子宫内膜和淋巴细胞切片组织为阳性对照，以PBS作为阴性对照。试验中所用试剂盒均为北京中山金桥生物技术有限公司生产，多克隆抗体为广东深达生物技术有限公司生产。

1.3 观察指标 细胞质或细胞核或两者均呈现棕黄色则为阳性细胞，在患者肿瘤范围内在高倍镜观察下选择10个视野，如果阳性细胞所占比例>10%则为阳性，如果≤10%则为阴性[5]。hMLH1、hMSH2、hPMS2以及hMSH6四种基因中只要其中一种表现为阴性则说明患者MMR蛋白表达缺失[6]。比较MMR蛋白在各组中的不同表达情况。

2 结果

2.1 各组MMR蛋白表达情况的比较 三组MMR蛋白表达缺失率分别为36.00%、30.00%和0%，内膜癌组和增生组表达缺失率显著高于正常组(χ2=13.94、10.23，P=0.000 2、0.001 4)，具体见表1。

表1 各组MMR蛋白表达情况的比较[n(%)]

注：*与正常组相比，P<0.05。

2.2 不同内膜癌患者MMR蛋白表达情况的对比 疑似Lynch 内膜癌与其他内膜癌患者相比、≤45岁与≥60岁的患者相比，其MMR蛋白表达的缺失率显著较高(χ2=10.96、4.37，P=0.000 9、0.036 6)，内膜癌患者的病理分级则与MMR蛋白的表达无明显相关性(χ2=0.00，P=0.979 1)，具体见表2。

表2 不同内膜癌患者MMR蛋白表达情况的对比[n(%)]

注：*表示疑似Lynch 内膜癌与其他患者相比、≤45岁与≥60岁患者相比，P<0.05。

2.3 内膜癌组hMLH1、hMSH2、hPMS2以及hMSH6的表达缺失率比较 本组 50例内膜癌患者的hMLH1、hMSH2、hPMS2以及hMSH6的表达缺失率分别为24.00%(12/50)、10.00%(5/50)、20.00%(10/50)和8.00%(4/50)。

3 讨论

MMR系统可以为人体细胞进行DNA碱基错配的修复提供安全保障，MMR蛋白是MMR基因表达产生的，包含hMLH1、hMSH2、hPMS2以及hMSH6等[7-9]。如果机体MMR基因出现缺陷或突变都会导致细胞增殖过程中的错误掺入和缺失无法进行修复，使机体一系列靶基因出现改变，最终引起肿瘤的产生和进一步发展[10-11]。Lynch综合征以发病年龄早、常有子宫内膜癌、肠癌等肠外肿瘤伴随发生[12]，疑似Lynch 内膜癌与其他内膜癌患者相比MMR蛋白表达缺失率更高。有研究显示，50岁以下子宫内膜癌患者MMR蛋白表达缺失率明显高于其他年龄段，其中又以hMLH1的缺失率最高[13]。另有研究表明，在51例低龄(≤45岁)子宫内膜癌患者中，有45.1%的患者存在hMLH1、hMSH2、hPMS2或hMSH6的表达缺失情况[14]。以上研究均说明低龄子宫内膜癌患者中MMR基因失活的情况较为显著。本研究中，≤45岁与≥60岁的患者相比，其MMR蛋白表达的缺失率显著较高，且内膜癌组患者又以hMLH1的表达缺失为主，这也与相关研究的结果相符。提示MMR基因的表达缺失和肿瘤的发生发展存在一定相关性，临床上应对年龄较低的子宫内膜癌患者进行更加密切的观察[15]。

综上所述，MMR蛋白表达的缺失会导致子宫内膜非典型增生以及内膜癌，特别是低龄内膜癌的出现和进一步发展。