北京医院侵袭性酵母菌的感染分布及耐药性分析

高振祥 陶凤蓉 骈亚亚 聂晶晶 郭莉娜 徐英春 胡云建

(1. 北京医院 国家老年医学中心 国家卫生健康委临床检验中心 中国医学科学院老年医学研究院，北京 100730；2. 北京医院 检验科 国家老年医学中心 中国医学科学院老年医学研究院，北京 100730；3. 中国医学科学院北京协和医院检验科 侵袭性真菌病机制研究与精准诊断北京市重点实验室( BZ0447 )，北京 100730)

侵袭性真菌感染是指真菌侵入人体，在组织、器官或血液中生长繁殖，导致炎症反应和组织器官损伤的病理过程[1]。随着医学的发展，抗真菌药物越来越多，长期不合理的临床用药将危害患者的健康[2]。北京医院由于是高干保健医院，老年患者较多，免疫力低下、合并有慢性病、长期服用药物、住院时间长、导管滞留等特点，使得侵袭性真菌感染发生率增高。本文回顾了北京医院2012～2013年，2016～2017年患者无菌体液标本中深部真菌感染的菌种分布及药物敏感性等特点，希望能引起医生的重视，促进临床合理用药。

1 材料与方法

1.1 标本来源

收集北京医院2012～2013年及2016～2017年门诊和住院患者检出侵袭性酵母菌株，每株菌都详细记录患者的姓名、年龄、性别、所患疾病、病历号、门诊、急诊或所在病房。病房再细分内科、外科、重症监护及其他。侵袭性酵母菌收集的标本类型包括：血液、胸水、腹水、胆汁、肺泡灌洗液及其他。剔除同一患者重复标本的部位。

1.2 主要仪器与试剂

Bact/ALERT 3D全自动血培养仪、VITEK-2 Compact全自动细菌鉴定仪、VITEK-2 Compact YST鉴定卡购自法国生物梅里埃公司，真菌显色培养基购自法国科马嘉公司。

1.3 菌种鉴定及药敏试验

真菌培养的标本接种科马嘉显色培养基，24～48 h观察结果，然后进行分纯鉴定，在显色培养基中生长典型的菌落，不需要VITEK-2 Compact YST卡及API20C AUX鉴定，反之，不典型的菌落需进一步上机及做API20C AUX鉴定，其中疑难菌需要做质谱，目的是保证结果的准确性。

采用ATB FUNGUS 3酵母样真菌药敏试剂盒(微量稀释)进行真菌药敏试验。

1.4 诊断标准

严格执行侵袭性真菌病的诊断参照中华人民共和国卫生行业标准WS/T497-2017《侵袭性真菌病临床实验室操作指南》。

1.5 统计学分析

采用回顾性统计分析方法，依据WHONET5.6软件进行数据统计。

2 结 果

2.1 侵袭性酵母菌标本来源及菌种分布

2012～2013年侵袭性酵母菌菌株共计62株，其中血液标本21株，占33.87%，其他无菌体液标本41株，占66.13%，具体检出标本来源见表1。菌种分布以白念珠菌为主，共36株，占58.06%；其次为光滑念珠菌17株，占27.42%；近平滑念珠菌和热带念珠菌各4株；其他念珠菌1株。详见表2。

表12012～2013年侵袭性酵母菌检出标本来源

Tab.1Specimen distribution of invasive yeast from 2012 to 2013

标本来源株数n=62构成比(%)血液2133.87肺泡灌洗液1524.19腹水1422.58胸水69.67胆汁34.83脓肿穿刺液23.22脑脊液11.6

表2 2012～2013年侵袭性酵母菌检出分布(n=62)

2016～2017年侵袭性酵母菌菌株共计43株，其中血液标本38株，占88.37%，其他无菌体液标本5株，占11.63%，具体检出标本来源见表3。菌种分布以白念珠菌为主，共21株，占48.83%；其次为光滑念珠菌11株，占25.58%；近平滑念珠菌6株，占13.95%；热带念珠菌5株，占11.63%。见表4所示。

2.2 侵袭性酵母菌科室及基础疾病分布

2012～2013年内科科室(血液科、呼吸科、肾内科)检出17株占27.42%，外科科室(普通外科、胸外科)检出8株占12.90%，ICU 5株占8.06%，RCU4株占6.45%，急诊科28株占45.16%，检出率最高的科室是急诊室。患者基础疾病构成见表5。

2016～2017年内科科室(血液科、呼吸科、肾内科、风湿免疫科)检出10株占23.25%，外科科室(普通外科)检出5株占11.62%，ICU 3株占6.98%，RCU1株占2.32%，急诊科21株占48.83%，检出率最高的科室是急诊室。其他科室(北楼B5、眼科、老年科)3株占6.98%。患者基础疾病构成见表6。

表32016～2017年侵袭性酵母菌检出分布构成比

Tab.3Specimen distribution of invasive yeast from 2016 to 2017

标本来源株数n=43构成比(%)血液3888.37腹水36.98导管12.32玻璃体12.32其他00

表4 2016～2017年侵袭性酵母菌检出分布(n=43)

表52012～2013年侵袭性酵母菌病患者基础疾病构成

Tab.5Underlying diseases distribution of invasive yeast infection from 2012 to 2013

病种株数(n)百分比(%)呼吸系统疾病1321.0消化系统疾病1219.4畸胎瘤11.6非霍奇金淋巴瘤11.6慢性心功能不全11.6蛋白尿11.6糖尿病11.6其他3251.6合计62100

2.3 侵袭性酵母药物敏感性

2012～2013年白念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌存在不同程度的耐药，见表7。2016～2017年侵袭性酵母菌未发现菌株耐药。

表62016～2017年侵袭性酵母菌病患者基础疾病构成

Tab.6Underlying diseases distribution of invasive yeast infection from 2016 to 2017

病种株数(n)百分比(%)消化系统疾病1023.3呼吸系统疾病818.6发热49.3脑血管相关疾病49.3感染性休克37.0血液系统疾病24.7肾脏疾病24.7右眼眼内炎12.3急性心梗12.3乳酸酸中毒12.3前列腺癌12.3重症肌无力12.3下肢静脉12.3营养不良12.3其他37.0合计43100

表7 2012～2013年侵袭性酵母菌药物敏感性(%)

3 讨 论

本次研究调查北京医院2012～2013年及2016～2017年侵袭性酵母菌分布特点，从而了解侵袭性酵母菌感染的流行病学现状。从2012～2013年及2016～2017年的结果看，北京医院侵袭性酵母菌感染白念珠菌占首位，其次是光滑、近平滑及热带念珠菌等，与文献报道相符[3-4]。我们的检测结果显示，血流感染中白念珠菌最常见，结果与文献报道相符[1]。还有相当数量的念珠菌菌血症是由非白念珠菌引起的，需引起临床医生重视。同时监测还显示近平滑念珠菌和热带念珠菌引起血流感染几乎没有区别，但是我们知道近平滑念珠菌典型的特征是在葡萄糖溶液中生长，具有很强的产生生物膜的能力，而且经常定植在甲亢患者皮肤上，患者经常因为长期使用中心静脉导管或肠外营养出现念珠菌菌血症[6]。所以，微生物实验室检测出近平滑念珠菌时要根据临床患者的症状和体征，认真分析谨慎出报告，一定要分清楚是定植还是污染。我们收集了2012～2013年及2016～2017年念珠菌病患者的105例无菌体液，最常见的是白念珠菌，与他人报道相符[7-8]。普通外科及胸科患者，由于手术操作破坏了人体的免疫屏障，术后患者也容易引起真菌感染，白念珠菌仍然是主要的病原菌，虽然整体的感染率在降低，但是临床还是应引起重视。

从流行病学角度分析，男性多于女性，其中大于65岁以上的老年患者，是侵袭性真菌病的高发人群，应以其重视。我院以老年患者居多，这些人群由于免疫功能低下，抵抗力差，患有慢性疾病比如糖尿病、哮喘等，长期使用广谱抗生素，住院时间长等特点，容易罹患真菌感染。真菌菌血症因为早期诊断难度大、临床治疗疗效差、病死率高等特点，已成为医院感染中急需解决的问题。

我们参照最新的真菌药敏标准对我们的结果进行判读[9]，由于我们收集的标本都是无菌体液，且以老年患者居多，标本量不多，但比其他部位来源的标本，意义重大，这些无菌部位的标本具有重要临床意义和可研究性。本研究希望能引起临床医生的重视且勿盲目乱用抗真菌药，虽然临床中对于真菌感染疑似患者常常会进行经验性治疗和抢先治疗，但理想的情况是能和实验室配合见到报告后再合理使用药物，既减少患者开支又能对症下药，目的是让患者早日摆脱疾病的痛苦。我们数据显示我院急诊室侵袭性酵母菌血症感染率最高，说明急诊室环境比较差，患者及家属穿梭在同一个环境也是造成感染的一个重要原因，院内感染不容忽视，需要加强急诊室的管理。本研究是我院回顾性监测，填补了我院侵袭性酵母样真菌研究的空白，后续还需要对侵袭性真菌的体外药敏结果做进一步的研究，为我院侵袭性真菌感染的诊治提供参考依据。