妊娠期肝内胆汁淤积症患者血清25-羟维生素D水平检测及其相关性研究

王奔 黄晓钦 施晓华 朱晓燕 韩利娟 林雪峰

维生素D在妊娠中发挥着重要的免疫作用，其缺乏时可能引起一系列的妊娠期并发症[1]。维生素D在体内的活性形式为 1，25 二羟维生素 D[1，25-（OH）D2]，前体为 25-羟维生素 D[25-（OH）D]，半衰期 2～3 周，且稳定存在于血液中，因此临床上普遍接受25-（OH）D作为体内维生素D水平的评价指标[2-3]。研究表明，维生素D缺乏在妊娠期妇女当中相当普遍[4-6]，其与妊娠期肝内

胆汁淤积症（intrahepatic cholestasis of pregnancy，ICP）有一定联系。本研究通过对门诊产前检查孕妇的随访，检测其血清25-（OH）D水平，分析其与ICP的关系，为临床ICP高危人群的早期筛查和预防干预提供依据，现报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象 选择2017年10月至2019年4月在乐清市妇幼保健院定期产检及住院的孕妇167例，年龄16～40（27.85±5.04）岁。根据 ICP 水平[7]将所有孕妇分为 3组，血清总胆汁酸（TBA）10～40μmol/L 62例（轻度ICP组），年龄（28.52±4.78）岁；TBA＞40μmol/L 45 例（重度ICP 组），年龄（30.11±5.81）岁；TBA＜10μmol/L 60 例（正常对照组），年龄（26.47±5.24）岁。3组孕妇年龄差异无统计学意义（F=2.822，P ＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 检测方法 所有孕妇在孕期11～13+6周采集空腹外周静脉血2ml于含促凝剂和分离胶的一次性真空采血管，及时离心并检测血样。由浙江佰辰医疗科技有限公司利用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）法对血清 25-（OH）D水平进行检测，采用Waters Xevo TQD UPLC-MS/MS液相色谱仪（美国Waters公司）。TBA检测由本科室利用生化酶反应法进行检测，采用日立7180全自动生化仪（日本日立公司）。

1.2.2 维生素D营养状态评定标准 以血清25-（OH）D水平评定孕妇体内维生素D的营养状态[8]：＜20ng/ml为维生素D缺乏，21～30ng/ml为维生素D不足，31～100ng/ml为维生素D足量，＞100ng/ml为维生素D过量。

1.3 统计学处理 采用SPSS21.0统计软件，计量资料以表示，多组比较采用方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验；计数资料以百分率表示，组间比较采用χ2检验；相关性分析采用Pearson法。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组孕妇血清维生素D评定情况及TBA水平比较 见表1。

表1 3组孕妇血清维生素D评定情况及TBA水平比较

由表1可见，167例孕妇中血清 25-（OH）D低于正常水平149例（89.22%），重度ICP组孕妇缺乏比例升高，达到 95.56%。重度、轻度 ICP 组血清 25-（OH）D 水平低于正常对照组，差异均有统计学意义（t=3.532、2.570，均 P＜0.05）。

2.2 3组孕妇外周血TBA与血清25-（OH）D水平的相关性分析 见图1。

图1 TBA与25-（OH）D的相关性分析曲线拟合图

由图1可见，3组孕妇外周血中的TBA与25-（OH）D水平无线性相关（r=-0.149，P ＞0.05）。

3 讨论

ICP是妊娠期最常见的肝脏疾病，以皮肤瘙痒、黄疸、肝功能异常为特征，易导致胎儿宫内窘迫、羊水污染、新生儿窒息、早产及围生儿死亡等，其围生儿患病率和死亡率显著高于正常孕妇，故引起妇产科医生的普遍重视[9-11]。ICP病因学机制尚不明确，大量研究认为，其可能与激素水平、遗传、微量元素、过氧化物酶、免疫等因素相关[12]。临床上对ICP的治疗一直采取对症支持治疗，效果不甚理想[13]。因此，研究ICP的发病机制，有助于临床更好地提前干预ICP的发病。

维生素D是人体必需的营养素，主要有维生素D2和D3两种，其中维生素D2为骨化醇，维生素D3为胆骨化醇，主要通过阳光中紫外线照射转变和食物摄取两种方式获取。维生素D2是由紫外线照射植物中的麦角固醇产生，但在自然界的存量很少。维生素D3则由人体表皮和真皮内含有的7-脱氢胆固醇经日光中紫外线照射转变而成。维生素D2和维生素D3对人体的作用和作用机制完全相同，哺乳动物和人类对两者的利用亦无区别[14]。

UPLC-MS/MS法具有较高的灵敏度、特异度和准确度，近年来在临床上得到了广泛应用。本研究采用UPLC-MS/MS 法分别检测血清中 25-（OH）D2、25-（OH）D3水平，以两者的总合作为25-（OH）D水平。研究显示妊娠期孕妇的维生素D含量普遍不足，与国内外大量的调查结果一致[15]，且ICP孕妇的维生素D缺乏比例明显较正常孕妇高。因此监测妊娠期孕妇的维生素D水平对整个妊娠过程有着积极的意义，有助于指导孕妇及时合理补充维生素D。

本研究分别对不同ICP水平的孕妇进行外周血维生素D检测，结果表明重度ICP组孕妇血清维生素D含量较正常组和轻度ICP组下降，但25-（OH）D水平与TBA无明显线性相关。可能维生素D的缺乏不是导致ICP发生的直接因素，但仍不能排除ICP与维生素D缺乏可能存在的相关性。王竹晨等[16]探讨了外周血硒水平及谷胱甘肽过氧化物酶与ICP的相关性，ICP的发生可能是多因素共同作用的结果。黄小霞等[17]研究发现维生素D受体在ICP患者体内异常表达，可能是导致ICP发生的根本原因。谢芳等[18]的研究显示，采用药物联合低脂饮食和维生素D干预ICP者，能有效减轻ICP患者皮肤瘙痒的情况，显著改善患者肝功能，有利于妊娠顺利进行。这也说明维生素D缺乏与ICP的发生存在一定联系，妊娠妇女有效补充维生素D可以促进ICP病情的减轻。

此外，本研究为非干预性研究，虽然证实重度ICP组中维生素D显著下降，但无法分析维生素D干预的效果。孕期妇女补充维生素D是否能够降低ICP的风险和妊娠结局，仍需进一步通过大样本、前瞻性的随对照临床试验进行研究。