LC-MS/MS法测定枸杞中啶虫脒、吡虫啉农药残留的方法学研究
2020-01-06张向春宁夏建投设计研究总院有限公司
□ 张向春 宁夏建投设计研究总院（有限公司）
1 枸杞的价值
枸杞具有美容养颜、保护肝脏等多种保健功效，配合菊花茶食用有清肝明目的效果。能有效抗预防肿瘤、高血糖、高血压等多种疾病，并且还有抗衰老、抗疲劳等多种功效。
本论文建立了液相色谱—串联质谱同时检测枸杞中啶虫脒、吡虫啉农药残留量的检测方法。为枸杞中农药残留的检测提供一种新的高效的分析手段。
2 材料与方法
2.1 主要仪器、试剂
液相色谱—串联质谱仪XevoTQ—SMicro串联四级杆、分析天平AB104—N、试剂：甲醇、乙腈、甲苯。
2.2 流动相的配制
0.1 %甲酸水：量取1 mL甲酸于1 000 mL容量瓶中，用水定容，作为流动相。
乙腈：用量筒量取1 000 mL乙腈，作为流动相。
2.3 样品处理
2.3.1 提取
称取枸杞试样2 g（精确至0.01 g）于50 mL离心管中，加入15 mL乙腈，再加入5 mL水，涡旋混匀仪涡旋5 min，加入2 g氯化钠，再涡旋5 min，4 200 r/min离心5 min，取全部上清液于150 mL鸡心瓶中，在离心管中再加入15 mL乙腈，重复涡旋5 min，4 200 r/min离心5 min，取全部上清液与之前的上清液合并，于40 ℃水浴条件下旋转蒸发至1～2mL，待净化。
2.3.2 净化
活化：加样前先用5 mL水再用5 mL乙腈活化固相萃取柱。上样：将提取后待净化的样品倒入活化后的固相萃取柱中。淋洗：用2 mL乙腈—甲苯溶液（1∶1）洗涤样品瓶两次，将溶液依次倒入固相萃取住中。洗脱：用25 mL乙腈—甲苯溶液（1∶1）洗脱固相萃取柱，并将溶液收集在储液器中。浓缩：将储液器放置40 ℃水浴条件下氮吹近干，用1 mL的乙腈—水溶液（1∶1）溶解，经0.22 μm滤膜过滤，检测。
3 方法验证
3.1 加标回收率实验
分别称取枸杞样品2.00 g（精确至0.001 g）两组，编号记为1#、2#，对于两份样品分别进行低水平（LOQ）添加和高水平（4LOQ）添加，通过对2—4样品前处理的方法进行处理，测定它们的加标回收率，测得的数据见表1。
结果表明，啶虫脒和吡虫啉在本方法试验中，不同添加水平下的加标回收率均符合GB/T 27404—2008附录F的要求。
3.2 精密度试验
分别称取2.0 g（精确至0.001 g），加入1.0 mL的10 ng/mL啶虫脒标准应用液和1.0 mL的10 ng/mL的吡虫啉标准应用液，做6组平行实验测定，枸杞中啶虫脒、吡虫啉的加标回收率及RSD值见下表2所示。
表1 不同加标浓度的验证
表2 精密度试验
由表2可知在同一质谱仪测定值的RSD均大于1.3%，小于5%，说明试验精密度良好。
4 讨论
本次实验所建立的液相色谱—串联质谱方法，灵敏度高、精密度好、准确度高。检测指标均符合国内外对啶虫脒、吡虫啉限量的要求，适合于枸杞中啶虫脒、吡虫啉农药残留检测。
