唐山大地震40年幸存截瘫患者免疫功能分析

王菊惠，袁宝军△，李 超，杨宏秀，张 倩，张翠华

(1.开滦总医院检验科，河北唐山 063000；2：唐山市传染病医院检验科，河北唐山 063000)

作为重大自然灾害的幸存者，40年来唐山地震截瘫患者受到多种并发症侵扰，免疫功能受到不同程度的影响。2010年对唐山地震截瘫患者进行过免疫球蛋白的测定分析，发现该人群的免疫球蛋白及C3水平均与健康对照有较大差异[1]。2016年陆续对幸存的110例截瘫患者作了全血淋巴细胞亚群分析，发现截瘫组CD8+T细胞升高，CD4+/CD8+和CD16+CD56+NK细胞水平下降，免疫功能紊乱[2]。本实验主要检测现阶段唐山地震截瘫患者免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)和补体C3、C4水平，并与健康对照者及2010年的结果作对比，观察其动态变化，同时与淋巴细胞亚群做相关性分析，动态观察长期截瘫患者细胞免疫及体液免疫的基本状况，为临床治疗和患者恢复提供基础数据。

1 资料与方法

1.1一般资料 1976年唐山大地震幸存截瘫患者110例(截瘫组)，其中，男性38例，平均年龄(64.7±7.7)岁，女性72例，平均年龄(66.1±7.8)岁。健康对照组：四肢健康行动自如体检健康者130例，其中男性41例，女性89例，平均年龄(68.7±8.9)岁。

1.2标本采集 从2015年7月至2016年12月陆续采集截瘫组及健康对照组清晨空腹静脉血共5 mL，2 mL全血于采集当天测定淋巴细胞亚群，另外3 mL及时分离血清，-20 ℃保存，统一测定免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)和补体C3、C4水平。

1.3检测方法 T淋巴细胞亚群采用流式细胞术测定，试剂由美国BD公司生产，在美国BD FACSCalibur流式细胞仪上测定。血清免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)和补体C3、C4采用比浊法在日立7600生化分析仪上测定，试剂均由北京中生公司提供。

2 结 果

2.1截瘫组与健康对照组血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM及补体C3、C4水平比较 结果显示，截瘫组血清IgG、补体C3、C4水平显著高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，截瘫组IgA高于健康对照组、IgM低于健康对照组，但差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两组各指标比较

表2 截瘫患者2016年各指标与2010年结果比较

2.2截瘫患者2016年血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM及补体C3水平与2010年结果比较 结果显示，截瘫患者2016年血清中IgG、IgA、IgM水平显著低于2010年，差异有统计学意义(P<0.05)，补体C3亦低于2010年，但差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

2.3相关性分析 截瘫患者血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM及补体C3、C4与外周血中CD4+、CD8+T细胞、CD19+B细胞和CD16+CD56+NK细胞的相关性分析结果显示，血液中IgA与C4、IgA与CD16+CD56+相关，相关系数r分别为0.264和0.291，P值分别为0.022和0.031。血液中C4与C3、C4与CD4+、C4与CD8+、C4与CD16+CD56+显著性相关，相关系数r分别为0.348、0.504、0.562和-0.865，P值分别为0.002、0.000、0.000和0.000。其余均无相关性。见表3。

表3 截瘫患者血清中各指标与外周血中CD4+、CD8+T细胞、CD19+B细胞和CD16+CD56+NK细胞的相关性

续表3 截瘫患者血清中各指标与外周血中CD4+、CD8+T细胞、CD19+B细胞和CD16+CD56+NK细胞的相关性

注：*表示在0.05水平(双侧)上相关；**表示 在 0.01 水平(双侧)上显著相关；-表示无数据

3 讨 论

免疫功能分为非特异性免疫和特异性免疫，其中特异性免疫又包括体液免疫和细胞免疫，由T、B细胞来完成。B淋巴细胞介导体液免疫，其受特异性抗原刺激后，分化、增殖为浆细胞产生抗体，如IgM、IgG、IgA等，发挥免疫效应等。补体可协同抗体形成抗原-抗体复合物，产生溶菌和溶细胞现象，它的作用是多方面的[3]。本研究结果显示，地震截瘫患者40年后，血清IgG、补体C3、C4水平显著高于健康对照组。说明截瘫患者长期受压疮、泌尿系感染等并发症[4]的影响，机体长期处于免疫应答的状态，免疫球蛋白IgG和补体C3、C4水平居高不下，而IgA 和IgM与健康对照组之间比较，差异无统计学意义(P>0.05)。而2010年的研究结果为IgG、IgA、IgM及补体C3、均高于健康对照组[1]。张玉纯等[5]研究的唐山地震11年后截瘫患者的体液免疫(IgM、IgG、IgA、C3和溶菌酶)和健康人无明显差别。这也许与采取标本时各截瘫患者并发症的发生和进展有直接关系。与李湘英[6]在免疫球蛋白及补体的测定在系统性红斑狼疮中研究相似。

本研究结果与2010年自身结果相比，IgM、IgG、IgA显著减低，C3轻度减低，可能是因为人体老龄化，机体免疫功能下降的缘故。与林俊锦等[7]研究的老年结核病患者较青壮年患者细胞免疫功能低下相符。同时因为各种并发症的原因，截瘫患者机体细胞免疫功能紊乱，淋巴细胞亚群分布异常，CD4+细胞减少或功能低下[2]，其产生淋巴因子协助B淋巴细胞表达和分泌免疫球蛋白的能力相对减弱，从而导致体液中IgM、IgG、IgA减少。

T、B淋巴细胞及NK细胞均为免疫细胞，参与免疫应答，清除进入机体的细菌和病毒等。

其中T淋巴细胞介导细胞免疫，CD4+和CD8+T细胞相互制约及平衡可以平衡机体的免疫应答。本研究结果显示IgA与补体C4和NK细胞有相关性，补体C4与CD4+和CD8+T细胞和NK细胞均有显著相关性，说明体液免疫和细胞免疫在免疫应答中协同发挥作用。其中免疫球蛋白IgA的作用不容忽视，作用机理有待进一步研究。其中补体C4与IgA、CD4+和CD8+T细胞和NK细胞之间均有相关，说明C4积极发挥了多项作用。李冰等[8]的研究也探讨了C4在系统性红斑狼疮中诊断价值。国外研究也发现在人类急性脑损伤中的脑组织损伤区有补体C4d的大量沉积[9]。说明补体C4在机体的免疫应答中起了重要作用，还有待进一步研究。

4 结 论

唐山地震截瘫患者40年来多种并发症的存在，激发机体的免疫系统发生了紊乱，淋巴细胞亚群比例失调，不仅细胞免疫功能低下，IgM、IgG、IgA 和C3、C4水平均有不同程度变化。因此对免疫球蛋白、补体及淋巴细胞亚群联合检测，对于监测病情和指导治疗有一定参考作用。